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不同能源培养下A.f菌能量代谢基因的表达差异研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第11-25页
    1.1 嗜酸氧化亚铁硫杆菌及其生理代谢第11-18页
        1.1.1 亚铁氧化第11-12页
        1.1.2 硫氧化第12-15页
        1.1.3 二氧化碳固定第15-16页
        1.1.4 氮气固定第16-17页
        1.1.5 无氧呼吸第17-18页
    1.2 黄铁矿及其浸出机理第18-19页
    1.3 荧光定量PCR技术第19-22页
        1.3.1 定量原理第19页
        1.3.2 分类及应用第19-20页
        1.3.3 内参基因的选择第20页
        1.3.4 数据的处理第20-22页
        1.3.5 注意事项第22页
    1.4 生物信息学概述第22-23页
    1.5 本论文的研究目的和研究内容第23-25页
        1.5.1 研究的目的及意义第23页
        1.5.2 研究内容第23页
        1.5.3 受资助情况第23-25页
2 实验材料和方法第25-39页
    2.1 实验材料第25-28页
        2.1.1 矿样分析第25页
        2.1.2 研究纯菌株的获得及保藏第25-26页
        2.1.3 主要仪器设备第26页
        2.1.4 培养基及培养条件第26-27页
        2.1.5 主要溶液配制及生化试剂第27-28页
    2.2 实验方法第28-39页
        2.2.1 菌株的驯化及培养第28-29页
        2.2.2 生长曲线绘制和pH及电位测定第29-30页
        2.2.3 培养基中Fe(Ⅱ)和SO_4~(2-)及S_2O_3~(2-)浓度测定第30-32页
        2.2.4 不同能源培养菌的收集第32-33页
        2.2.5 基因组提取及浓度测定第33页
        2.2.6 内参基因的选择第33页
        2.2.7 总RNA的提取及质量评估第33-34页
        2.2.8 cDNA的合成第34页
        2.2.9 PCR引物设计第34-37页
        2.2.10 Real-time PCR及标准曲线绘制第37页
        2.2.11 生物信息学分析第37-39页
3 不同能源培养菌的生长情况第39-48页
    前言第39页
    3.1 亚铁培养第39-41页
        3.1.1 细胞密度变化曲线第40页
        3.1.2 pH及电势变化曲线第40页
        3.1.3 铁离子及亚铁氧化率变化曲线第40-41页
    3.2 黄铁矿培养菌生长情况第41-42页
        3.2.1 细胞密度变化曲线第41-42页
        3.2.2 pH变化第42页
        3.2.3 亚铁离子和硫酸根离子及浸出率变化第42页
    3.3 元素硫培养第42-44页
        3.3.1 细胞密度变化曲线第43页
        3.3.2 pH及硫酸根离子浓度变化第43-44页
    3.4 硫代硫酸盐培养第44-46页
        3.4.1 菌体形态变化第44-45页
        3.4.2 细胞密度变化第45页
        3.4.3 pH变化第45页
        3.4.4 硫代硫酸根及硫酸根离子变化第45-46页
    3.5 氧气缺乏条件下培养第46-47页
        3.5.1 细胞密度变化第47页
        3.5.2 pH变化第47页
        3.5.3 铁离子的变化第47页
    本章小结第47-48页
4 能量代谢基因转录表达差异第48-61页
    前言第48页
    4.1 引物及RNA的质量评估第48-51页
        4.1.1 引物质量评估第48-49页
        4.1.2 总RNA质量评估第49-51页
    4.2 Real-time PCR标准曲线及数据处理方法第51-52页
    4.3 Real-time PCR结果分析第52-60页
        4.3.1 八个细胞色素类蛋白基因第53-55页
        4.3.2 三个终端氧化酶复合体亚基基因第55-56页
        4.3.3 碳氮固定及胞外多聚物合成关键酶基因第56-57页
        4.3.4 四个能量转换相关基因第57-58页
        4.3.5 三个铁氧化相关基因第58-59页
        4.3.6 四个硫氧化相关基因第59-60页
    本章小结第60-61页
5 两个能量代谢关键基因生物信息学分析第61-69页
    前言第61页
    5.1 单核细胞色素c第61-65页
        5.1.1 氨基酸序列分析第61-62页
        5.1.2 二级结构预测第62-63页
        5.1.3 三级结构预测第63-65页
    5.2 终端氧化酶CyoA亚基第65-68页
        5.2.1 氨基酸序列分析第65-66页
        5.2.2 二级结构预测第66-67页
        5.2.3 三级结构预测第67-68页
    本章小结第68-69页
6 全文结论第69-70页
参考文献第70-76页
附录第76-82页
攻读硕士学位期间主要的研究成果目录第82-83页
致谢第83页

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