| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第17-33页 |
| 1.1 多肽类药物 | 第17-21页 |
| 1.1.1 多肽类药物概述 | 第17页 |
| 1.1.2 生物活性多肽的来源 | 第17-19页 |
| 1.1.3 活性肽分离纯化及检测技术 | 第19-21页 |
| 1.2 恶性肿痛 | 第21页 |
| 1.3 水生动物来源活性肽抗肿瘤机理研究进展 | 第21-29页 |
| 1.3.1 细胞毒作用(cytotoxicity) | 第21-24页 |
| 1.3.2 诱导肿瘤细胞凋亡 | 第24-25页 |
| 1.3.3 诱导肿瘤细胞分化 | 第25-26页 |
| 1.3.4 逆转肿瘤细胞多药耐药性 | 第26页 |
| 1.3.5 调节机体免疫功能 | 第26-27页 |
| 1.3.6 抑制肿瘤血管生长 | 第27-28页 |
| 1.3.7 抑制肿瘤细胞转移浸润 | 第28-29页 |
| 1.4 中华草龟养殖及利用现状 | 第29-30页 |
| 1.4.1 龟类养殖回顾 | 第29-30页 |
| 1.4.2 乌龟药理药性 | 第30页 |
| 1.5 本论文的研究背景、意义和主要研究内容 | 第30-33页 |
| 第二章 抗肿瘤生物活性肽制备工艺研究 | 第33-48页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第33页 |
| 2.2 仪器与设备 | 第33-34页 |
| 2.3 实验方法与内容 | 第34-38页 |
| 2.3.1 蛋白酶解法制备活性肽 | 第34-35页 |
| 2.3.2 微生物发酵法制备活性肽 | 第35-36页 |
| 2.3.3 细胞毒性试验 | 第36-38页 |
| 2.4 结果分析与讨论 | 第38-47页 |
| 2.4.1 蛋白酶酶解法单因素试验 | 第38-41页 |
| 2.4.2 蛋白酶酶解正交试验 | 第41-43页 |
| 2.4.3 方差分析 | 第43-45页 |
| 2.4.4 微生物发酵法单因素试验 | 第45页 |
| 2.4.5 发酵法正交试验 | 第45-46页 |
| 2.4.6 酶解时间对酶解产物的影响 | 第46-47页 |
| 2.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 活性肽的分离纯化及氨基酸序列测定 | 第48-60页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第48-49页 |
| 3.2 仪器与设备 | 第49页 |
| 3.3 实验方法与内容 | 第49-51页 |
| 3.3.1 酶解液超滤分级 | 第49页 |
| 3.3.2 氨基酸总含量分析 | 第49页 |
| 3.3.3 葡聚糖凝胶柱层析 | 第49-50页 |
| 3.3.4 反相高效液相色谱 | 第50页 |
| 3.3.5 紫外扫描吸收图谱 | 第50页 |
| 3.3.6 红外图谱 | 第50-51页 |
| 3.3.7 圆二色图谱 | 第51页 |
| 3.3.8 氨基酸序列测定 | 第51页 |
| 3.3.9 活性肽IC_(50)值 | 第51页 |
| 3.4 结果分析与讨论 | 第51-58页 |
| 3.4.1 氨基酸含量分析 | 第51-53页 |
| 3.4.2 柱层析纯化结果 | 第53-55页 |
| 3.4.3 活性组分紫外、红外、圆二色谱表征 | 第55-56页 |
| 3.4.4 RP-HPLC图谱 | 第56页 |
| 3.4.5 氨基酸测序分析结果 | 第56-57页 |
| 3.4.6 细胞毒性及IC_(50)值 | 第57-58页 |
| 3.5 本章小结 | 第58-60页 |
| 第四章 TP-1体内外抗肿瘤作用研究 | 第60-70页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第60页 |
| 4.2 仪器与设备 | 第60页 |
| 4.3 实验方法与内容 | 第60-63页 |
| 4.3.3 划痕实验测定癌细胞扩散能力 | 第60-61页 |
| 4.3.4 荧光染色法分析癌细胞活力 | 第61页 |
| 4.3.5 扫描电镜观察癌细胞裂解 | 第61页 |
| 4.3.6 流式细胞术检测癌细胞凋亡及周期 | 第61-63页 |
| 4.4 结果分析与讨论 | 第63-69页 |
| 4.4.1 细胞划痕实验 | 第63-64页 |
| 4.4.2 荧光染色与扫描电镜观察 | 第64-66页 |
| 4.4.3 流式细胞术分析 | 第66-67页 |
| 4.4.4 动物实验结果 | 第67-69页 |
| 4.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 第五章 结论与展望 | 第70-71页 |
| 5.1 结论 | 第70页 |
| 5.2 课题展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第80页 |