| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| 1.1 研究背景 | 第7-13页 |
| 1.1.1 血管内皮细胞的概述 | 第7页 |
| 1.1.2 TRP通道家族的概述 | 第7-8页 |
| 1.1.3 TRPV4通道的概述 | 第8-9页 |
| 1.1.4 ROS的概述 | 第9-10页 |
| 1.1.5 NADPH氧化酶家族的概述 | 第10-11页 |
| 1.1.6 TRP通道和ROS的相关性 | 第11-12页 |
| 1.1.7 血管功能紊乱与内皮损伤 | 第12-13页 |
| 1.2 研究意义 | 第13-14页 |
| 1.3 研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第16-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 动物 | 第16页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要仪器与耗材 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-29页 |
| 2.2.1 组织mRNA的抽提 | 第18页 |
| 2.2.2 逆转录RT-PCR | 第18-19页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第19页 |
| 2.2.4 组织蛋白的提取和测定 | 第19-20页 |
| 2.2.5 蛋白质免疫印迹 | 第20-21页 |
| 2.2.6 小鼠动脉内皮细胞的分离及培养 | 第21页 |
| 2.2.7 高脂细胞模型的诱导 | 第21-22页 |
| 2.2.8 蛋白免疫共沉淀 | 第22-23页 |
| 2.2.9 免疫荧光共振能量转移 | 第23页 |
| 2.2.10 细胞水平ROS检测 | 第23-24页 |
| 2.2.11 免疫荧光细胞化学染色 | 第24页 |
| 2.2.12 enface活体组织ROS检测 | 第24-25页 |
| 2.2.13 免疫荧光组织化学染色 | 第25-26页 |
| 2.2.14 线粒体膜电位的检测 | 第26页 |
| 2.2.15 罗丹明-鬼笔环肽荧光染色 | 第26-27页 |
| 2.2.16 FITC-葡聚糖通透实验 | 第27页 |
| 2.2.17 DIO小鼠模型的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.18 MilesAssay血管通透实验 | 第28-29页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第29-40页 |
| 3.1 小鼠血管内皮细胞中TRPV4和Nox2的表达及物理耦联 | 第29-31页 |
| 3.1.1 正常小鼠中TRPV4和Nox2的mRNA及蛋白水平的表达 | 第29页 |
| 3.1.2 TRPV4和Nox2在小鼠血管内皮细胞中的分布存在共定位 | 第29-30页 |
| 3.1.3 高脂模型下TRPV4和Nox2在内皮细胞中的物理耦联增多 | 第30页 |
| 3.1.4 本节小结和讨论 | 第30-31页 |
| 3.2 TRPV4-Nox2复合体对细胞ROS稳态及内皮通透性的影响 | 第31-35页 |
| 3.2.1 FFA细胞模型中ROS产生明显增加 | 第31页 |
| 3.2.2 FFA细胞模型中VE-cadherin和ICAM-1蛋白表达量改变 | 第31-32页 |
| 3.2.3 FFA细胞模型中F-actin重构,细胞膜通透性增大 | 第32-33页 |
| 3.2.4 FFA细胞模型中线粒体膜电位降低 | 第33-34页 |
| 3.2.5 本节小结和讨论 | 第34-35页 |
| 3.3 TRPV4-Nox2复合体对小鼠体内ROS稳态及血管功能紊乱的影响 | 第35-40页 |
| 3.3.1 诱导DIO小鼠模型,并检测其体重变化 | 第35页 |
| 3.3.2 DIO模型小鼠中TRPV4和Nox2物理耦联的增加 | 第35-36页 |
| 3.3.3 DIO模型小鼠血管中ROS的产生明显增加 | 第36-37页 |
| 3.3.4 DIO模型小鼠血管骨架蛋白F-actin重构 | 第37-38页 |
| 3.3.5 DIO模型小鼠血管的通透性显著增大 | 第38-39页 |
| 3.3.6 本节小结和讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 总结与展望 | 第40-42页 |
| 4.1 主要结论 | 第40-41页 |
| 4.2 问题与展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
