中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-9页 |
中英文缩写对照 | 第13-15页 |
第1章 绪论 | 第15-22页 |
1.1 引言 | 第15-19页 |
1.1.1 抗人CD19-CAR-T细胞疗法在治疗白血病中的应用 | 第16-18页 |
1.1.2 抗人CD19-CAR-T细胞疗法在治疗淋巴瘤中的应用 | 第18-19页 |
1.2 构建淋巴瘤动物模型的研究进展 | 第19-21页 |
1.3 本实验的研究目的与特色 | 第21-22页 |
第2章 材料与方法 | 第22-33页 |
2.1 实验材料 | 第22-25页 |
2.1.1 实验动物 | 第22页 |
2.1.2 细胞、菌株及质粒 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.4 主要仪器与器材 | 第23-25页 |
2.1.5 主要试剂配制方法 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-32页 |
2.2.1 构建表达人CD19和luciferase的慢病毒载体 | 第25-27页 |
2.2.2 表达人CD19分子和luciferase的慢病毒感染EG7细胞 | 第27页 |
2.2.3 流式检测分选后的EG7细胞表面人CD19分子的表达 | 第27-28页 |
2.2.4 酶标仪检测表达人CD19和luciferase的EG7细胞的发光情况 | 第28页 |
2.2.5 肿瘤细胞接种 | 第28-30页 |
2.2.6 实验动物的监测与处理 | 第30页 |
2.2.7 小动物活体成像监测表达人CD19分子和luciferase的EG7细胞在C57BL/6小鼠体内的增殖及分布情况 | 第30页 |
2.2.8 流式细胞术检测荷瘤小鼠各组织器官内肿瘤细胞及免疫细胞表面分子以及细胞比例的变化情况 | 第30-32页 |
2.3 统计学处理 | 第32-33页 |
第3章 结果与讨论 | 第33-58页 |
3.1 成功构建表达人CD19分子和luciferase的EG7细胞 | 第33-35页 |
3.1.1 光学显微镜下观察稳定转染细胞形态与野生型EG7细胞形态相似 | 第33页 |
3.1.2 流式检测稳定转染细胞表面高表达人CD19分子 | 第33-34页 |
3.1.3 小动物活体成像仪及酶标仪能够检测到稳定转染细胞表达的luciferase与底物作用后的发光信号 | 第34-35页 |
3.2 不同数量的稳定表达人CD19分子以及luciferase的EG7细胞皮下接种给C57BL/6小鼠后肿瘤形成情况 | 第35-38页 |
3.2.1 不同数量稳定转染细胞皮下接种后小鼠的成瘤率 | 第35-36页 |
3.2.2 不同数量稳定转染细胞皮下接种后小鼠的生存时间 | 第36-37页 |
3.2.3 不同数量稳定转染细胞皮下接种给小鼠的成瘤部位 | 第37页 |
3.2.4 不同数量稳定转染细胞皮下接种构建的淋巴瘤模型均可通过小动物活体成像检测到luciferase与荧光素底物作用后的发光信号 | 第37-38页 |
3.3 稳定表达人CD19分子以及luciferase的EG7细胞与野生型EG7细胞分别皮下接种给C57BL/6小鼠构建淋巴瘤模型 | 第38-44页 |
3.3.1 野生型EG7细胞皮下接种后形成肿瘤的速度快于表达人CD19分子和luciferase的EG7细胞肿瘤生成的速度 | 第38-39页 |
3.3.2 表达人CD19分子以及luciferase的EG7细胞与野生型EG7细胞皮下接种给C57BL/6小鼠均可成功构建淋巴瘤模型 | 第39页 |
3.3.3 表达人CD19分子以及luciferase的EG7细胞与野生型EG7细胞皮下接种给C57BL/6小鼠构建淋巴瘤模型的成瘤部位一致 | 第39-40页 |
3.3.4 两种细胞构建的淋巴瘤模型中各器官免疫细胞的比例无显著差别 | 第40-43页 |
3.3.5 小动物活体成像检测经皮下接种的表达人CD19分子与luciferase的EG7细胞形成的肿瘤组织与荧光素底物作用后产生的发光信号是监测肿瘤发生发展的敏感指标 | 第43-44页 |
3.4 稳定表达人CD19分子以及luciferase的EG7细胞腹腔接种给C57BL/6小鼠后肿瘤形成情况 | 第44-54页 |
3.4.1 小动物活体成像能够检测到表达人CD19分子和luciferase的EG7细胞经腹腔接种给C57BL/6小鼠后与荧光素底物作用产生的发光信号 | 第44页 |
3.4.2 表达人CD19和luciferase的EG7细胞经腹腔接种给C57BL/6小鼠后的成瘤部位以及成瘤率 | 第44-47页 |
3.4.3 流式检测表达人CD19分子及luciferase的EG7细胞经腹腔接种给C57BL/6小鼠后,肿瘤细胞表面不表达人CD19分子 | 第47-54页 |
3.5 讨论 | 第54-58页 |
第4章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |