| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 课题的来源、背景和意义 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外研究现状及分析 | 第12-18页 |
| 1.2.1 羽扇豆醇对肿瘤细胞的抑制作用 | 第12-14页 |
| 1.2.2 microRNAs在肿瘤形成中的作用 | 第14-16页 |
| 1.2.3 microRNAs在肿瘤耐药性发展中的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.4 国内外文献综述的简析 | 第17-18页 |
| 1.3 本课题的主要研究内容 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.2 实验器材 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-31页 |
| 2.2.1 细胞复苏、培养、传代与冻存 | 第21-23页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第23页 |
| 2.2.3 耐药HeLa细胞的诱导 | 第23-24页 |
| 2.2.4 耐药HeLa细胞耐药倍数检测 | 第24-25页 |
| 2.2.5 羽扇豆醇对耐药细胞的处理 | 第25页 |
| 2.2.6 总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.7 RNA浓度计算 | 第26页 |
| 2.2.8 琼脂糖凝胶电泳判断RNA提取效果 | 第26-27页 |
| 2.2.9 microRNA反转录 | 第27-28页 |
| 2.2.10 microRNA荧光定量PCR | 第28-29页 |
| 2.2.11 mRNA反转录 | 第29-30页 |
| 2.2.12 mRNA荧光定量PCR | 第30页 |
| 2.2.13 琼脂糖凝胶电泳检测microRNA靶基因荧光定量产物 | 第30-31页 |
| 2.3 数据分析与处理 | 第31-32页 |
| 第3章 耐药HeLa细胞耐药倍数检测及microRNAs和靶标荧光定量PCR检测 | 第32-51页 |
| 3.1 耐药He La细胞的诱导及培养 | 第32-33页 |
| 3.2 耐药He La细胞耐药倍数检测 | 第33-34页 |
| 3.3 microRNAs的选定与靶标预测 | 第34-35页 |
| 3.4 耐药He La细胞的总RNA提取 | 第35-36页 |
| 3.5 耐药细胞中microRNAs的荧光定量PCR结果 | 第36-37页 |
| 3.6 内参及靶标引物的特异性检测 | 第37-41页 |
| 3.6.1 内参荧光定量PCR结果 | 第37-38页 |
| 3.6.2 靶标mRNAs荧光定量PCR引物检测 | 第38-41页 |
| 3.7 耐药细胞中靶标mRNAs的荧光定量PCR结果 | 第41-42页 |
| 3.8 mRNA荧光定量PCR扩增片段的电泳结果 | 第42-43页 |
| 3.9 microRNAs诱导的HeLa细胞耐药性发展结果分析与讨论 | 第43-47页 |
| 3.9.1 耐药HeLa细胞中miR-183 及其靶标的分析 | 第43-44页 |
| 3.9.2 耐药HeLa细胞中miR-182 及其靶标的分析 | 第44-45页 |
| 3.9.3 耐药HeLa细胞中miR-30a及其靶标的分析 | 第45-46页 |
| 3.9.4 耐药HeLa细胞中miR-15b和miR-16 及其靶标的分析 | 第46-47页 |
| 3.10 HeLa细胞中microRNAs相关的耐药性发展通路分析 | 第47-49页 |
| 3.11 本章小结 | 第49-51页 |
| 第4章 羽扇豆醇处理下耐药HeLa细胞中microRNAs及其靶标的表达情况 | 第51-70页 |
| 4.1 羽扇豆醇处理后耐药HeLa细胞中microRNAs表达情况 | 第51-56页 |
| 4.1.1 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中mi R-183 表达情况 | 第51-52页 |
| 4.1.2 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中mi R-182 表达情况 | 第52-53页 |
| 4.1.3 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中mi R-30a表达情况 | 第53-54页 |
| 4.1.4 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中mi R-15b表达情况 | 第54-55页 |
| 4.1.5 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中mi R-16 表达情况 | 第55-56页 |
| 4.2 羽扇豆醇处理下耐药HeLa细胞中mRNAs的表达情况 | 第56-61页 |
| 4.2.1 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中p53 表达情况 | 第56-57页 |
| 4.2.2 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中KIAA1199 表达情况 | 第57-58页 |
| 4.2.3 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中PDCD4 表达情况 | 第58-59页 |
| 4.2.4 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中Beclin1 表达情况 | 第59-60页 |
| 4.2.5 羽扇豆醇处理下HeLa/CR4 中BCL-2 表达情况 | 第60-61页 |
| 4.3 结果分析 | 第61-67页 |
| 4.3.1 羽扇豆醇处理下miR-183 及其靶标的表达分析 | 第61-62页 |
| 4.3.2 羽扇豆醇处理下miR-182 及其靶标的表达分析 | 第62-64页 |
| 4.3.3 羽扇豆醇处理下miR-30a及其靶标的表达分析 | 第64-65页 |
| 4.3.4 羽扇豆醇处理下miR-15b，miR-16 及其靶标的表达分析 | 第65-67页 |
| 4.4 羽扇豆醇诱导耐药细胞HeLa中microRNAs相关通路的分析 | 第67-68页 |
| 4.5 本章小结 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 附录1羽扇豆醇处理耐药细胞后microRNAs的相对表达量 | 第81页 |
| 附录2羽扇豆醇处理耐药细胞后mRNAs的相对表达量 | 第81-82页 |
| 附录3文中相关英文缩写全称对照表 | 第82-83页 |
| 攻读硕士学位期间参与发表的论文 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
