提要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
引言 | 第7-9页 |
试验材料 | 第9-12页 |
1 实验细胞 | 第9页 |
2 实验器材 | 第9页 |
3 实验试剂 | 第9-10页 |
4 主要试剂的配置 | 第10-12页 |
实验方法 | 第12-28页 |
1 SIRNA的合成 | 第12页 |
2 细胞培养 | 第12-14页 |
2.1 培养条件 | 第12页 |
2.2 细胞复苏 | 第12页 |
2.3 细胞换液 | 第12-13页 |
2.4 细胞传代 | 第13页 |
2.5 细胞计数 | 第13页 |
2.6 细胞冻存 | 第13页 |
2.7 细胞分组 | 第13-14页 |
3 细胞转染 | 第14-15页 |
3.1 转染预实验 | 第14页 |
3.2 转染正式实验 | 第14-15页 |
4 REAL-TIME PCR检测转染后的细胞中各干扰基因MRNA水平,验证其转染效率 | 第15-17页 |
4.1 提取总RNA | 第15-16页 |
4.2 逆转录 | 第16页 |
4.3 RT-PCR上机 | 第16-17页 |
5 WESTERN BLOT检测转染后的细胞中各干扰基因蛋白表达量,验证其转染效率 | 第17-22页 |
5.1 提取总蛋白质 | 第17-18页 |
5.2 测量蛋白浓度 | 第18-19页 |
5.3 电泳 | 第19-21页 |
5.4 转膜 | 第21页 |
5.5 孵育一抗 | 第21页 |
5.6 二抗孵育 | 第21-22页 |
5.7 显影 | 第22页 |
6 MTT实验 | 第22-23页 |
7 成管实验 | 第23-24页 |
8 划痕实验 | 第24页 |
9 REAL-TIME PCR检测细胞转染后VEGFMRNA水平 | 第24-25页 |
10 WESTERN BLOT检测细胞转染后VEGF蛋白表达量 | 第25-27页 |
11 统计学分析方法 | 第27-28页 |
实验结果 | 第28-30页 |
1 蛋白激酶CK2基因干扰效率的检测 | 第28页 |
2 RNA干扰蛋白激酶CK2对HUVECS增殖的影响 | 第28页 |
3 RNA干扰蛋白激酶CK2对HUVECS体外成管的影响 | 第28页 |
4 RNA干扰蛋白激酶CK2对HUVECS迁移的影响 | 第28-29页 |
5 RNA干扰蛋白激酶CK2对HUVECS中VEGF MRNA和VEGF蛋白表达的影响 | 第29-30页 |
讨论 | 第30-33页 |
结语 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-38页 |
附录 | 第38-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
发表论文 | 第44-51页 |
详细摘要 | 第51-56页 |