| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 縮略语表 | 第7-8页 |
| 1 引言 | 第8-17页 |
| 1.1 细胞重编程研究历程 | 第8-10页 |
| 1.1.1 体细胞核移植技术 | 第8-9页 |
| 1.1.2 体细胞与多潜能干细胞融合 | 第9-10页 |
| 1.1.3 体细胞与多能性细胞提取物共孵育 | 第10页 |
| 1.2 iPS细胞研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2.1 小鼠iPS细胞 | 第10-11页 |
| 1.2.2 人iPS细胞 | 第11页 |
| 1.2.3 其他物种的iPS细胞 | 第11-12页 |
| 1.3 iPS细胞培养方法 | 第12-14页 |
| 1.3.1 基因导入诱导多能干细胞 | 第12页 |
| 1.3.2 蛋白诱导多能干细胞 | 第12-13页 |
| 1.3.3 小分子诱导多能干细胞 | 第13页 |
| 1.3.4 iPS细胞与ES细胞差异 | 第13-14页 |
| 1.4 iPS细胞的应用前景 | 第14-16页 |
| 1.4.1 具有临床实用前景的ips细胞的生成及分化 | 第14页 |
| 1.4.2 iPS细胞可提供体外的疾病模型 | 第14-15页 |
| 1.4.3 iPS细胞在动物疾病模型治疗中的应用 | 第15页 |
| 1.4.4 iPS细胞在遗传育种和品种改良方面的应用 | 第15页 |
| 1.4.5 iPS细胞在生产转基因动物方面的应用 | 第15-16页 |
| 1.5 iPS细胞研究应用中存在问题 | 第16页 |
| 1.6 本研究的目的意义与内容 | 第16-17页 |
| 2 试验一 小鼠诱导多能干细胞系的建立 | 第17-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 实验质粒及细胞 | 第17页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第17页 |
| 2.1.3 实验试剂及培养液的配制 | 第17-18页 |
| 2.1.4 实验仪器及耗材 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 小鼠iPS细胞的制备 | 第19-21页 |
| 2.2.2 iPS细胞的鉴定 | 第21-23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-28页 |
| 2.3.1 小鼠ips细胞克隆的形成 | 第23-24页 |
| 2.3.2 碱性磷酸酶染色 | 第24页 |
| 2.3.3 染色体数目检查 | 第24-25页 |
| 2.3.4 多能性标记的免疫荧光检测 | 第25-26页 |
| 2.3.5 畸胎瘤组织切片检测 | 第26-27页 |
| 2.3.6 三胚层标记免疫荧光染色 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 3 试验二 iPS细胞体外分化条件摸索及向生殖细胞的诱导分化 | 第30-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 实验细胞 | 第30页 |
| 3.1.2 实验试剂及培养基的配制 | 第30-31页 |
| 3.1.3 实验仪器设备 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 拟胚体分化最适细胞密度摸索 | 第31-32页 |
| 3.2.2 拟胚体体外分化培养及心肌样细胞跳动的观察 | 第32页 |
| 3.2.3 心肌特异性基因Gata4的免疫荧光检测 | 第32-33页 |
| 3.2.4 小鼠iPS细胞诱导分化为生殖细胞 | 第33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-38页 |
| 3.3.1 拟胚体分化最适细胞密度筛选 | 第33-35页 |
| 3.3.2 拟胚体体外分化培养及心肌样细胞跳动的观察 | 第35-36页 |
| 3.3.3 iPS细胞诱导分化为生殖细胞 | 第36-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38页 |
| 3.5 小结 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
