摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
缩写词英汉对照 | 第14-15页 |
文中涉及到的基因 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-28页 |
1 引言 | 第16页 |
2 铝对植物的毒害 | 第16-17页 |
2.1 植物铝毒害表现 | 第16页 |
2.2 铝毒害作用机制 | 第16-17页 |
3 植物抗铝毒机制 | 第17-20页 |
3.1 有机酸的分泌 | 第18-19页 |
3.2 有机酸参与的内部解铝毒机制 | 第19页 |
3.3 其他机制 | 第19-20页 |
4 水稻耐铝毒机制的研究进展 | 第20-24页 |
4.1 水稻耐铝毒基因的QTL分析 | 第20页 |
4.2 参与水稻耐铝毒的重要基因 | 第20-24页 |
5 荞麦高抗高积累铝机制的研究进展 | 第24-25页 |
6 本研究的意义、内容及技术路线 | 第25-28页 |
第二章 水稻抗铝毒转录因子ART1互作蛋白的酵母双杂交筛选 | 第28-36页 |
1 引言 | 第28页 |
2 材料与方法 | 第28-31页 |
2.1 试验材料 | 第28-29页 |
2.2 试验方法 | 第29-31页 |
3 结果与分析 | 第31-34页 |
3.1 ART1转录激活位点 | 第31-32页 |
3.2 ART1互作蛋白的cDNA文库筛选 | 第32页 |
3.3 ART1候选互作蛋白的初步筛选 | 第32-33页 |
3.4 酵母中的互作验证 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-35页 |
5 小结 | 第35-36页 |
第三章 ART1互作蛋白OsVOZ1和OsVOZ2的抗铝毒功能分析 | 第36-48页 |
1 引言 | 第36-37页 |
2 材料与方法 | 第37-41页 |
2.1 试验材料 | 第37-38页 |
2.2 试验方法 | 第38-41页 |
3 结果与分析 | 第41-47页 |
3.1 Split-LUC系统证实ART1和OsVOZ1及OsVOZ2的互作 | 第41-42页 |
3.2 铝处理对水稻OsVOZ1和OsVOZ2表达的影响 | 第42页 |
3.3 水稻osvoz1、osvoz2突变体的抗铝毒表型 | 第42-44页 |
3.4 水稻osvoz2; OsVOZ1-Ri突变体的抗铝毒表型 | 第44-45页 |
3.5 拟南芥atvoz1、atvoz2及atvoz1atvoz2突变体的抗铝毒表型 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47页 |
5 小结 | 第47-48页 |
第四章 铝高积累植物苦荞的转录组测序及抗铝毒基因系统进化分析 | 第48-62页 |
1 引言 | 第48页 |
2 材料与方法 | 第48-50页 |
2.1 试验材料 | 第48页 |
2.2 试验方法 | 第48-50页 |
3 结果与分析 | 第50-59页 |
3.1 苦荞中铝的积累模式 | 第50-51页 |
3.2 转录本重新组装及注释 | 第51-53页 |
3.3 RNA-seq表达数据的校验 | 第53页 |
3.4 铝对基因表达的整体影响 | 第53-55页 |
3.5 铝对有机酸代谢和分泌相关基因的影响 | 第55-57页 |
3.6 铝耐性基因的表达和系统发育进化分析 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-61页 |
5 小结 | 第61-62页 |
第五章 苦荞中 ART1 同源基因的鉴定与功能分析 | 第62-74页 |
1 引言 | 第62页 |
2 材料与方法 | 第62-65页 |
2.1 试验材料 | 第62-63页 |
2.2 实验方法 | 第63-65页 |
3 结果与分析 | 第65-71页 |
3.1 FtARL1和FtARL2的克隆与生物信息学分析 | 第65-67页 |
3.2 FtARL1和FtARL2表达模式分析 | 第67页 |
3.3 FtARL1和FtARL2的亚细胞定位 | 第67-68页 |
3.4 拟南芥回复株系stop1;FtARL1的铝和低pH表型分析 | 第68-69页 |
3.5 stop1;FtARL1株系中STOP下游铝和H~+抗性基因的表达分析 | 第69-71页 |
4 讨论 | 第71-72页 |
5 小结 | 第72-74页 |
第六章 ART1下游基因ALS1在苦荞中的同源基因的鉴定与分析 | 第74-86页 |
1 引言 | 第74页 |
2 材料与方法 | 第74-76页 |
2.1 试验材料 | 第74-75页 |
2.2 实验方法 | 第75-76页 |
3 结果与分析 | 第76-84页 |
3.1 FtALOL1和FtALOL2的克隆与生物信息学分析 | 第76-78页 |
3.2 FtALOL1和FtALOL2表达模式分析 | 第78-81页 |
3.3 FtALOL1的组织表达模式 | 第81页 |
3.4 FtALOL1和FtALOL2的亚细胞定位 | 第81-82页 |
3.5 酵母异源表达检测铝转运能力 | 第82-83页 |
3.6 als1-1;FtALOL1和als1-1;FtALOL2回复株系的抗铝毒表型分析 | 第83-84页 |
4 讨论 | 第84-85页 |
5 小结 | 第85-86页 |
全文结论 | 第86-88页 |
1 主要结论 | 第86-87页 |
1.1 OsVOZ1和OsVOZ2参与ART1介导的水稻抗铝毒过程 | 第86页 |
1.2 全基因组的转录组分析揭示了铝高积累植物苦荞独特的耐铝机制 | 第86页 |
1.3 苦荞ART1同源基因的鉴定及功能分析 | 第86-87页 |
1.4 苦荞ALS1同源基因的鉴定及功能分析 | 第87页 |
2 本文创新点 | 第87页 |
3 存在的不足 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-96页 |
附录 | 第96-114页 |
一、酵母感受态细胞的制备 | 第96-97页 |
二、酵母感受态细胞的转化 | 第97-98页 |
三、酵母点板及X-gal显色实验 | 第98-99页 |
四、酵母CDNA文库的转化 | 第99-101页 |
五、农杆菌感受态细胞制备 | 第101-102页 |
六、FTARI1序列信息 | 第102-104页 |
七、FTARL2序列信息 | 第104-106页 |
八、FTAIOI1序列信息 | 第106-108页 |
九、FTALOL2序列信息 | 第108-110页 |
十、文章中用到的引物 | 第110-114页 |
在读期间发表的论文 | 第114-116页 |
致谢 | 第116页 |