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下调血管内皮细胞蛋白激酶CK2表达对血管增殖的体外研究

提要第3-4页
Abstract第4页
引言第7-9页
试验材料第9-12页
    1 实验细胞第9页
    2 实验器材第9页
    3 实验试剂第9-10页
    4 主要试剂的配置第10-12页
实验方法第12-28页
    1 SIRNA的合成第12页
    2 细胞培养第12-14页
        2.1 培养条件第12页
        2.2 细胞复苏第12页
        2.3 细胞换液第12-13页
        2.4 细胞传代第13页
        2.5 细胞计数第13页
        2.6 细胞冻存第13页
        2.7 细胞分组第13-14页
    3 细胞转染第14-15页
        3.1 转染预实验第14页
        3.2 转染正式实验第14-15页
    4 REAL-TIME PCR检测转染后的细胞中各干扰基因MRNA水平,验证其转染效率第15-17页
        4.1 提取总RNA第15-16页
        4.2 逆转录第16页
        4.3 RT-PCR上机第16-17页
    5 WESTERN BLOT检测转染后的细胞中各干扰基因蛋白表达量,验证其转染效率第17-22页
        5.1 提取总蛋白质第17-18页
        5.2 测量蛋白浓度第18-19页
        5.3 电泳第19-21页
        5.4 转膜第21页
        5.5 孵育一抗第21页
        5.6 二抗孵育第21-22页
        5.7 显影第22页
    6 MTT实验第22-23页
    7 成管实验第23-24页
    8 划痕实验第24页
    9 REAL-TIME PCR检测细胞转染后VEGFMRNA水平第24-25页
    10 WESTERN BLOT检测细胞转染后VEGF蛋白表达量第25-27页
    11 统计学分析方法第27-28页
实验结果第28-30页
    1 蛋白激酶CK2基因干扰效率的检测第28页
    2 RNA干扰蛋白激酶CK2对HUVECS增殖的影响第28页
    3 RNA干扰蛋白激酶CK2对HUVECS体外成管的影响第28页
    4 RNA干扰蛋白激酶CK2对HUVECS迁移的影响第28-29页
    5 RNA干扰蛋白激酶CK2对HUVECS中VEGF MRNA和VEGF蛋白表达的影响第29-30页
讨论第30-33页
结语第33-34页
参考文献第34-38页
附录第38-43页
致谢第43-44页
发表论文第44-51页
详细摘要第51-56页

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