中文摘要 | 第14-16页 |
英文摘要 | 第16-17页 |
缩略词表 | 第18-19页 |
第一章 前言 | 第19-34页 |
1 盐胁迫对植物生长发育和生理代谢的影响 | 第19-21页 |
1.1 盐胁迫对种子萌发和幼苗生长的影响 | 第19-20页 |
1.2 盐胁迫对植物生理代谢的影响 | 第20-21页 |
1.2.1 盐胁迫对植物光合特性的影响 | 第20-21页 |
1.2.2 盐胁迫对植物体内离子水平的影响 | 第21页 |
1.2.3 盐胁迫对呼吸作用的影响 | 第21页 |
2 植物的耐盐调节机制 | 第21-23页 |
2.1 植物渗透调节作用 | 第21-22页 |
2.2 活性氧清除机制 | 第22页 |
2.3 离子区隔化作用 | 第22-23页 |
3 NHX1基因(Na+/H+逆向转运蛋白基因)的研究进展 | 第23-25页 |
3.1 NHX_1基因的发现 | 第23页 |
3.2 NHX_1基因编码蛋白的结构和功能 | 第23-24页 |
3.3 NHX_1基因的克隆和分析 | 第24-25页 |
3.4 NHX_1基因表达与耐盐性的关系 | 第25页 |
4 植物遗传转化技术及其研究进展 | 第25-29页 |
4.1 植物转基因技术的发展 | 第26页 |
4.2 植物常用的几种转基因方法 | 第26-29页 |
4.2.1 农杆菌介导法 | 第26-27页 |
4.2.2 基因枪法 | 第27-28页 |
4.2.3 花粉管通道法 | 第28页 |
4.2.4 电击法、激光发和显微注射法 | 第28-29页 |
5 GUS报告基因的检测研究 | 第29-31页 |
5.1 GUS基因的发现 | 第29页 |
5.2 消除植物内源GUS的影响 | 第29页 |
5.3 GUS活性测定方法 | 第29-31页 |
5.3.1 组织化学定位法 | 第30页 |
5.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳原位分析 | 第30页 |
5.3.3 荧光分析法 | 第30-31页 |
5.3.4 分光光度计法 | 第31页 |
6 珠美海棠研究进展 | 第31-32页 |
6.1 珠美海棠的耐盐性研究 | 第31页 |
6.2 珠美海棠的繁殖和育苗研究 | 第31-32页 |
6.3 珠美海棠的分子生物学研究 | 第32页 |
7 本研究的目的、意义和内容 | 第32-34页 |
7.1 研究目的、意义 | 第32-33页 |
7.2 研究内容 | 第33-34页 |
第二章 珠美海棠MZ_2NHX_1基因的克隆 | 第34-49页 |
1 试验材料 | 第34-39页 |
1.1 植物材料 | 第34页 |
1.2 试剂及耗材 | 第34-35页 |
1.3 引物合成 | 第35页 |
1.4 主要实验仪器 | 第35-36页 |
1.5 试验方法 | 第36-39页 |
1.5.1 植物材料处理 | 第36页 |
1.5.2 总RNA提取 | 第36-37页 |
1.5.3 去除总RNA中的基因组DNA | 第37-38页 |
1.5.4 反转录成第一条cDNA链 | 第38页 |
1.5.5 PCR扩增 | 第38-39页 |
1.5.6 PCR产物凝胶纯化回收 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-47页 |
2.1 珠美海棠幼根总RNA提取 | 第39-40页 |
2.2 珠美海棠Mz_2NHX_1基因的克隆 | 第40-41页 |
2.3 珠美海棠Mz_2NHX_1基因的生物信息学分析 | 第41-47页 |
2.3.1 Mz_2NHX_1编码氨基酸序列分析 | 第42-45页 |
2.3.2 Mz_2NHX_1基因编码蛋白的理化性质 | 第45-47页 |
2.3.3 Mz_2NHX_1蛋白结构分析 | 第47页 |
3 讨论与小论 | 第47-49页 |
第三章 珠美海棠Mz_2NHX_1基因表达载体的构建 | 第49-58页 |
1 材料与方法 | 第49-52页 |
1.1 试验材料 | 第49页 |
1.2 试验方法 | 第49-52页 |
1.2.1 扩大繁殖pRI 201-AN-GUS DNA表达载体 | 第49-50页 |
1.2.2 提取表达载体大肠杆菌菌液质粒 | 第50页 |
1.2.3 双酶切pRI 201-AN-GUS DNA表达载体 | 第50-51页 |
1.2.4 纯化、回收表达载体片段 | 第51页 |
1.2.5 连接Mz_2NHX_1和pRI 201-AN-GUS DNA | 第51页 |
1.2.6 重组pRI 201-AN-GUS DNA+Mz_2NHX_1表达载体转化大肠杆菌感受态细胞 | 第51页 |
1.2.7 重组pRI 201-AN-GUS DNA+Mz_2NHX_1表达载体转化农杆菌感受态细胞 | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-56页 |
2.1 双酶切pRI 201-AN-GUS DNA表达载体 | 第52-54页 |
2.2 连接Mz_2NHX_1基因和pRI 201-AN-GUS DNA表达载体及转化大肠杆菌 | 第54-55页 |
2.3 表达载体pRI 201-AN-GUS+Mz_2NHX_1转化农杆菌 | 第55-56页 |
3 讨论与小结 | 第56-58页 |
第四章 珠美海棠Mz_2NHX_1基因对拟南芥的遗传转化 | 第58-65页 |
1 材料与方法 | 第58-60页 |
1.1 试验材料 | 第58页 |
1.2 拟南芥的种植方法 | 第58-59页 |
1.3 浸花法转化拟南芥 | 第59页 |
1.4 抗性筛选 | 第59页 |
1.5 转基因植株初步检测 | 第59-60页 |
1.5.1 GUS组织化学染色法检测目的基因 | 第59-60页 |
1.5.2 PCR检测目的基因 | 第60页 |
2 结果与分析 | 第60-63页 |
2.1 拟南芥种植和浸花法转化 | 第60-61页 |
2.2 转Mz_2NHX_1基因拟南芥的抗性筛选 | 第61-62页 |
2.3 目的基因Mz_2NHX_1在拟南芥中表达情况的初步检测 | 第62-63页 |
2.3.1 GUS组织化学检测 | 第62-63页 |
2.3.2 PCR检测转基因拟南芥DNA | 第63页 |
3 讨论与小结 | 第63-65页 |
3.1 农杆菌侵染浓度及转化时间对转化效率的影响 | 第63-64页 |
3.2 转化缓冲液成分不同对转化效率的影响 | 第64-65页 |
第五章 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
附件 | 第77-89页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及参与的科研项目 | 第89页 |