| 中文摘要 | 第4-8页 |
| abstract | 第8-12页 |
| 英文缩写表 | 第18-19页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 第一篇 文献综述 | 第21-49页 |
| 第1章 肝癌疾病的研究进展 | 第21-33页 |
| 1.1 HCC的流行病学 | 第21-22页 |
| 1.2 HCC的发病机理 | 第22-23页 |
| 1.3 HCC的监测与诊断 | 第23-25页 |
| 1.4 HCC的分期和预后评估 | 第25-26页 |
| 1.5 HCC的治疗 | 第26-31页 |
| 1.5.1 手术切除 | 第26-27页 |
| 1.5.2 肝移植 | 第27-28页 |
| 1.5.3 局部肿瘤消融 | 第28页 |
| 1.5.4 经血管介入治疗 | 第28-29页 |
| 1.5.5 放射治疗 | 第29-30页 |
| 1.5.6 基因治疗 | 第30页 |
| 1.5.7 全身治疗 | 第30-31页 |
| 1.6 展望 | 第31-33页 |
| 第2章 miRNAs在肝癌发生和发展中的作用 | 第33-40页 |
| 2.1 miRNAs的产生和成熟 | 第33-35页 |
| 2.1.1 miRNAs的转录调控 | 第34页 |
| 2.1.2 miRNAs的转录后调控 | 第34-35页 |
| 2.2 miRNAs参与HCC的发生和发展 | 第35-36页 |
| 2.2.1 miRNA和HCC相关的病毒感染 | 第35页 |
| 2.2.2 与HCC发展相关的miRNA和其他因素 | 第35-36页 |
| 2.3 HCC中miRNAs的失调 | 第36-38页 |
| 2.3.1 miRNAs对肝癌细胞的增殖和存活的调控作用 | 第36-37页 |
| 2.3.2 miRNAs失调对HCC中血管生成和转移的调控 | 第37-38页 |
| 2.4 miRNAs在临床中的应用前景 | 第38-39页 |
| 2.4.1 miRNAs相关遗传变异与肝癌危险性预测 | 第38页 |
| 2.4.2 miRNAs作为肝癌诊断和预后的标志物 | 第38-39页 |
| 2.4.3 miRNAs在HCC治疗中的潜在作用 | 第39页 |
| 2.5 结论和展望 | 第39-40页 |
| 第3章 DcR3的研究进展 | 第40-49页 |
| 3.1 DcR3的研究背景 | 第40-41页 |
| 3.2 DcR3及其配体 | 第41页 |
| 3.3 DcR3在生理条件下的表达 | 第41-42页 |
| 3.4 DcR3在炎症疾病和癌症中的表达 | 第42-43页 |
| 3.5 血清DcR3作为炎症和癌症发生和发展的生物指标 | 第43-44页 |
| 3.6 DcR3的功能的研究 | 第44页 |
| 3.7 DcR3在转基因小鼠体内的功能研究和基因治疗 | 第44-45页 |
| 3.8 DcR3.Fc的功能分析 | 第45-46页 |
| 3.9 重组DcR3.Fc融合蛋白的治疗作用 | 第46页 |
| 3.10 DcR3突变和人类疾病 | 第46-47页 |
| 3.11 展望 | 第47-49页 |
| 第二篇 研究内容 | 第49-81页 |
| 第1章 miR-340靶基因预测和肝癌患者组织差异表达分析 | 第49-58页 |
| 1.1 材料与方法 | 第50-55页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第50页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第50页 |
| 1.1.3 主要试剂配置 | 第50页 |
| 1.1.4 生物信息学网站 | 第50-51页 |
| 1.1.5 引物设计及合成 | 第51页 |
| 1.1.6 总RNA提取以及质量鉴定 | 第51-52页 |
| 1.1.7 cDNA第一链合成 | 第52-53页 |
| 1.1.8 荧光定量PCR扩增 | 第53-54页 |
| 1.1.9 组织样中总蛋白提取及浓度检测 | 第54页 |
| 1.1.10 蛋白免疫印迹检测 | 第54-55页 |
| 1.1.11 SPSS数据分析 | 第55页 |
| 1.2 结果分析 | 第55-56页 |
| 1.2.1 miRNA-340靶基因的生物信息学预测 | 第55页 |
| 1.2.2 组织中miR-340、DcR3、TGF-β和Smad2基因的荧光定量检测 | 第55-56页 |
| 1.3 讨论 | 第56-57页 |
| 1.4 小结 | 第57-58页 |
| 第2章 miR-340和预测靶基因DcR3靶标关系验证 | 第58-65页 |
| 2.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第58-59页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第59页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第59页 |
| 2.2 实验方法 | 第59-62页 |
| 2.2.1 miR-340表达载体和DcR3双荧光素报告载体构建 | 第59-60页 |
| 2.2.2 无内毒大提质粒 | 第60-61页 |
| 2.2.3 细胞培养及转染 | 第61-62页 |
| 2.2.4 酶活性检测分组 | 第62页 |
| 2.3 实验结果 | 第62-63页 |
| 2.4 讨论 | 第63-64页 |
| 2.5 小结 | 第64-65页 |
| 第3章 miR-340对肝癌细胞增殖和凋亡水平的影响 | 第65-75页 |
| 3.1 细胞株 | 第66页 |
| 3.2 主要试剂与仪器 | 第66-67页 |
| 3.3 试剂配置 | 第67页 |
| 3.4 实验方法 | 第67-70页 |
| 3.4.1 细胞培养 | 第67页 |
| 3.4.2 细胞株的冻存 | 第67页 |
| 3.4.3 细胞复苏 | 第67页 |
| 3.4.4 细胞传代 | 第67-68页 |
| 3.4.5 细胞转染 | 第68-69页 |
| 3.4.6 MTT检测细胞增殖 | 第69页 |
| 3.4.7 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第69-70页 |
| 3.4.8 总RNA提取以及质量鉴定 | 第70页 |
| 3.4.9 cDNA第一链合成 | 第70页 |
| 3.4.10 荧光定量PCR检测miR-340、DcR3、TGF-β1和Smad2mRNA表达 | 第70页 |
| 3.4.11 Westernblot法检测DcR3、TGF-β1和Smad2蛋白表达 | 第70页 |
| 3.4.12 统计学分析 | 第70页 |
| 3.5 实验结果 | 第70-73页 |
| 3.5.1 转染后HepG2细胞内miR-340表达水平的变化 | 第70-71页 |
| 3.5.2 miR-340对HepG2细胞增殖能力的影响 | 第71-72页 |
| 3.5.3 miR-340对肝癌HepG2细胞凋亡水平的影响 | 第72页 |
| 3.5.4 靶基因DcR3和TGF-β/Smad通路中关键因子TGF-β1和Smad2的表达水平 | 第72-73页 |
| 3.6 讨论 | 第73-74页 |
| 3.7 小结 | 第74-75页 |
| 第4章 DcR3影响小鼠肝癌的形成和恶化 | 第75-81页 |
| 4.1 材料与实验方法 | 第75-78页 |
| 4.1.1 材料 | 第75-76页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第76-78页 |
| 4.2 结果 | 第78-79页 |
| 4.2.1 裸鼠成瘤死亡率检测 | 第78页 |
| 4.2.2 治疗后肿瘤直径、重量的测量及小鼠死亡率检测 | 第78页 |
| 4.2.3 不同肿瘤组织中DcR3、TGF-β和Smad2基因表达水平检测 | 第78-79页 |
| 4.3 讨论 | 第79-80页 |
| 4.4 小结 | 第80-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-102页 |
| 作者简介及研究成果 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
