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珠美海棠Mz2NHX1基因对拟南芥的遗传转化

中文摘要第14-16页
英文摘要第16-17页
缩略词表第18-19页
第一章 前言第19-34页
    1 盐胁迫对植物生长发育和生理代谢的影响第19-21页
        1.1 盐胁迫对种子萌发和幼苗生长的影响第19-20页
        1.2 盐胁迫对植物生理代谢的影响第20-21页
            1.2.1 盐胁迫对植物光合特性的影响第20-21页
            1.2.2 盐胁迫对植物体内离子水平的影响第21页
            1.2.3 盐胁迫对呼吸作用的影响第21页
    2 植物的耐盐调节机制第21-23页
        2.1 植物渗透调节作用第21-22页
        2.2 活性氧清除机制第22页
        2.3 离子区隔化作用第22-23页
    3 NHX1基因(Na+/H+逆向转运蛋白基因)的研究进展第23-25页
        3.1 NHX_1基因的发现第23页
        3.2 NHX_1基因编码蛋白的结构和功能第23-24页
        3.3 NHX_1基因的克隆和分析第24-25页
        3.4 NHX_1基因表达与耐盐性的关系第25页
    4 植物遗传转化技术及其研究进展第25-29页
        4.1 植物转基因技术的发展第26页
        4.2 植物常用的几种转基因方法第26-29页
            4.2.1 农杆菌介导法第26-27页
            4.2.2 基因枪法第27-28页
            4.2.3 花粉管通道法第28页
            4.2.4 电击法、激光发和显微注射法第28-29页
    5 GUS报告基因的检测研究第29-31页
        5.1 GUS基因的发现第29页
        5.2 消除植物内源GUS的影响第29页
        5.3 GUS活性测定方法第29-31页
            5.3.1 组织化学定位法第30页
            5.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳原位分析第30页
            5.3.3 荧光分析法第30-31页
            5.3.4 分光光度计法第31页
    6 珠美海棠研究进展第31-32页
        6.1 珠美海棠的耐盐性研究第31页
        6.2 珠美海棠的繁殖和育苗研究第31-32页
        6.3 珠美海棠的分子生物学研究第32页
    7 本研究的目的、意义和内容第32-34页
        7.1 研究目的、意义第32-33页
        7.2 研究内容第33-34页
第二章 珠美海棠MZ_2NHX_1基因的克隆第34-49页
    1 试验材料第34-39页
        1.1 植物材料第34页
        1.2 试剂及耗材第34-35页
        1.3 引物合成第35页
        1.4 主要实验仪器第35-36页
        1.5 试验方法第36-39页
            1.5.1 植物材料处理第36页
            1.5.2 总RNA提取第36-37页
            1.5.3 去除总RNA中的基因组DNA第37-38页
            1.5.4 反转录成第一条cDNA链第38页
            1.5.5 PCR扩增第38-39页
            1.5.6 PCR产物凝胶纯化回收第39页
    2 结果与分析第39-47页
        2.1 珠美海棠幼根总RNA提取第39-40页
        2.2 珠美海棠Mz_2NHX_1基因的克隆第40-41页
        2.3 珠美海棠Mz_2NHX_1基因的生物信息学分析第41-47页
            2.3.1 Mz_2NHX_1编码氨基酸序列分析第42-45页
            2.3.2 Mz_2NHX_1基因编码蛋白的理化性质第45-47页
            2.3.3 Mz_2NHX_1蛋白结构分析第47页
    3 讨论与小论第47-49页
第三章 珠美海棠Mz_2NHX_1基因表达载体的构建第49-58页
    1 材料与方法第49-52页
        1.1 试验材料第49页
        1.2 试验方法第49-52页
            1.2.1 扩大繁殖pRI 201-AN-GUS DNA表达载体第49-50页
            1.2.2 提取表达载体大肠杆菌菌液质粒第50页
            1.2.3 双酶切pRI 201-AN-GUS DNA表达载体第50-51页
            1.2.4 纯化、回收表达载体片段第51页
            1.2.5 连接Mz_2NHX_1和pRI 201-AN-GUS DNA第51页
            1.2.6 重组pRI 201-AN-GUS DNA+Mz_2NHX_1表达载体转化大肠杆菌感受态细胞第51页
            1.2.7 重组pRI 201-AN-GUS DNA+Mz_2NHX_1表达载体转化农杆菌感受态细胞第51-52页
    2 结果与分析第52-56页
        2.1 双酶切pRI 201-AN-GUS DNA表达载体第52-54页
        2.2 连接Mz_2NHX_1基因和pRI 201-AN-GUS DNA表达载体及转化大肠杆菌第54-55页
        2.3 表达载体pRI 201-AN-GUS+Mz_2NHX_1转化农杆菌第55-56页
    3 讨论与小结第56-58页
第四章 珠美海棠Mz_2NHX_1基因对拟南芥的遗传转化第58-65页
    1 材料与方法第58-60页
        1.1 试验材料第58页
        1.2 拟南芥的种植方法第58-59页
        1.3 浸花法转化拟南芥第59页
        1.4 抗性筛选第59页
        1.5 转基因植株初步检测第59-60页
            1.5.1 GUS组织化学染色法检测目的基因第59-60页
            1.5.2 PCR检测目的基因第60页
    2 结果与分析第60-63页
        2.1 拟南芥种植和浸花法转化第60-61页
        2.2 转Mz_2NHX_1基因拟南芥的抗性筛选第61-62页
        2.3 目的基因Mz_2NHX_1在拟南芥中表达情况的初步检测第62-63页
            2.3.1 GUS组织化学检测第62-63页
            2.3.2 PCR检测转基因拟南芥DNA第63页
    3 讨论与小结第63-65页
        3.1 农杆菌侵染浓度及转化时间对转化效率的影响第63-64页
        3.2 转化缓冲液成分不同对转化效率的影响第64-65页
第五章 结论第65-66页
参考文献第66-76页
致谢第76-77页
附件第77-89页
攻读硕士学位期间发表的论文及参与的科研项目第89页

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