| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 中英文缩略词表 | 第7-8页 |
| 第1章 引言 | 第8-11页 |
| 第2章 材料与方法 | 第11-26页 |
| 2.1 材料 | 第11-13页 |
| 2.1.1 细胞 | 第11页 |
| 2.1.2 慢病毒载体系统 | 第11页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第11-12页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第12-13页 |
| 2.2 实验设计和方法步骤 | 第13-26页 |
| 2.2.1 免疫组织化学染色法 | 第13-14页 |
| 2.2.2 q PCR检测肺癌标本中GRHL1表达水平 | 第14-16页 |
| 2.2.3 肺癌细胞培养 | 第16页 |
| 2.2.4 Western-Blot | 第16-18页 |
| 2.2.5 肺癌细胞DNA提取 | 第18-19页 |
| 2.2.6 甲基化检测 | 第19-22页 |
| 2.2.7 去甲基化影响GRHL1表达 | 第22-23页 |
| 2.2.8 构建重组慢病毒 | 第23页 |
| 2.2.9 MTT检测肺癌细胞增殖情况 | 第23-24页 |
| 2.2.10 细胞克隆实验 | 第24页 |
| 2.2.11 Transwell实验 | 第24-25页 |
| 2.2.12 凋亡检测 | 第25页 |
| 2.2.13 统计学处理 | 第25-26页 |
| 第3章 结果 | 第26-36页 |
| 3.1 GRHL1在肺癌与癌旁的表达差异及肺癌细胞系中的表达情况 | 第26-30页 |
| 3.1.1 免疫组化显示GRHL1在肺癌中的表达明显较癌旁正常肺组织低 | 第26-28页 |
| 3.1.2 临床分期较高的NSCLC癌组织中GRHL1表达明显下调 | 第28-29页 |
| 3.1.3 不同肺癌细胞系中的表达情况 | 第29-30页 |
| 3.2 GRHL1过表达对细胞克隆增殖、侵袭、凋亡的影响 | 第30-34页 |
| 3.2.1 稳定细胞系鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.2 MTT实验 | 第31页 |
| 3.2.3 细胞克隆形成实验 | 第31-32页 |
| 3.2.4 Transwell实验 | 第32-33页 |
| 3.2.5 细胞凋亡实验 | 第33-34页 |
| 3.3 肺癌细胞GRHL1基因启动子区序列异常甲基化可致使其表达下调 | 第34-36页 |
| 3.3.1 GRHL1基因在肺癌细胞系中检测到明显的超甲基化 | 第34-35页 |
| 3.3.2 5-Aza处理后GRHL1基因表达情况 | 第35-36页 |
| 第4章 讨论 | 第36-39页 |
| 第5章 结论与展望 | 第39-40页 |
| 5.1 结论 | 第39页 |
| 5.2 展望 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 综述 | 第45-52页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
