摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-22页 |
1. 灰霉菌的危害及其防治手段 | 第14页 |
2. miRNA的研究进展 | 第14-20页 |
2.1 miRNA的发现 | 第14-15页 |
2.2 miRNA的合成 | 第15-16页 |
2.3 miRNA星号链 | 第16-17页 |
2.4 miRNA的作用机制 | 第17页 |
2.5 miRNA对胁迫的应答 | 第17-18页 |
2.6 miRNA功能的研究方法 | 第18-19页 |
2.6.1 miRNA的过表达 | 第18-19页 |
2.6.2 miRNA的抑制 | 第19页 |
2.7 miR394的研究进展 | 第19-20页 |
3. 茉莉酸、水杨酸途径相关基因 | 第20-21页 |
4. 研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-30页 |
1. 实验材料 | 第22-23页 |
1.1 植物和菌株材料 | 第22页 |
1.2 实验试剂 | 第22-23页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第23页 |
2. 实验方法 | 第23-30页 |
2.1 拟南芥和番茄植株栽培 | 第23-24页 |
2.2 灰霉菌培养 | 第24页 |
2.3 番茄植株处理 | 第24页 |
2.4 植物RNA提取及RT - PCR | 第24-26页 |
2.4.1 Total RNA提取 | 第24-25页 |
2.4.2 反转录 | 第25-26页 |
2.4.3 目的片段的扩增 | 第26页 |
2.5 Quantitative PCR(q PCR)检测 | 第26-28页 |
2.6 PCR模板快速制备 | 第28-29页 |
2.7 台盼蓝染色 | 第29页 |
2.8 统计学分析 | 第29页 |
2.9 非生物胁迫处理 | 第29-30页 |
第三章 实验结果 | 第30-41页 |
1. MiR394在番茄和拟南芥中的组织特异性表达 | 第30-31页 |
1.1 MiR394及其初级转录本在番茄不同组织中的表达 | 第30页 |
1.2 MiR394在拟南芥不同组织中的表达 | 第30-31页 |
2. MiR394响应灰霉菌的侵染 | 第31-32页 |
2.1 MiR394及其初级转录本在接种灰霉菌的番茄叶片中的表达动态 | 第31-32页 |
2.2 MiR394及其初级转录本在接种灰霉菌的拟南芥叶片中的表达动态 | 第32页 |
3. 转基因和突变株验证 | 第32-35页 |
3.1 过表达mi R394转基因拟南芥的获得和阳性检测 | 第32-33页 |
3.2 Lcr突变株纯合鉴定 | 第33-35页 |
4. 过表达mi R394的转基因拟南芥对生物胁迫和非生物胁迫的响应 | 第35-39页 |
4.1 生物胁迫 | 第35-38页 |
4.1.1 MiR394的过表达增强了植株对灰霉菌的易感性 | 第35页 |
4.1.2 MiR394过表达对其他miRNAs的影响 | 第35-36页 |
4.1.3 MiR394过表达对miRNA代谢途径的影响 | 第36-37页 |
4.1.4 MiR394影响JA / SA信号传导途径中的基因 | 第37-38页 |
4.2 非生物胁迫 | 第38-39页 |
4.2.1 MiR394的过表达增强干旱胁迫的耐受力 | 第38页 |
4.2.2 MiR394的过表达增强盐胁迫的耐受力 | 第38-39页 |
5. Lcr突变株对灰霉菌的响应 | 第39-41页 |
5.1 Lcr突变株增强了植株对灰霉菌的易感性 | 第39-40页 |
5.2 Lcr的突变对JA / SA信号传导途径中基因的影响 | 第40-41页 |
第四章 讨论 | 第41-45页 |
第五章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-54页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |