| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-25页 |
| 1.1 应激 | 第12-16页 |
| 1.1.1 应激概念 | 第12-13页 |
| 1.1.2 束缚应激模型 | 第13页 |
| 1.1.3 HPA轴与应激关系 | 第13-14页 |
| 1.1.4 CRH与应激关系 | 第14-15页 |
| 1.1.5 应激与雌性生殖 | 第15-16页 |
| 1.2 细胞凋亡 | 第16-20页 |
| 1.2.1 细胞凋亡定义 | 第16-17页 |
| 1.2.2 细胞凋亡机制 | 第17-18页 |
| 1.2.3 细胞凋亡的检测方法 | 第18-19页 |
| 1.2.4 颗粒细胞凋亡与卵母细胞发育能力关系 | 第19-20页 |
| 1.3 Fas/FasL信号通路 | 第20-23页 |
| 1.3.1 Fas的结构 | 第21页 |
| 1.3.2 FasL的结构 | 第21-22页 |
| 1.3.3 Fas/FasL与细胞凋亡 | 第22页 |
| 1.3.4 Fas/FasL在应激中的作用 | 第22-23页 |
| 1.3.5 Fas/FasL与卵母细胞发育能力的关系 | 第23页 |
| 1.4 研究目的与内容 | 第23-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-35页 |
| 2.1 主要试剂及配制 | 第25-26页 |
| 2.2 实验动物饲养及小鼠超排处理 | 第26页 |
| 2.3 束缚应激处理 | 第26-27页 |
| 2.4 Antalarmin注射方法 | 第27页 |
| 2.5 壁颗粒细胞收集方法 | 第27页 |
| 2.6 卵母细胞体外成熟培养 | 第27页 |
| 2.7 卵母细胞激活及胚胎培养 | 第27-28页 |
| 2.8 血清收集及卵巢匀浆的方法 | 第28页 |
| 2.9 蛋白印记方法 | 第28-30页 |
| 2.9.1 Western Blot试剂及溶液 | 第28-29页 |
| 2.9.2 壁颗粒细胞蛋白的提取 | 第29页 |
| 2.9.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-30页 |
| 2.9.4 抗原抗体孵育及显色方法 | 第30页 |
| 2.10 实时定量PCR | 第30-32页 |
| 2.10.1 壁颗粒细胞的获取 | 第30页 |
| 2.10.2 总RNA提取、反转录 | 第30-31页 |
| 2.10.3 荧光定量检测mRNA含量的变化 | 第31-32页 |
| 2.11 凋亡检测方法 | 第32-33页 |
| 2.11.1 卵母细胞JC-1染色 | 第32-33页 |
| 2.11.2 卵母细胞Annexin-V染色 | 第33页 |
| 2.12 酶联免疫法检测CRH | 第33-34页 |
| 2.13 免疫荧光 | 第34页 |
| 2.14 数据分析 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-49页 |
| 3.1 束缚应激对小鼠卵母细胞成熟的影响 | 第35页 |
| 3.2 束缚应激对小鼠胚胎发育的影响 | 第35-36页 |
| 3.3 束缚应激对小鼠血清和卵巢中CRH含量的影响 | 第36-37页 |
| 3.4 束缚应激对小鼠壁颗粒细胞CRHR1表达的影响 | 第37-38页 |
| 3.5 束缚应激对小鼠卵巢细胞凋亡的影响 | 第38-43页 |
| 3.5.1 束缚应激对小鼠壁颗粒细胞凋亡的影响 | 第38-40页 |
| 3.5.2 束缚应激对小鼠卵母细胞凋亡的影响 | 第40-43页 |
| 3.6 束缚应激对小鼠卵巢细胞Fas/FasL表达的影响 | 第43-47页 |
| 3.6.1 束缚应激对小鼠壁颗粒细胞Fas表达的影响 | 第43-44页 |
| 3.6.2 束缚应激对小鼠壁颗粒细胞FasL表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.6.3 束缚应激对小鼠卵母细胞Fas表达的影响 | 第45-47页 |
| 3.7 Antalarmin对束缚应激小鼠卵母细胞发育能力的影响 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-55页 |
| 4.1 束缚应激小鼠模型的建立 | 第49页 |
| 4.2 束缚应激对小鼠胚胎发育的影响 | 第49-50页 |
| 4.3 束缚应激对小鼠卵巢细胞凋亡的影响 | 第50-51页 |
| 4.4 Fas/FasL在小鼠束缚应激中的作用 | 第51-52页 |
| 4.5 CRH对小鼠胚胎发育能力的影响 | 第52-55页 |
| 4.5.1 CRH在小鼠束缚应激过程中的作用 | 第52-53页 |
| 4.5.2 CRH对小鼠胚胎发育能力的影响 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第69页 |
