| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 高温胁迫与昆虫的关系 | 第10-14页 |
| 1.1 高温胁迫对昆虫的影响 | 第10-12页 |
| 1.1.1 高温胁迫对昆虫生长发育的影响 | 第10-11页 |
| 1.1.2 高温胁迫对昆虫存活率的影响 | 第11页 |
| 1.1.3 高温胁迫对昆虫繁殖的影响 | 第11-12页 |
| 1.2 昆虫对高温胁迫的生理生化适应机制 | 第12-14页 |
| 1.2.1 小分子物质的代谢 | 第12页 |
| 1.2.2 热激蛋白的诱导表达 | 第12-13页 |
| 1.2.3 活性氧的清除机制 | 第13-14页 |
| 2 抗氧化酶系统 | 第14-17页 |
| 2.1 超氧化物歧化酶 | 第14-15页 |
| 2.2 过氧化氢酶 | 第15-16页 |
| 2.3 过氧化物酶 | 第16页 |
| 2.4 谷觥甘肽-S-转移酶 | 第16-17页 |
| 3 西花蓟马的研究进展 | 第17-20页 |
| 3.1 西花蓟马概述 | 第17-18页 |
| 3.2 高温对西花蓟马的影响 | 第18-20页 |
| 第二章 西花蓟马对高温胁迫的抗氧化反应 | 第20-29页 |
| 1 材料与方法 | 第20-23页 |
| 1.1 供试虫源 | 第20页 |
| 1.2 供试昆虫高温处理 | 第20-21页 |
| 1.3 粗酶液的提取 | 第21页 |
| 1.4 西花蓟马蛋白质含量的测定 | 第21-22页 |
| 1.4.1 试剂配制 | 第21页 |
| 1.4.2 标准曲线的制作 | 第21-22页 |
| 1.5 抗氧化酶活性测定 | 第22-23页 |
| 1.5.1 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第22页 |
| 1.5.2 过氧化氢酶(CAT)活性测定 | 第22-23页 |
| 1.5.3 过氧化物酶(POD)活性测定 | 第23页 |
| 1.5.4 谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活性测定 | 第23页 |
| 1.6 数据处理 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-27页 |
| 2.1 高温对西花蓟马若虫SOD活性的影响 | 第23-24页 |
| 2.2 高温对西花蓟马若虫CAT活性的影响 | 第24页 |
| 2.3 高温对西花蓟马若虫POD活性的影响 | 第24页 |
| 2.4 高温对西花蓟马若虫GSTs活性的影响 | 第24-27页 |
| 3 小结与讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 西花蓟马内参基因的筛选与验证 | 第29-41页 |
| 1 材料与方法 | 第30-32页 |
| 1.1 供试虫源 | 第30页 |
| 1.2 实验方法 | 第30页 |
| 1.2.1 不同发育历期西花蓟马的收集 | 第30页 |
| 1.2.2 温度处理 | 第30页 |
| 1.2.3 时间梯度 | 第30页 |
| 1.3 用于实时定量的cDNA的合成 | 第30-31页 |
| 1.4 候选基因的克隆与实时定量的引物设计 | 第31页 |
| 1.5 西花蓟马候选内参基因实时定量分析 | 第31页 |
| 1.6 目的基因的评价与验证 | 第31页 |
| 1.7 数据处理 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-38页 |
| 2.1 总RNA的含量和PCR扩增效率 | 第32-33页 |
| 2.2 候选内参基因的表达谱 | 第33页 |
| 2.3 候选内参基因表达稳定性分析 | 第33-37页 |
| 2.3.1 不同发育历期 | 第33-34页 |
| 2.3.2 高温胁迫 | 第34页 |
| 2.3.3 低温胁迫 | 第34页 |
| 2.3.4 高温胁迫不同时间梯度 | 第34页 |
| 2.3.5 高温胁迫不同时间梯度 | 第34-37页 |
| 2.4 内参基因稳定性验证 | 第37-38页 |
| 3 小结与讨论 | 第38-41页 |
| 第四章 西花蓟马过氧化氢酶基因的克隆与表达 | 第41-57页 |
| 1 实验材料 | 第41-42页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第42-46页 |
| 2.1 西花蓟马CAT基因的克隆 | 第42-44页 |
| 2.1.1 总RNA提取 | 第42页 |
| 2.1.2 cDNA第一条链合成 | 第42页 |
| 2.1.3 引物设计 | 第42-43页 |
| 2.1.4 中间片段扩增 | 第43页 |
| 2.1.5 目的基因片段的回收、连接、转化及测序 | 第43页 |
| 2.1.6 5’和3’末端片段克隆 | 第43页 |
| 2.1.7 基因序列拼接与分析 | 第43-44页 |
| 2.1.8 西花蓟马CAT基因组序列验证及其结构分析 | 第44页 |
| 2.1.9 西花蓟马CAT的生物信息学分析 | 第44页 |
| 2.2 西花蓟马CAT基因的表达模式分析 | 第44-46页 |
| 2.2.1 实验材料制备 | 第44-45页 |
| 2.2.2 总RNA提取 | 第45页 |
| 2.2.3 cDNA第一条链的合成 | 第45页 |
| 2.2.4 引物设计 | 第45页 |
| 2.2.5 实时定量分析 | 第45-46页 |
| 2.2.6 统计分析 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-54页 |
| 3.1 西花蓟马CAT基因的克隆与分析 | 第46-52页 |
| 3.1.1 西花蓟马总RNA的提取 | 第46页 |
| 3.1.2 西花蓟马CAT中间片段的获得 | 第46页 |
| 3.1.3 西花蓟马CAT cDNA 5’和3’末端快速扩增 | 第46-47页 |
| 3.1.4 西花蓟马CAT cDNA的全长验证 | 第47页 |
| 3.1.5 西花蓟马CAT的序列分析 | 第47-52页 |
| 3.2 西花蓟马CAT的表达模式分析 | 第52-54页 |
| 3.2.1 实时定量PCR标准曲线 | 第52-54页 |
| 3.2.2 CAT在不同高低温条件下的表达模式 | 第54页 |
| 3.2.3 CAT在不同高低温胁迫时间梯度下的表达模式 | 第54页 |
| 3.2.4 CAT在不同发育阶段的表达模式 | 第54页 |
| 4 小结与讨论 | 第54-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 硕士在读期间发表的研究生论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
