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CRH和Fas系统在小鼠束缚应激过程中对卵母细胞发育能力的影响机制

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
1 前言第12-25页
    1.1 应激第12-16页
        1.1.1 应激概念第12-13页
        1.1.2 束缚应激模型第13页
        1.1.3 HPA轴与应激关系第13-14页
        1.1.4 CRH与应激关系第14-15页
        1.1.5 应激与雌性生殖第15-16页
    1.2 细胞凋亡第16-20页
        1.2.1 细胞凋亡定义第16-17页
        1.2.2 细胞凋亡机制第17-18页
        1.2.3 细胞凋亡的检测方法第18-19页
        1.2.4 颗粒细胞凋亡与卵母细胞发育能力关系第19-20页
    1.3 Fas/FasL信号通路第20-23页
        1.3.1 Fas的结构第21页
        1.3.2 FasL的结构第21-22页
        1.3.3 Fas/FasL与细胞凋亡第22页
        1.3.4 Fas/FasL在应激中的作用第22-23页
        1.3.5 Fas/FasL与卵母细胞发育能力的关系第23页
    1.4 研究目的与内容第23-25页
2 材料和方法第25-35页
    2.1 主要试剂及配制第25-26页
    2.2 实验动物饲养及小鼠超排处理第26页
    2.3 束缚应激处理第26-27页
    2.4 Antalarmin注射方法第27页
    2.5 壁颗粒细胞收集方法第27页
    2.6 卵母细胞体外成熟培养第27页
    2.7 卵母细胞激活及胚胎培养第27-28页
    2.8 血清收集及卵巢匀浆的方法第28页
    2.9 蛋白印记方法第28-30页
        2.9.1 Western Blot试剂及溶液第28-29页
        2.9.2 壁颗粒细胞蛋白的提取第29页
        2.9.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第29-30页
        2.9.4 抗原抗体孵育及显色方法第30页
    2.10 实时定量PCR第30-32页
        2.10.1 壁颗粒细胞的获取第30页
        2.10.2 总RNA提取、反转录第30-31页
        2.10.3 荧光定量检测mRNA含量的变化第31-32页
    2.11 凋亡检测方法第32-33页
        2.11.1 卵母细胞JC-1染色第32-33页
        2.11.2 卵母细胞Annexin-V染色第33页
    2.12 酶联免疫法检测CRH第33-34页
    2.13 免疫荧光第34页
    2.14 数据分析第34-35页
3 结果与分析第35-49页
    3.1 束缚应激对小鼠卵母细胞成熟的影响第35页
    3.2 束缚应激对小鼠胚胎发育的影响第35-36页
    3.3 束缚应激对小鼠血清和卵巢中CRH含量的影响第36-37页
    3.4 束缚应激对小鼠壁颗粒细胞CRHR1表达的影响第37-38页
    3.5 束缚应激对小鼠卵巢细胞凋亡的影响第38-43页
        3.5.1 束缚应激对小鼠壁颗粒细胞凋亡的影响第38-40页
        3.5.2 束缚应激对小鼠卵母细胞凋亡的影响第40-43页
    3.6 束缚应激对小鼠卵巢细胞Fas/FasL表达的影响第43-47页
        3.6.1 束缚应激对小鼠壁颗粒细胞Fas表达的影响第43-44页
        3.6.2 束缚应激对小鼠壁颗粒细胞FasL表达的影响第44-45页
        3.6.3 束缚应激对小鼠卵母细胞Fas表达的影响第45-47页
    3.7 Antalarmin对束缚应激小鼠卵母细胞发育能力的影响第47-49页
4 讨论第49-55页
    4.1 束缚应激小鼠模型的建立第49页
    4.2 束缚应激对小鼠胚胎发育的影响第49-50页
    4.3 束缚应激对小鼠卵巢细胞凋亡的影响第50-51页
    4.4 Fas/FasL在小鼠束缚应激中的作用第51-52页
    4.5 CRH对小鼠胚胎发育能力的影响第52-55页
        4.5.1 CRH在小鼠束缚应激过程中的作用第52-53页
        4.5.2 CRH对小鼠胚胎发育能力的影响第53-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-68页
致谢第68-69页
攻读学位期间发表论文情况第69页

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