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人源性非O157产志贺毒素大肠埃希菌分离株特征及肠溶血素基因分型分析

缩略词第6-7页
论文摘要第7-9页
Abstract第9-11页
前言第12-15页
材料和方法第15-33页
    1 材料第15-19页
        1.1 标本来源第15页
        1.2 菌株来源第15-17页
            1.2.1 人源非O157 STEC菌株第15页
            1.2.2 人源stx_(2e)阳性非O157 STEC全基因组测序菌株第15-16页
            1.2.3 其它来源非O157 STEC菌株第16页
            1.2.4 参考菌株第16-17页
        1.3 主要试剂、仪器以及培养基第17-19页
            1.3.1 主要试剂第17-18页
            1.3.2 实验主要仪器第18页
            1.3.3 实验主要培养基第18-19页
    2 方法第19-33页
        2.1 人源非O157 STEC菌株分析第19-23页
            2.1.1 人粪便标本STEC分离第19-20页
            2.1.2 菌株保存第20页
            2.1.3 菌株复苏第20页
            2.1.4 菌株基因组制备第20页
            2.1.5 STEC菌株血清型鉴定第20-21页
            2.1.6 毒力基因检测第21-23页
            2.1.7 MLST分析第23页
        2.2 STEC413和STEC509菌株分析第23-29页
            2.2.1 基于系统发生树的stx_(2e)亚型分析第23页
            2.2.2 菌株总RNA提取第23-24页
            2.2.3 反转录实时荧光定量PCR (qRT-PCR)测定stx_2转录第24-25页
            2.2.4 菌株对Vero细胞的细胞毒性检测第25-26页
            2.2.5 全基因组测序—菌株基因组的提取、测序和组装第26页
            2.2.6 Stx前噬菌体序列分析第26-27页
            2.2.7 基于菌株全基因组的系统发生分析第27-29页
        2.3 非O157产志贺毒素大肠埃希菌肠溶血素基因(ehxA)遗传多样性检测第29-33页
            2.3.1 ehxA 阳性菌株筛查第29页
            2.3.2 ehxA阳性菌株溶血能力检测第29-30页
            2.3.3 ehxA基因全长序列测定第30页
            2.3.4 基于ehxA基因全长序列的进化分析第30页
            2.3.5 细菌全基因组框架图测序第30-31页
            2.3.6 质粒不相容群(Rep/Inc)分析第31页
            2.3.7 实验结果统计分析第31-32页
            2.3.8 ehxA基因GenBank序列号第32-33页
结果第33-58页
    1 27株人源非O157 STEC分离株特征第33-37页
        1.1 菌株分离结果第33页
        1.2 分离株血清型鉴定结果第33页
        1.3 分离株携带stx及stx_1/stx_2亚型情况第33-34页
        1.4 分离株毒力基因携带情况第34页
        1.5 分离株粘附相关基因携带情况第34-36页
        1.6 多位点序列分型(MLST)分析结果第36-37页
    2 2株人源产stx_(2e)型非O157 STEC菌株分析第37-48页
        2.1 人来源stx_(2e)阳性的STEC菌株在中国的流行情况第37-38页
        2.2 菌株STEC413和STEC509的血清型和stx基因分型第38-40页
        2.3 Stx_(2e)的表达和细胞毒性分析第40-41页
            2.3.1 Stx2e诱导性(转录水平)分析第40-41页
            2.3.2 Stx2e细胞毒性分析第41页
        2.4 菌株STEC413和STEC509的全基因组特征第41-42页
        2.5 Stx2e噬菌体特征分析第42-46页
        2.6 菌株STEC413和STEC509的全基因组进化分析第46-48页
    3 非O157 STEC肠溶血素基因(ehxA)分析第48-58页
        3.1 434株非O157 STEC菌株中ehxA基因检出率第48-49页
        3.2 ehxA基因和ehxCABD基因簇的多样性分析第49-50页
        3.3 基于ehxA全长序列的进化分析第50-52页
        3.4 STEC菌株来源与ehxA组别间的关系第52-53页
        3.5 STEC血清群与ehxA组别之间的关系第53-55页
        3.6 肠溶血素(ehxA)基因与其它毒力基因之间的相关性第55-56页
        3.7 ehxA与溶血活性第56-57页
        3.8 ehxA阳性非O157 STEC菌株中的质粒不相容性(Inc)/复制子(Rep)分析第57-58页
讨论第58-63页
参考文献第63-68页
硕士研究生在读期间发表文章目录第68-70页
附件第70-84页
致谢第84页

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