| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 综述 | 第12-22页 |
| 1.1 卡拉胶概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 卡拉胶的来源和结构 | 第12-13页 |
| 1.1.2 卡拉胶酶的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 酶制剂的概况 | 第14-19页 |
| 1.2.1 酶制剂的定义 | 第14-15页 |
| 1.2.2 固定化的方法概述 | 第15-17页 |
| 1.2.2.1 固定化载体 | 第15-16页 |
| 1.2.2.2 固定化的方法 | 第16-17页 |
| 1.2.3 酶制剂的应用 | 第17-18页 |
| 1.2.3.1 饲料行业的应用 | 第17页 |
| 1.2.3.2 食品工业的应用 | 第17-18页 |
| 1.2.3.3 纺织工业的应用 | 第18页 |
| 1.2.4 酶制剂的国内外研究热点 | 第18-19页 |
| 1.2.4.1 基因工程技术 | 第18-19页 |
| 1.2.4.2 模拟酶 | 第19页 |
| 1.2.4.3 抗体酶 | 第19页 |
| 1.3 硒多糖概述 | 第19-20页 |
| 1.3.1 硒多糖的来源 | 第19-20页 |
| 1.3.2 硒的存在形态 | 第20页 |
| 1.3.3 分析方法 | 第20页 |
| 1.4 研究意义 | 第20-22页 |
| 第二章 产硒化卡拉胶酶菌株的筛选及多样性分析 | 第22-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 试剂 | 第22页 |
| 2.1.2 仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 培养基 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 产硒化卡拉胶酶降解菌株的筛选 | 第23页 |
| 2.2.2 产硒化卡拉胶酶降解菌株的菌种鉴定 | 第23页 |
| 2.2.3 DNS法（3,5-二硝基水杨酸）测定硒化卡拉胶酶活性 | 第23-25页 |
| 2.2.3.1 半乳糖标准曲线 | 第23-24页 |
| 2.2.3.2 硒化卡拉胶酶活的测定 | 第24-25页 |
| 2.2.4 新型硒化卡拉胶降解酶的定位 | 第25页 |
| 2.2.4.1 胞内酶的提取 | 第25页 |
| 2.2.4.2 胞外酶的提取 | 第25页 |
| 2.2.4.3 降解酶的定位 | 第25页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第25-29页 |
| 2.3.1 硒化卡拉胶酶活性菌株的筛选与鉴定 | 第25-27页 |
| 2.3.2 产硒化卡拉胶酶菌株的形态观察和菌种鉴定 | 第27-29页 |
| 2.3.3 新型硒化卡拉胶降解菌株的定位 | 第29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 产硒化卡拉胶酶菌株发酵条件的优化 | 第30-42页 |
| 3.1 试验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 试剂 | 第30页 |
| 3.1.2 仪器 | 第30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-31页 |
| 3.2.1 酶活的测定方法 | 第30-31页 |
| 3.2.2 响应面法优化菌株Pseudoalteromonas sp. Xi13发酵条件 | 第31页 |
| 3.2.2.1 单因素试验 | 第31页 |
| 3.2.2.2 响应面试验设计 | 第31页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第31-40页 |
| 3.3.1 单因素实验 | 第31-37页 |
| 3.3.1.1 温度对Pseudoalteromonas sp. Xi13菌株产酶的影响 | 第31-32页 |
| 3.3.1.2 pH对Pseudoalteromonas sp. Xi13菌株产酶的影响 | 第32-33页 |
| 3.3.1.3 碳源对Pseudoalteromonas sp. Xi13菌株产酶的影响 | 第33页 |
| 3.3.1.4 氮源对Pseudoalteromonas sp. Xi13菌株产酶的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.1.5 金属离子对Pseudoalteromonas sp. Xi13菌株产酶的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.1.6 接种量对Pseudoalteromonas sp. Xi13菌株产酶的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.1.7 摇瓶转速对Pseudoalteromonas sp. Xi13菌株产酶的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.2 响应面试验结果 | 第37-39页 |
| 3.3.3 响应面设计试验验证结果 | 第39-40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-42页 |
| 第四章 硒化卡拉胶酶酶学性质的研究 | 第42-50页 |
| 4.1 试验材料 | 第42页 |
| 4.1.1 试剂 | 第42页 |
| 4.1.2 仪器 | 第42页 |
| 4.2 试验方法 | 第42-44页 |
| 4.2.1 硒化卡拉胶酶液的制备方法 | 第42-43页 |
| 4.2.2 硒化卡拉胶酶活力的测定方法 | 第43页 |
| 4.2.3 硒化卡拉胶酶的降解曲线 | 第43页 |
| 4.2.4 硒化卡拉胶酶酶学性质的研究 | 第43-44页 |
| 4.2.4.1 硒化卡拉胶酶的最适反应温度 | 第43页 |
| 4.2.4.2 硒化卡拉胶酶的最适p H | 第43页 |
| 4.2.4.3 金属离子对硒化卡拉胶酶活性的影响 | 第43-44页 |
| 4.2.4.4 蛋白抑制剂、变性剂及表面活性剂对硒化卡拉胶酶活性的影响 | 第44页 |
| 4.2.4.5 硒化卡拉胶酶的底物特异性 | 第44页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第44-49页 |
| 4.3.1 硒化卡拉胶酶降解曲线 | 第44页 |
| 4.3.2 硒化卡拉胶酶的最适反应温度研究 | 第44-46页 |
| 4.3.3 硒化卡拉胶酶的最适p H的研究 | 第46-47页 |
| 4.3.4 金属离子对硒化卡拉胶酶活性的影响 | 第47页 |
| 4.3.5 蛋白抑制剂、变性剂及表面活性剂对活性的影响 | 第47-48页 |
| 4.3.6 硒化卡拉胶酶的底物特异性 | 第48-49页 |
| 4.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 第五章 硒化卡拉胶酶制剂 | 第50-74页 |
| 5.1 实验材料 | 第50页 |
| 5.1.1 试剂 | 第50页 |
| 5.1.2 仪器 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-54页 |
| 5.2.1 硒化卡拉胶酶制剂的制备流程 | 第50-51页 |
| 5.2.1.1 硒化卡拉胶酶液的制备 | 第51页 |
| 5.2.1.2 硒化拉胶酶液的除菌 | 第51页 |
| 5.2.1.3 固体酶制剂干燥方法的选择 | 第51页 |
| 5.2.2 真空冷冻干燥法制备固体酶制剂 | 第51-53页 |
| 5.2.2.1 真空冷冻干燥工艺研究 | 第51-52页 |
| 5.2.2.2 固体酶制剂的酶学性质初步研究 | 第52页 |
| 5.2.2.3 固体酶制剂贮存稳定性研究 | 第52-53页 |
| 5.2.3 硒化卡拉胶酶的固定化方法研究 | 第53-54页 |
| 5.2.3.1 交联－包埋－交联法 | 第53页 |
| 5.2.3.2 硒化卡拉胶固定化酶制剂的稳定性研究 | 第53-54页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第54-73页 |
| 5.3.1 真空冷冻干燥法制备固体酶制剂 | 第54-64页 |
| 5.3.1.1 酶液干燥方法的选择 | 第54页 |
| 5.3.1.2 真空冷冻干燥工艺优化 | 第54-59页 |
| 5.3.1.3 固体酶制剂的酶学性质初步研究 | 第59-61页 |
| 5.3.1.4 真空冷冻干燥酶制剂贮存稳定性 | 第61-64页 |
| 5.3.2 硒化卡拉胶酶的固定化研究 | 第64-72页 |
| 5.3.2.1 固定化酶条件选择 | 第64-67页 |
| 5.3.2.2 固定化酶颗粒的形态 | 第67-68页 |
| 5.3.2.3 硒化卡拉胶固定化酶的稳定性研究 | 第68-72页 |
| 5.3.3 酶制剂的降解性能 | 第72-73页 |
| 5.4 本章小结 | 第73-74页 |
| 第六章 新型硒化卡拉胶降解酶制剂的应用 | 第74-86页 |
| 6.1 材料与仪器 | 第74页 |
| 6.1.1 试剂 | 第74页 |
| 6.1.2 仪器 | 第74页 |
| 6.2 实验内容 | 第74-76页 |
| 6.2.1 生物酶解法制备硒寡糖 | 第74-75页 |
| 6.2.2 硒寡糖含硒量的测定 | 第75-76页 |
| 6.2.2.1 实验原理 | 第75页 |
| 6.2.2.2 硒含量标准曲线 | 第75页 |
| 6.2.2.3 实验方法 | 第75-76页 |
| 6.2.3 硒寡糖薄层层析分析 | 第76页 |
| 6.2.4 硒寡糖理化性质研究 | 第76页 |
| 6.2.4.1 硒寡糖稳定性的测定 | 第76页 |
| 6.2.4.2 硒寡糖黏度测定 | 第76页 |
| 6.2.4.3 硒寡糖溶解性的测定 | 第76页 |
| 6.2.5 检测硒寡糖对细胞的作用 | 第76页 |
| 6.3 实验结果与分析 | 第76-84页 |
| 6.3.1 紫外分光光度法的方法学建立 | 第76-79页 |
| 6.3.1.1 检测波长的确定 | 第76-77页 |
| 6.3.1.2 硒标准曲线 | 第77页 |
| 6.3.1.3 精密度 | 第77-78页 |
| 6.3.1.4 加标回收率实验 | 第78-79页 |
| 6.3.1.5 稳定性试验 | 第79页 |
| 6.3.2 硒寡糖含硒量的测定 | 第79-80页 |
| 6.3.2.1 有机硒和无机硒的分离方法 | 第79-80页 |
| 6.3.2.2 硒含量的测定 | 第80页 |
| 6.3.3 TLC分析酶解产物 | 第80-82页 |
| 6.3.3.1 灵敏度 | 第80-81页 |
| 6.3.3.2 酶解产物 | 第81-82页 |
| 6.3.4 硒寡糖的理化性质 | 第82-83页 |
| 6.3.5 细胞试验 | 第83-84页 |
| 6.4 本章小结 | 第84-86页 |
| 结论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第96-97页 |
