摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-12页 |
第1章 引言 | 第25-45页 |
1.1 目前自然界生物面临的环境问题 | 第25-27页 |
1.1.1 全球气候变化 | 第25-26页 |
1.1.2 缺氧 | 第26页 |
1.1.3 大气污染 | 第26页 |
1.1.4 重金属污染 | 第26-27页 |
1.1.5 有机化学品污染 | 第27页 |
1.2 环境分析方法 | 第27-28页 |
1.3 荧光成像分析法 | 第28-41页 |
1.3.1 荧光成像分析法简介 | 第28-30页 |
1.3.2 荧光成像分析法的分类 | 第30-31页 |
1.3.3 荧光成像分析法在环境分析领域的应用 | 第31-41页 |
1.4 本文的研究思路及研究内容 | 第41-45页 |
第2章 近红外比率型荧光探针用于分析细胞和活体中多硫化半胱氨酸的浓度 | 第45-73页 |
2.1 引言 | 第45-46页 |
2.2 实验部分 | 第46-58页 |
2.2.1 实验材料和试剂 | 第46-48页 |
2.2.2 仪器 | 第48-49页 |
2.2.3 探针Cy-Dise的合成 | 第49-55页 |
2.2.3.1 合成目标化合物 | 第49页 |
2.2.3.2 合成目标化合物 | 第49-50页 |
2.2.3.3 合成目标化合物 | 第50页 |
2.2.3.4 合成目标化合物 | 第50-51页 |
2.2.3.5 合成目标化合物 | 第51-52页 |
2.2.3.6 合成目标化合物 | 第52-53页 |
2.2.3.7 合成目标化合物 | 第53-54页 |
2.2.3.8 合成目标化合物8(Cy-Dise) | 第54-55页 |
2.2.4 探针光谱测试 | 第55页 |
2.2.5 细胞培养 | 第55页 |
2.2.6 小鼠原代肝实质细胞的分离和培养 | 第55-56页 |
2.2.7 探针细胞毒性实验 | 第56页 |
2.2.8 激光共聚焦显微镜成像 | 第56页 |
2.2.9 流式细胞仪实验 | 第56页 |
2.2.10 高效液相色谱-质谱联用实验 | 第56-57页 |
2.2.11 BALB/c小鼠的饲养和活体成像 | 第57页 |
2.2.12 原位肝癌大鼠模型构建和活体成像 | 第57-58页 |
2.2.13 斑马鱼培养和荧光成像分析 | 第58页 |
2.3 结果与讨论 | 第58-72页 |
2.3.1 探针Cy-Dise的设计和合成 | 第58-61页 |
2.3.2 探针Cy-Dise对Cys-SSH的紫外吸收光谱分析 | 第61页 |
2.3.3 探针Cy-Dise对Cys-SSH的荧光光谱分析 | 第61-62页 |
2.3.4 探针Cy-Dise的pH稳定性 | 第62页 |
2.3.5 探针Cy-Dise对Cys-SSH的选择性分析 | 第62-63页 |
2.3.6 探针Cy-Dise对Cys-SSH的反应动力学 | 第63-64页 |
2.3.7 探针Cy-Dise检测Cys-SSH的生成 | 第64页 |
2.3.8 探针Cy-Dise的细胞毒性 | 第64-65页 |
2.3.9 探针Cy-Dise在细胞中的定位 | 第65页 |
2.3.10 探针Cy-Dise定量活细胞中内源性Cys-SSH的浓度 | 第65-68页 |
2.3.11 探针Cy-Dise检测活细胞中内源性Cys-SSH的浓度波动 | 第68-69页 |
2.3.12 探针Cy-Dise检测BALB/c小鼠腹腔中Cys-SSH的浓度 | 第69-70页 |
2.3.13 探针Cy-Dise检测原位肝癌大鼠模型中Cys-SSH的浓度 | 第70-72页 |
2.3.14 探针Cy-Dise检测斑马鱼中Cys-SSH的浓度 | 第72页 |
2.4 小结 | 第72-73页 |
第3章 近红外荧光探针用于分析不同种类细胞和各器官中硫烷硫的浓度 | 第73-89页 |
3.1 引言 | 第73-74页 |
3.2 实验部分 | 第74-78页 |
3.2.1 实验材料和试剂 | 第74-75页 |
3.2.2 仪器 | 第75页 |
3.2.3 探针BD-diSH的合成 | 第75-76页 |
3.2.4 探针BD-diSH的光谱测试 | 第76页 |
3.2.5 细胞培养和细胞成像 | 第76页 |
3.2.6 流式细胞仪分析 | 第76页 |
3.2.7 BALB/c小鼠的饲养和成像 | 第76-77页 |
3.2.8 小鼠海马体切片成像 | 第77页 |
3.2.9 探针细胞毒性测试 | 第77页 |
3.2.10 斑马鱼培养和荧光成像分析 | 第77页 |
3.2.11 统计分析 | 第77-78页 |
3.3 结果与讨论 | 第78-88页 |
3.3.1 探针BD-diSH的设计和合成 | 第78-79页 |
3.3.2 探针BD-diSH对硫烷硫的光谱分析 | 第79页 |
3.3.3 探针BD-diSH对硫烷硫的选择性 | 第79-80页 |
3.3.4 探针BD-diSH对硫烷硫的反应动力学 | 第80-81页 |
3.3.5 探针BD-diSH的pH稳定性 | 第81页 |
3.3.6 吐温80对探针BD-diSH的荧光强度影响 | 第81-82页 |
3.3.7 探针BD-diSH的细胞毒性 | 第82页 |
3.3.8 探针BD-diSH在细胞内的定位和成像分析 | 第82-84页 |
3.3.9 探针BD-diSH检测不同细胞中硫烷硫浓度 | 第84页 |
3.3.10 探针BD-diSH检测细胞内源性硫烷硫浓度变化 | 第84-85页 |
3.3.11 探针BD-diSH检测小鼠各器官中硫烷硫浓度 | 第85-86页 |
3.3.12 探针BD-diSH检测海马体组织中硫烷硫浓度 | 第86-87页 |
3.3.13 探针BD-diSH检测BALB/c小鼠腹腔中的硫烷硫浓度 | 第87-88页 |
3.4 小结 | 第88-89页 |
第4章 近红外比率型荧光探针用于分析温度胁迫下硫醇浓度和细胞凋亡之间的关系 | 第89-127页 |
4.1 引言 | 第89-90页 |
4.2 实验部分 | 第90-98页 |
4.2.1 实验材料和试剂 | 第90-91页 |
4.2.2 仪器 | 第91页 |
4.2.3 探针CyO-Dise的合成 | 第91-95页 |
4.2.3.1 合成目标化合物Keto-Cy | 第91-92页 |
4.2.3.2 合成目标化合物CyO-R’ | 第92-93页 |
4.2.3.3 合成目标化合物CyO-Dise | 第93-95页 |
4.2.4 探针CyO-Dise的光谱测试 | 第95页 |
4.2.5 细胞培养和细胞成像 | 第95页 |
4.2.6 流式细胞仪分析 | 第95页 |
4.2.7 高效液相色谱实验 | 第95-96页 |
4.2.8 顺铂耐药细胞株(HepG2/DDP)的构建 | 第96页 |
4.2.9 顺铂耐药细胞株(HepG2/DDP)的治疗 | 第96页 |
4.2.10 蛋白质印迹分析 | 第96-97页 |
4.2.11 透射电子显微镜成像 | 第97页 |
4.2.12 组织学实验 | 第97页 |
4.2.13 HepG2和HepG2/DDP荷瘤鼠模型的构建 | 第97页 |
4.2.14 HepG2和HepG2/DDP荷瘤鼠模的治疗 | 第97-98页 |
4.2.15 HepG2和HepG2/DDP荷瘤鼠模的成像 | 第98页 |
4.2.16 统计分析 | 第98页 |
4.3 结果与讨论 | 第98-125页 |
4.3.1 探针CyO-Dise的设计和合成 | 第98-101页 |
4.3.2 探针CyO-Dise对GSH的紫外吸收光谱和荧光光谱分析 | 第101-102页 |
4.3.3 探针CyO-Dise对GSH检测的反应动力学和选择性 | 第102-104页 |
4.3.4 探针CyO-Dise的pH和温度稳定性 | 第104页 |
4.3.5 探针CyO-Dise的细胞毒性考察 | 第104-105页 |
4.3.6 探针CyO-Dise定量温度胁迫下细胞中GSH的浓度变化 | 第105-109页 |
4.3.7 探针CyO-Dise评估温度胁迫下GSH的抗凋亡作用 | 第109-116页 |
4.3.8 探针CyO-Dise评估GSH在耐药过程中的生物作用 | 第116-121页 |
4.3.9 探针CyO-Dise评估温度胁迫在HepG2荷瘤鼠模型中的治疗作用 | 第121-123页 |
4.3.10 探针CyO-Dise评估温度胁迫在HepG2/DDP荷瘤鼠模型中的治疗作用 | 第123-125页 |
4.4 小结 | 第125-127页 |
第5章 近红外比率型荧光探针用于分析缺血再灌注过程中超氧阴离子的爆发情况 | 第127-151页 |
5.1 引言 | 第127-128页 |
5.2 实验部分 | 第128-136页 |
5.2.1 实验材料和试剂 | 第128-130页 |
5.2.2 仪器 | 第130页 |
5.2.3 探针Mito-Cy-Tfs的合成 | 第130-133页 |
5.2.3.1 合成目标化合物 | 第130-131页 |
5.2.3.2 合成目标化合物2(Mito-Cy) | 第131-132页 |
5.2.3.3 合成目标化合物3(Mito-Cy-Tfs) | 第132-133页 |
5.2.4 探针Mito-Cy-Tfs的光谱测试 | 第133页 |
5.2.5 细胞培养和细胞成像 | 第133页 |
5.2.6 流式细胞仪分析 | 第133-134页 |
5.2.7 细胞缺血再灌注模型的建立 | 第134页 |
5.2.8 肝脏缺血再灌注模型的建立 | 第134-135页 |
5.2.9 C57BL/6小鼠的饲养和成像 | 第135页 |
5.2.10 统计分析 | 第135-136页 |
5.3 结果与讨论 | 第136-150页 |
5.3.1 Mito-Cy-Tfs的设计和合成 | 第136-137页 |
5.3.2 探针Mito-Cy-Tfs对O_2~(·?)的光谱分析 | 第137-138页 |
5.3.3 探针Mito-Cy-Tfs的选择性和稳定性 | 第138-140页 |
5.3.4 探针Mito-Cy-Tfs的细胞毒性考察 | 第140-141页 |
5.3.5 探针Mito-Cy-Tfs的线粒体定位情况 | 第141-142页 |
5.3.6 探针Mito-Cy-Tfs检测细胞内源性O_2~(·?)浓度变化 | 第142-143页 |
5.3.7 探针Mito-Cy-Tfs检测细胞缺血再灌注模型中O_2~(·?)浓度变化 | 第143-147页 |
5.3.8 探针Mito-Cy-Tfs检测小鼠肝脏缺血再灌注模型中O_2~(·?)浓度变化. | 第147-150页 |
5.4 小结 | 第150-151页 |
第6章 近红外比率型荧光探针用于分析CCl4胁迫下急性炎症爆发过程中硒醇浓度变化 | 第151-175页 |
6.1 引言 | 第151-152页 |
6.2 实验部分 | 第152-159页 |
6.2.1 实验材料和试剂 | 第152-153页 |
6.2.2 仪器 | 第153-154页 |
6.2.3 探针Cy-SS的合成 | 第154-157页 |
6.2.3.1 合成对照探针 | 第154-155页 |
6.2.3.2 合成探针Cy-SS | 第155-157页 |
6.2.4 探针Cy-SS的光谱测试 | 第157页 |
6.2.5 细胞培养和细胞炎症模型的构建 | 第157页 |
6.2.6 细胞成像和流式细胞仪分析 | 第157-158页 |
6.2.7 高效液相色谱-质谱联用实验 | 第158页 |
6.2.8 BALB/c小鼠急性肝脏炎症模型的构建 | 第158页 |
6.2.9 BALB/c小鼠的饲养和成像 | 第158-159页 |
6.2.10 统计分析 | 第159页 |
6.3 结果与讨论 | 第159-174页 |
6.3.1 探针Cy-SS的设计和合成 | 第159-161页 |
6.3.2 探针Cy-SS对硒醇的光谱响应 | 第161页 |
6.3.3 探针Cy-SS对硒醇的选择性和动力学 | 第161-163页 |
6.3.4 探针Cy-SS的pH稳定性 | 第163页 |
6.3.5 探针Cy-SS的细胞毒性考察 | 第163-164页 |
6.3.6 探针Cy-SS在细胞中的定位 | 第164-165页 |
6.3.7 探针Cy-SS定量活细胞中内源性硒醇的浓度 | 第165-167页 |
6.3.8 探针Cy-SS定量急/慢性细胞炎症模型中硒醇的浓度 | 第167-169页 |
6.3.9 探针Cy-SS检测小鼠腹腔中硒醇的浓度 | 第169-170页 |
6.3.10 探针Cy-SS检测小鼠急性肝炎爆发过程中硒醇的浓度 | 第170-174页 |
6.4 小结 | 第174-175页 |
第7章 近红外比率型荧光探针用于分析CS2胁迫下急/慢性炎症爆发过程中硒醇浓度变化 | 第175-193页 |
7.1 引言 | 第175-176页 |
7.2 实验部分 | 第176-181页 |
7.2.1 实验材料和试剂 | 第176-178页 |
7.2.2 仪器 | 第178页 |
7.2.3 探针Mito-diNO_2的合成 | 第178-179页 |
7.2.4 探针Mito-diNO_2的光谱测试 | 第179页 |
7.2.5 细胞培养和线粒体相关的细胞急性炎症构建 | 第179页 |
7.2.6 细胞成像 | 第179-180页 |
7.2.7 流式细胞仪分析 | 第180页 |
7.2.8 小鼠的饲养和成像 | 第180页 |
7.2.9 小鼠急/慢性肝炎模型及其治疗模型的构建 | 第180-181页 |
7.2.10 统计分析 | 第181页 |
7.3 结果与讨论 | 第181-191页 |
7.3.1 探针Mito-diNO_2的设计和合成 | 第181-182页 |
7.3.2 探针Mito-diNO_2对硒代半胱氨酸响应的光谱变化 | 第182页 |
7.3.3 探针Mito-diNO_2对硒代半胱氨酸响应的选择性和反应动力学 | 第182-184页 |
7.3.4 探针Mito-diNO_2的pH稳定性 | 第184页 |
7.3.5 探针Mito-diNO_2的细胞毒性考察 | 第184-185页 |
7.3.6 探针Mito-diNO_2在线粒体中的定位 | 第185-186页 |
7.3.7 探针Mito-diNO_2定量不同细胞中硒醇的浓度 | 第186页 |
7.3.8 探针Mito-diNO_2评估细胞中硒醇浓度和急性炎症之间的关系 | 第186-188页 |
7.3.9 探针Mito-diNO_2评估小鼠急/慢性肝炎模型中Sec的浓度 | 第188-191页 |
7.4 小结 | 第191-193页 |
第8章 全文总结与展望 | 第193-197页 |
8.1 全文总结 | 第193-194页 |
8.2 展望 | 第194-197页 |
参考文献 | 第197-211页 |
致谢 | 第211-213页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第213-214页 |