| 中文摘要 | 第2-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-19页 |
| 1 禽腺病毒分型 | 第12页 |
| 2 病毒结构与特性 | 第12-14页 |
| 3 禽腺病毒感染机制 | 第14页 |
| 4 禽腺病毒流行现状 | 第14-15页 |
| 5 禽腺病毒疫苗研究进展 | 第15-16页 |
| 5.1 灭活疫苗 | 第15页 |
| 5.2 基因工程疫苗 | 第15-16页 |
| 6 免疫学检测技术 | 第16-17页 |
| 6.1 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第16-17页 |
| 6.2 琼脂凝胶扩散试验(AGDT) | 第17页 |
| 6.3 中和试验(NT) | 第17页 |
| 7 疫苗佐剂 | 第17-18页 |
| 8 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 研究一 血清2、4、5、8b型禽腺病毒增殖方法的筛选 | 第19-33页 |
| 1 材料 | 第19-20页 |
| 1.1 鸡胚、细胞及毒株 | 第19页 |
| 1.2 试剂 | 第19页 |
| 1.3 仪器与设备 | 第19页 |
| 1.4 试验相关溶液配制 | 第19-20页 |
| 2 方法 | 第20-27页 |
| 2.1 鸡胚传毒 | 第20页 |
| 2.1.1 准备 | 第20页 |
| 2.1.2 卵黄囊接种 | 第20页 |
| 2.1.3 收毒 | 第20页 |
| 2.2 细胞传毒 | 第20-21页 |
| 2.2.1 人胚肾细胞(293a)细胞扩毒 | 第20-21页 |
| 2.3 鸡胚原代肝细胞(CEL)传毒 | 第21-22页 |
| 2.3.1 鸡胚原代肝细胞的制备 | 第21-22页 |
| 2.3.2 鸡胚原代肝细胞接毒 | 第22页 |
| 2.3.3 鸡胚原代肝细胞收毒 | 第22页 |
| 2.4 鸡肝癌细胞(LMH)传毒 | 第22-23页 |
| 2.4.1 鸡肝癌细胞(LMH)的培养与传代 | 第22-23页 |
| 2.4.2 鸡肝癌细胞(LMH)接毒 | 第23页 |
| 2.4.3 鸡肝癌细胞(LMH)收毒 | 第23页 |
| 2.5 PCR鉴定 | 第23-26页 |
| 2.5.1 引物设计与合成 | 第23-24页 |
| 2.5.2 病毒DNA模板的制备 | 第24-25页 |
| 2.5.3 PCR体系及反应程序 | 第25-26页 |
| 2.6 种毒毒力的测定 | 第26-27页 |
| 2.6.1 基础种子批鸡胚半数感染量(EID_50)的测定 | 第26页 |
| 2.6.2 基础种子批组织细胞半数感染量(TCID_50)的测定 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-31页 |
| 3.1 鸡胚接毒结果 | 第27页 |
| 3.2 细胞接毒结果 | 第27-28页 |
| 3.3 PCR检测结果 | 第28-29页 |
| 3.4 毒力测定结果 | 第29-31页 |
| 3.4.1 EID_50测定结果 | 第29-30页 |
| 3.4.2 TCID_50测定结果 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 研究二 禽腺病毒四价灭活苗的制备与油水比的优化 | 第33-39页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| 1.1 试剂与耗材 | 第33页 |
| 1.2 仪器与设备 | 第33页 |
| 1.3 试验相关溶液配制 | 第33-34页 |
| 1.4 试验动物 | 第34页 |
| 2 方法 | 第34-35页 |
| 2.1 疫苗的制备 | 第34页 |
| 2.2 灭活苗不同油水比的比较 | 第34-35页 |
| 2.3 疫苗质量检验 | 第35页 |
| 2.3.1 剂型检测 | 第35页 |
| 2.3.2 稳定性检测 | 第35页 |
| 2.3.3 粘度检测 | 第35页 |
| 2.3.4 无菌检验 | 第35页 |
| 2.4 安全性检测 | 第35页 |
| 3 结果 | 第35-37页 |
| 3.1 疫苗质量检验结果 | 第35-36页 |
| 3.1.1 剂型检测结果 | 第35-36页 |
| 3.1.2 稳定性检测结果 | 第36页 |
| 3.1.3 粘度检测结果 | 第36页 |
| 3.1.4 无菌检验结果 | 第36页 |
| 3.2 安全性检测结果 | 第36-37页 |
| 3.3 灭活苗不同油水比性状对比结果 | 第37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 研究三 禽腺病毒四价灭活苗免疫效力的研究 | 第39-50页 |
| 1 材料 | 第39页 |
| 1.1 试剂与耗材 | 第39页 |
| 1.2 仪器与设备 | 第39页 |
| 1.3 试验动物 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-42页 |
| 2.1 疫苗最小免疫剂量试验 | 第39-40页 |
| 2.2 免疫抗体水平监测 | 第40-41页 |
| 2.2.1 琼脂凝胶扩散试验(AGDT) | 第40-41页 |
| 2.2.2 中和试验(NT) | 第41页 |
| 2.3 疫苗的攻毒保护试验 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-49页 |
| 3.1 疫苗最小免疫剂量试验结果 | 第42页 |
| 3.2 免疫抗体水平监测结果 | 第42-47页 |
| 3.3 免疫保护试验结果 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
