| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 基于G-四联体DNA检测顺铂含量的新方法 | 第12-65页 |
| 第一节 文献综述：抗癌药物顺铂与G-四联体DNA | 第12-33页 |
| 1 抗癌药物顺铂的研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1 铂类抗癌药物 | 第12-14页 |
| 1.2 顺铂的副作用及其解决方案 | 第14-16页 |
| 1.3 顺铂的作用机理 | 第16-17页 |
| 2 G-四联体DNA的研究进展 | 第17-27页 |
| 2.1 G-四联体DNA的组成形式 | 第18-21页 |
| 2.2 G-四联体DNA在生物内的作用 | 第21-24页 |
| 2.3 G-四联体DNA的应用 | 第24-27页 |
| 3 顺铂的检测方法 | 第27-30页 |
| 3.1 分光光度法 | 第28页 |
| 3.2 电化学分析方法 | 第28-29页 |
| 3.3 大型仪器分析法 | 第29-30页 |
| 4 本文探针的设计原理 | 第30-32页 |
| 5 本论文的主要研究内容和意义 | 第32-33页 |
| 第二节 实验材料与方法 | 第33-38页 |
| 1 实验所用主要试剂 | 第33-34页 |
| 2 实验所用主要材料处理方式 | 第34-35页 |
| 3 实验所用主要仪器 | 第35-36页 |
| 4 实验所需G-四联体DNA序列 | 第36页 |
| 5 荧光光谱测定 | 第36-37页 |
| 5.1 体外荧光光谱的测定 | 第36-37页 |
| 5.2 细胞裂解液中荧光光谱的测定 | 第37页 |
| 5.3 活细胞中荧光的测定 | 第37页 |
| 6 圆二色谱的测定 | 第37页 |
| 7 探针尿液中的检测操作 | 第37-38页 |
| 第三节 实验结果 | 第38-64页 |
| 1 顺铂和G-四联体DNA结合验证 | 第38-41页 |
| 1.1 顺铂和G-四联体DNA反应的质谱图 | 第38-39页 |
| 1.2 顺铂和G-四联体DNA反应的琼脂糖凝胶实验 | 第39-40页 |
| 1.3 顺铂和G-四联体DNA反应的CD谱 | 第40页 |
| 1.4 讨论 | 第40-41页 |
| 2 顺铂引起探针荧光信号的降低 | 第41-42页 |
| 2.1 加顺铂后的荧光变化 | 第41-42页 |
| 2.2 紫外灯下的荧光变化 | 第42页 |
| 2.3 讨论 | 第42页 |
| 3 顺铂探针反应条件的优化 | 第42-45页 |
| 3.1 反应缓冲液的优化 | 第43-45页 |
| 3.2 G-四联体DNA浓度的优化 | 第45页 |
| 3.3 NMM浓度的优化 | 第45-53页 |
| 3.4 钾离子浓度的优化 | 第47-48页 |
| 3.5 缓冲液pH值的优化 | 第48-49页 |
| 3.6 G-四联体DNA的选择 | 第49-51页 |
| 3.7 反应时间的优化 | 第51-52页 |
| 3.8 讨论 | 第52-53页 |
| 4 探针的灵敏性分析 | 第53-55页 |
| 4.1 顺铂的滴定曲线 | 第53-54页 |
| 4.2 顺铂和荧光值的线性关系 | 第54-55页 |
| 4.3 讨论 | 第55页 |
| 5 探针的选择性分析 | 第55-58页 |
| 5.1 抗癌药物间的选择性 | 第56-57页 |
| 5.2 铂类药物间的选择性 | 第57-58页 |
| 5.3 讨论 | 第58页 |
| 6 探针的稳定性分析 | 第58-60页 |
| 6.1 探针的时间稳定性 | 第58-60页 |
| 6.2 讨论 | 第60页 |
| 7 探针在尿液样品中的应用 | 第60-62页 |
| 7.1 人尿液中的顺铂浓度的测定 | 第60页 |
| 7.2 大鼠尿液中顺铂浓度的测定 | 第60-61页 |
| 7.3 大鼠尿液稀释不同倍数对结果的影响 | 第61页 |
| 7.4 讨论 | 第61-62页 |
| 8 探针在细胞中的应用 | 第62-64页 |
| 8.1 细胞裂解液中探针荧光的测量 | 第62-63页 |
| 8.2 探针在细胞中的成像实验 | 第63-64页 |
| 8.3 讨论 | 第64页 |
| 第四节 本章小结 | 第64-65页 |
| 第二章 砷探针的设计与探讨 | 第65-111页 |
| 第一节 研究背景综述 | 第65-81页 |
| 1 砷的研究进展 | 第65-68页 |
| 1.1 砷的毒性 | 第65-67页 |
| 1.2 砷的药用价值 | 第67-68页 |
| 2 PML蛋白及锌指结构 | 第68-71页 |
| 2.1 PML蛋白 | 第68-70页 |
| 2.2 锌指结构 | 第70-71页 |
| 3 荧光蛋白 | 第71-77页 |
| 3.1 荧光蛋白的发现及主要大事 | 第72-75页 |
| 3.2 荧光蛋白的结构及发光机制 | 第75-76页 |
| 3.3 荧光蛋白的应用及其优点 | 第76-77页 |
| 4 FRET技术的发展 | 第77-79页 |
| 5 砷的检测方法 | 第79-81页 |
| 第二节 基于CFP-PML(R)-YFP探针的探讨 | 第81-97页 |
| 1 材料与方法 | 第81-83页 |
| 1.1 实验所用菌株 | 第81页 |
| 1.2 实验所用主要试剂 | 第81-82页 |
| 1.3 实验所用主要仪器 | 第82-83页 |
| 2 实验方法 | 第83-90页 |
| 2.1 目的基因的获取和质粒的构建 | 第83-88页 |
| 2.2 荧光蛋白的表达与纯化 | 第88-90页 |
| 2.3 荧光强度的测量 | 第90页 |
| 3 实验结果 | 第90-97页 |
| 3.1 实验原理 | 第90页 |
| 3.2 CFP-PML(R)-YFP融合蛋白的表达 | 第90-91页 |
| 3.3 pH对融合蛋白荧光的影响 | 第91-92页 |
| 3.4 蛋白荧光对不同浓度砷的影响 | 第92-94页 |
| 3.5 加锌后再加As的荧光变化 | 第94-95页 |
| 3.6 酸性条件下配置砷溶液的荧光变化 | 第95-97页 |
| 4 讨论 | 第97页 |
| 第三节 基于PML蛋白设计的不同探针 | 第97-106页 |
| 1 实验结果 | 第98-106页 |
| 1.1 基于CFP-PML(R)-PML(R)-YFP砷检测 | 第98-100页 |
| 1.2 基于CFP-PML(R)和PML(R)-YFP砷检测 | 第100-101页 |
| 1.3 基于RB1B2砷的检测 | 第101-103页 |
| 1.4 突变成单锌指后,砷的检测 | 第103-106页 |
| 2 讨论 | 第106页 |
| 第四节 CFP-PML(R)-YFP探针对锌离子的响应 | 第106-109页 |
| 1 实验结果 | 第106-109页 |
| 1.1 实验原理 | 第106-107页 |
| 1.2 探针的可行性实验 | 第107-108页 |
| 1.3 探针的灵敏性和选择性分析 | 第108-109页 |
| 2 讨论 | 第109页 |
| 第五节 本章小结 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
| 附录Ⅰ 博士在读期间论文发表情况 | 第130-131页 |
| 附录Ⅱ 基因与蛋白质序列 | 第131-135页 |
