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纳豆菌糖肽对小鼠巨噬细胞的免疫调节作用及相关机理的研究

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
缩略词第10-11页
第一章 前言第11-24页
    1 糖蛋白(糖肽)研究概述第11-13页
        1.1 糖蛋白的定义及分布第11页
        1.2 糖蛋白的研究现状第11-12页
        1.3 近年来糖蛋白的免疫调节作用研究成果第12-13页
            1.3.1 动物类来源糖蛋白第12页
            1.3.2 植物类来源糖蛋白第12-13页
            1.3.3 真菌类来源糖蛋白第13页
    2 巨噬细胞概述第13-16页
        2.1 巨噬细胞的起源及发育分化第13-14页
        2.2 巨噬细胞的生物学功能第14-16页
            2.2.1 识别、清除病原体等抗原性异物第15页
            2.2.2 参与和促进炎症反应第15页
            2.2.3 对肿瘤细胞的杀伤作用第15页
            2.2.4 加工呈递抗原,启动特异性免疫应答第15-16页
            2.2.5 免疫调节作用第16页
    3 NF-κB信号通路概述第16-21页
        3.1 NF-κB家族成员第16-18页
        3.2 NF-κB的抑制性蛋白IκB第18页
        3.3 IκB激酶复合物IKK第18-19页
        3.4 NF-κB的信号转导的激活第19-21页
    4 本课题的立题背景、研究意义和主要研究内容第21-24页
        4.1 立题背景第21-22页
        4.2 研究目的及意义第22页
        4.3 主要研究内容(技术路线)第22页
        4.4 创新之处第22-24页
第二章 纳豆菌糖肽对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用第24-35页
    1 材料与仪器第24-25页
        1.1 材料第24页
        1.2 主要试剂第24页
        1.3 仪器第24-25页
    2 方法第25-27页
        2.1 细胞培养器皿的清洗与灭菌第25页
            2.1.1 玻璃器皿第25页
            2.1.2 塑料器皿/瓶盖第25页
        2.2 BNGP的制备方法第25页
        2.3 试剂配制方法第25-26页
        2.4 小鼠腹腔巨噬细胞的分离及培养方法第26页
        2.5 实验设计分组第26页
        2.6 噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞代谢活力第26页
        2.7 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验第26页
        2.8 小鼠腹腔巨噬细胞NO生成量测定第26-27页
        2.9 小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α 和PGE2的测定第27页
        2.10 数据处理第27页
    3 结果与分析第27-32页
        3.1 BNGP对小鼠腹腔巨噬细胞代谢活力的影响第27-28页
        3.2 BNGP对小鼠腹腔巨噬细胞中性红吞噬能力的影响第28-29页
        3.3 BNGP对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成量的影响第29-30页
        3.4 BNGP对小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α 和PGE2的影响第30-32页
    4 讨论第32-34页
    5 小结第34-35页
第三章 纳豆菌糖肽对RAW264.7 巨噬细胞的免疫调节作用第35-49页
    1 材料与试剂第35-36页
        1.1 材料第35页
        1.2 主要试剂第35-36页
        1.3 主要仪器设备第36页
    2 试验方法第36-40页
        2.1 试剂配制方法第36页
        2.2 细胞培养及试验分组第36-37页
        2.3 BNGP对巨噬细胞形态的影响第37页
        2.4 BNGP对巨噬细胞增殖的影响第37页
        2.5 BNGP对巨噬细胞吞噬能力的影响第37-38页
        2.6 BNGP对巨噬细胞分泌NO的影响第38页
        2.7 BNGP对巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α 和PGE2的影响第38页
        2.8 BNGP对巨噬细胞i NOS、COX-2 蛋白表达的影响第38-39页
            2.8.1 细胞总蛋白提取第38页
            2.8.2 SDS-PAGE电泳第38-39页
            2.8.3 转膜第39页
            2.8.4 免疫与杂交显色第39页
        2.9 统计学分析第39-40页
    3 结果与讨论第40-47页
        3.1 BNGP对巨噬细胞形态的影响第40页
        3.2 BNGP对巨噬细胞增殖的影响第40-41页
        3.3 BNGP对巨噬细胞吞噬能力的影响第41-42页
        3.4 BNGP对巨噬细胞分泌NO的影响第42-43页
        3.5 BNGP对巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α、PGE2的影响第43-46页
        3.6 BNGP对巨噬细胞i NOS和COX-2 蛋白表达的影响第46-47页
    4 讨论第47-48页
    5 小结第48-49页
第四章 纳豆菌糖肽对巨噬细胞的免疫调节机理的研究第49-62页
    1 材料与仪器第49-50页
        1.1 材料第49页
        1.2 试剂第49-50页
        1.3 主要仪器设备第50页
    2 试验方法第50-54页
        2.1 BNGP对FITC-LPS结合细胞膜表面受体的竞争性抑制第50-51页
            2.1.1 试剂配制第50页
            2.1.2 细胞培养及分组处理方法第50-51页
            2.1.3 流式细胞术(Flow Cytometry)检测FITC-LPS荧光强度第51页
        2.2 BNGP对NF-κB核转位的调控(免疫荧光法)第51-52页
            2.2.1 试剂配制第51页
            2.2.2 细胞培养与分组第51页
            2.2.3 免疫荧光观察NF-κB核转位第51-52页
        2.3 BNGP对NF-κB核转位的调控(免疫印迹法)第52-53页
            2.3.1 试剂配制第52页
            2.3.2 细胞核、细胞质蛋白提取方法第52页
                2.3.2.1 细胞收集第52页
                2.3.2.2 细胞质中蛋白提取第52页
                2.3.2.3 细胞核中蛋白提取第52页
            2.3.3 SDS-PAGE电泳第52-53页
                2.3.3.1 上样蛋白准备第52页
                2.3.3.2 SDS-PAGE电泳第52页
                2.3.3.3 转膜第52页
                2.3.3.4 免疫与杂交显色第52-53页
        2.4 BNGP对IκB磷酸化的调控第53-54页
            2.4.1 试剂配制第53页
            2.4.2 细胞总蛋白提取第53页
            2.4.3 SDS-PAGE电泳第53页
            2.4.4 转膜第53页
            2.4.5 免疫与杂交显色第53-54页
    3 结果与分析第54-60页
        3.1 BNGP对FITC-LPS结合细胞膜表面受体的竞争性抑制第54页
        3.2 BNGP对NF-κB核转位的调控(免疫荧光法)第54-57页
        3.3 BNGP对NF-κB核转位的调控(免疫印迹法)第57-59页
        3.4 BNGP对IκB磷酸化的调控第59-60页
    4 讨论第60-61页
    5 小结第61-62页
第五章 结论与展望第62-64页
    1 结论第62页
        1.1 BNGP对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用第62页
        1.2 BNGP对RAW264.7 巨噬细胞的免疫调节作用第62页
        1.3 BNGP对RAW264.7 巨噬细胞的免疫调节机理第62页
    2 展望第62-64页
参考文献第64-69页
致谢第69-70页
攻读硕士研究生期间发表的论文第70页

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