| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 中英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 引言 | 第15-16页 |
| 1.2 组织工程种子细胞 | 第16-18页 |
| 1.2.1 肌肉干细胞 | 第16页 |
| 1.2.2 脂肪干细胞 | 第16页 |
| 1.2.3 骨髓间充质干细胞 | 第16-18页 |
| 1.3 软骨组织工程相关生长因子 | 第18-20页 |
| 1.4 干扰素β研究进展 | 第20-21页 |
| 1.5 hMSCs成软骨分化时相关信号通路 | 第21-24页 |
| 1.6 本论文的研究意义及研究内容 | 第24-25页 |
| 1.6.1 研究意义 | 第24页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 重组人干扰素β1a对人骨髓间充质干细胞成软骨细胞定向分化的影响 | 第25-41页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-29页 |
| 2.2.1 种子细胞 | 第25页 |
| 2.2.2 细胞培养基 | 第25-26页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.4 主要耗材 | 第27-28页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.6 溶液配制 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第29-30页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第30页 |
| 2.3.3 细胞冻存 | 第30页 |
| 2.3.4 成球法诱导hMSCs成软骨细胞分化 | 第30页 |
| 2.3.5 hMSCs成球培养 | 第30-31页 |
| 2.3.6 GAG总含量测定 | 第31页 |
| 2.3.7 阿利新蓝染色 | 第31页 |
| 2.3.8 荧光定量PCR检测成软骨分化相关基因表达 | 第31-33页 |
| 2.3.9 Western blotting检测成软骨分化相关蛋白表达 | 第33-34页 |
| 2.4 统计学分析 | 第34页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第34-39页 |
| 2.5.1 GAG总含量检测结果 | 第34-35页 |
| 2.5.2 hMSCs软骨分化形态检测结果 | 第35-36页 |
| 2.5.3 阿利新蓝染色结果 | 第36页 |
| 2.5.4 荧光定量PCR检测成软骨分化标志基因表达结果 | 第36-38页 |
| 2.5.5 Western blotting检测成软骨分化相关蛋白表达结果 | 第38-39页 |
| 2.6 本章小结 | 第39-41页 |
| 第三章 基于转录组分析IFN-β1a诱导hMSCs成软骨分化的作用机制 | 第41-50页 |
| 3.1 前言 | 第41页 |
| 3.2 实验材料 | 第41-42页 |
| 3.2.1 种子细胞 | 第41页 |
| 3.2.2 细胞培养基 | 第41页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第41页 |
| 3.2.4 主要耗材 | 第41-42页 |
| 3.2.5 主要仪器 | 第42页 |
| 3.3 试验方法 | 第42-44页 |
| 3.3.1 细胞传代 | 第42页 |
| 3.3.2 hMSCs成球培养 | 第42-43页 |
| 3.3.3 转录组测序 | 第43-44页 |
| 3.3.4 差异表达基因分析 | 第44页 |
| 3.3.5 差异表达基因GO分析 | 第44页 |
| 3.3.6 差异表达基因Pathway分析 | 第44页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第44-49页 |
| 3.4.1 基因表达量分析结果 | 第44-46页 |
| 3.4.2 差异表达基因GO功能分析结果 | 第46-47页 |
| 3.4.3 差异表达基因Pathway功能分析结果 | 第47-49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 PI3K/AKT信号通路在hMSCs诱导分化成软骨细胞过程中的激活情况 | 第50-60页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 实验材料 | 第50-53页 |
| 4.2.1 种子细胞 | 第50页 |
| 4.2.2 细胞培养基 | 第50页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第50-52页 |
| 4.2.4 主要耗材 | 第52页 |
| 4.2.5 主要仪器 | 第52-53页 |
| 4.3 实验方法 | 第53-55页 |
| 4.3.1 细胞传代 | 第53页 |
| 4.3.2 hMSCs成球培养 | 第53页 |
| 4.3.3 荧光定量PCR检测信号通路关键基因 | 第53-54页 |
| 4.3.4 Western blotting检测信号通路关键蛋白 | 第54-55页 |
| 4.4 统计分析方法 | 第55页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第55-59页 |
| 4.5.1 hMSCs成软骨细胞分化过程中信号通路关键基因PI3K的表达结果 | 第55-56页 |
| 4.5.2 hMSCs成软骨细胞分化过程中信号通路关键基因AKT的表达结果 | 第56-57页 |
| 4.5.3 hMSCs成软骨细胞分化过程中关键蛋白的表达结果 | 第57-59页 |
| 4.6 本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 LY29004抑制PI3K/AKT信号通路对hMSCs向软骨细胞定向分化的影响 | 第60-72页 |
| 5.1 引言 | 第60页 |
| 5.2 实验材料 | 第60-63页 |
| 5.2.1 种子细胞 | 第60页 |
| 5.2.2 细胞培养基 | 第60页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第60-62页 |
| 5.2.4 主要耗材 | 第62页 |
| 5.2.5 主要仪器 | 第62-63页 |
| 5.3 实验方法 | 第63-65页 |
| 5.3.1 细胞传代 | 第63页 |
| 5.3.2 hMSCs成球培养 | 第63页 |
| 5.3.3 荧光定量PCR方法检测相关基因 | 第63-65页 |
| 5.3.4 Western blotting检测相关蛋白 | 第65页 |
| 5.4 统计分析方法 | 第65页 |
| 5.5 结果与讨论 | 第65-71页 |
| 5.5.1 LY29004对PI3K/AKT信号通路关键基因表达的影响 | 第65-67页 |
| 5.5.2 LY29004对PI3K/AKT信号通路关键蛋白表达的影响 | 第67-68页 |
| 5.5.3 LY29004对成软骨细胞标志基因表达的影响 | 第68-70页 |
| 5.5.4 LY29004对成软骨细胞标志蛋白表达的影响 | 第70-71页 |
| 5.6 本章小结 | 第71-72页 |
| 结论与展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-86页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究结果 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 附件 | 第88页 |
