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新型荧光探针设计及其在环境相关生物活性分子的成像分析研究

摘要第4-8页
abstract第8-12页
第1章 引言第25-45页
    1.1 目前自然界生物面临的环境问题第25-27页
        1.1.1 全球气候变化第25-26页
        1.1.2 缺氧第26页
        1.1.3 大气污染第26页
        1.1.4 重金属污染第26-27页
        1.1.5 有机化学品污染第27页
    1.2 环境分析方法第27-28页
    1.3 荧光成像分析法第28-41页
        1.3.1 荧光成像分析法简介第28-30页
        1.3.2 荧光成像分析法的分类第30-31页
        1.3.3 荧光成像分析法在环境分析领域的应用第31-41页
    1.4 本文的研究思路及研究内容第41-45页
第2章 近红外比率型荧光探针用于分析细胞和活体中多硫化半胱氨酸的浓度第45-73页
    2.1 引言第45-46页
    2.2 实验部分第46-58页
        2.2.1 实验材料和试剂第46-48页
        2.2.2 仪器第48-49页
        2.2.3 探针Cy-Dise的合成第49-55页
            2.2.3.1 合成目标化合物第49页
            2.2.3.2 合成目标化合物第49-50页
            2.2.3.3 合成目标化合物第50页
            2.2.3.4 合成目标化合物第50-51页
            2.2.3.5 合成目标化合物第51-52页
            2.2.3.6 合成目标化合物第52-53页
            2.2.3.7 合成目标化合物第53-54页
            2.2.3.8 合成目标化合物8(Cy-Dise)第54-55页
        2.2.4 探针光谱测试第55页
        2.2.5 细胞培养第55页
        2.2.6 小鼠原代肝实质细胞的分离和培养第55-56页
        2.2.7 探针细胞毒性实验第56页
        2.2.8 激光共聚焦显微镜成像第56页
        2.2.9 流式细胞仪实验第56页
        2.2.10 高效液相色谱-质谱联用实验第56-57页
        2.2.11 BALB/c小鼠的饲养和活体成像第57页
        2.2.12 原位肝癌大鼠模型构建和活体成像第57-58页
        2.2.13 斑马鱼培养和荧光成像分析第58页
    2.3 结果与讨论第58-72页
        2.3.1 探针Cy-Dise的设计和合成第58-61页
        2.3.2 探针Cy-Dise对Cys-SSH的紫外吸收光谱分析第61页
        2.3.3 探针Cy-Dise对Cys-SSH的荧光光谱分析第61-62页
        2.3.4 探针Cy-Dise的pH稳定性第62页
        2.3.5 探针Cy-Dise对Cys-SSH的选择性分析第62-63页
        2.3.6 探针Cy-Dise对Cys-SSH的反应动力学第63-64页
        2.3.7 探针Cy-Dise检测Cys-SSH的生成第64页
        2.3.8 探针Cy-Dise的细胞毒性第64-65页
        2.3.9 探针Cy-Dise在细胞中的定位第65页
        2.3.10 探针Cy-Dise定量活细胞中内源性Cys-SSH的浓度第65-68页
        2.3.11 探针Cy-Dise检测活细胞中内源性Cys-SSH的浓度波动第68-69页
        2.3.12 探针Cy-Dise检测BALB/c小鼠腹腔中Cys-SSH的浓度第69-70页
        2.3.13 探针Cy-Dise检测原位肝癌大鼠模型中Cys-SSH的浓度第70-72页
        2.3.14 探针Cy-Dise检测斑马鱼中Cys-SSH的浓度第72页
    2.4 小结第72-73页
第3章 近红外荧光探针用于分析不同种类细胞和各器官中硫烷硫的浓度第73-89页
    3.1 引言第73-74页
    3.2 实验部分第74-78页
        3.2.1 实验材料和试剂第74-75页
        3.2.2 仪器第75页
        3.2.3 探针BD-diSH的合成第75-76页
        3.2.4 探针BD-diSH的光谱测试第76页
        3.2.5 细胞培养和细胞成像第76页
        3.2.6 流式细胞仪分析第76页
        3.2.7 BALB/c小鼠的饲养和成像第76-77页
        3.2.8 小鼠海马体切片成像第77页
        3.2.9 探针细胞毒性测试第77页
        3.2.10 斑马鱼培养和荧光成像分析第77页
        3.2.11 统计分析第77-78页
    3.3 结果与讨论第78-88页
        3.3.1 探针BD-diSH的设计和合成第78-79页
        3.3.2 探针BD-diSH对硫烷硫的光谱分析第79页
        3.3.3 探针BD-diSH对硫烷硫的选择性第79-80页
        3.3.4 探针BD-diSH对硫烷硫的反应动力学第80-81页
        3.3.5 探针BD-diSH的pH稳定性第81页
        3.3.6 吐温80对探针BD-diSH的荧光强度影响第81-82页
        3.3.7 探针BD-diSH的细胞毒性第82页
        3.3.8 探针BD-diSH在细胞内的定位和成像分析第82-84页
        3.3.9 探针BD-diSH检测不同细胞中硫烷硫浓度第84页
        3.3.10 探针BD-diSH检测细胞内源性硫烷硫浓度变化第84-85页
        3.3.11 探针BD-diSH检测小鼠各器官中硫烷硫浓度第85-86页
        3.3.12 探针BD-diSH检测海马体组织中硫烷硫浓度第86-87页
        3.3.13 探针BD-diSH检测BALB/c小鼠腹腔中的硫烷硫浓度第87-88页
    3.4 小结第88-89页
第4章 近红外比率型荧光探针用于分析温度胁迫下硫醇浓度和细胞凋亡之间的关系第89-127页
    4.1 引言第89-90页
    4.2 实验部分第90-98页
        4.2.1 实验材料和试剂第90-91页
        4.2.2 仪器第91页
        4.2.3 探针CyO-Dise的合成第91-95页
            4.2.3.1 合成目标化合物Keto-Cy第91-92页
            4.2.3.2 合成目标化合物CyO-R’第92-93页
            4.2.3.3 合成目标化合物CyO-Dise第93-95页
        4.2.4 探针CyO-Dise的光谱测试第95页
        4.2.5 细胞培养和细胞成像第95页
        4.2.6 流式细胞仪分析第95页
        4.2.7 高效液相色谱实验第95-96页
        4.2.8 顺铂耐药细胞株(HepG2/DDP)的构建第96页
        4.2.9 顺铂耐药细胞株(HepG2/DDP)的治疗第96页
        4.2.10 蛋白质印迹分析第96-97页
        4.2.11 透射电子显微镜成像第97页
        4.2.12 组织学实验第97页
        4.2.13 HepG2和HepG2/DDP荷瘤鼠模型的构建第97页
        4.2.14 HepG2和HepG2/DDP荷瘤鼠模的治疗第97-98页
        4.2.15 HepG2和HepG2/DDP荷瘤鼠模的成像第98页
        4.2.16 统计分析第98页
    4.3 结果与讨论第98-125页
        4.3.1 探针CyO-Dise的设计和合成第98-101页
        4.3.2 探针CyO-Dise对GSH的紫外吸收光谱和荧光光谱分析第101-102页
        4.3.3 探针CyO-Dise对GSH检测的反应动力学和选择性第102-104页
        4.3.4 探针CyO-Dise的pH和温度稳定性第104页
        4.3.5 探针CyO-Dise的细胞毒性考察第104-105页
        4.3.6 探针CyO-Dise定量温度胁迫下细胞中GSH的浓度变化第105-109页
        4.3.7 探针CyO-Dise评估温度胁迫下GSH的抗凋亡作用第109-116页
        4.3.8 探针CyO-Dise评估GSH在耐药过程中的生物作用第116-121页
        4.3.9 探针CyO-Dise评估温度胁迫在HepG2荷瘤鼠模型中的治疗作用第121-123页
        4.3.10 探针CyO-Dise评估温度胁迫在HepG2/DDP荷瘤鼠模型中的治疗作用第123-125页
    4.4 小结第125-127页
第5章 近红外比率型荧光探针用于分析缺血再灌注过程中超氧阴离子的爆发情况第127-151页
    5.1 引言第127-128页
    5.2 实验部分第128-136页
        5.2.1 实验材料和试剂第128-130页
        5.2.2 仪器第130页
        5.2.3 探针Mito-Cy-Tfs的合成第130-133页
            5.2.3.1 合成目标化合物第130-131页
            5.2.3.2 合成目标化合物2(Mito-Cy)第131-132页
            5.2.3.3 合成目标化合物3(Mito-Cy-Tfs)第132-133页
        5.2.4 探针Mito-Cy-Tfs的光谱测试第133页
        5.2.5 细胞培养和细胞成像第133页
        5.2.6 流式细胞仪分析第133-134页
        5.2.7 细胞缺血再灌注模型的建立第134页
        5.2.8 肝脏缺血再灌注模型的建立第134-135页
        5.2.9 C57BL/6小鼠的饲养和成像第135页
        5.2.10 统计分析第135-136页
    5.3 结果与讨论第136-150页
        5.3.1 Mito-Cy-Tfs的设计和合成第136-137页
        5.3.2 探针Mito-Cy-Tfs对O_2~(·?)的光谱分析第137-138页
        5.3.3 探针Mito-Cy-Tfs的选择性和稳定性第138-140页
        5.3.4 探针Mito-Cy-Tfs的细胞毒性考察第140-141页
        5.3.5 探针Mito-Cy-Tfs的线粒体定位情况第141-142页
        5.3.6 探针Mito-Cy-Tfs检测细胞内源性O_2~(·?)浓度变化第142-143页
        5.3.7 探针Mito-Cy-Tfs检测细胞缺血再灌注模型中O_2~(·?)浓度变化第143-147页
        5.3.8 探针Mito-Cy-Tfs检测小鼠肝脏缺血再灌注模型中O_2~(·?)浓度变化.第147-150页
    5.4 小结第150-151页
第6章 近红外比率型荧光探针用于分析CCl4胁迫下急性炎症爆发过程中硒醇浓度变化第151-175页
    6.1 引言第151-152页
    6.2 实验部分第152-159页
        6.2.1 实验材料和试剂第152-153页
        6.2.2 仪器第153-154页
        6.2.3 探针Cy-SS的合成第154-157页
            6.2.3.1 合成对照探针第154-155页
            6.2.3.2 合成探针Cy-SS第155-157页
        6.2.4 探针Cy-SS的光谱测试第157页
        6.2.5 细胞培养和细胞炎症模型的构建第157页
        6.2.6 细胞成像和流式细胞仪分析第157-158页
        6.2.7 高效液相色谱-质谱联用实验第158页
        6.2.8 BALB/c小鼠急性肝脏炎症模型的构建第158页
        6.2.9 BALB/c小鼠的饲养和成像第158-159页
        6.2.10 统计分析第159页
    6.3 结果与讨论第159-174页
        6.3.1 探针Cy-SS的设计和合成第159-161页
        6.3.2 探针Cy-SS对硒醇的光谱响应第161页
        6.3.3 探针Cy-SS对硒醇的选择性和动力学第161-163页
        6.3.4 探针Cy-SS的pH稳定性第163页
        6.3.5 探针Cy-SS的细胞毒性考察第163-164页
        6.3.6 探针Cy-SS在细胞中的定位第164-165页
        6.3.7 探针Cy-SS定量活细胞中内源性硒醇的浓度第165-167页
        6.3.8 探针Cy-SS定量急/慢性细胞炎症模型中硒醇的浓度第167-169页
        6.3.9 探针Cy-SS检测小鼠腹腔中硒醇的浓度第169-170页
        6.3.10 探针Cy-SS检测小鼠急性肝炎爆发过程中硒醇的浓度第170-174页
    6.4 小结第174-175页
第7章 近红外比率型荧光探针用于分析CS2胁迫下急/慢性炎症爆发过程中硒醇浓度变化第175-193页
    7.1 引言第175-176页
    7.2 实验部分第176-181页
        7.2.1 实验材料和试剂第176-178页
        7.2.2 仪器第178页
        7.2.3 探针Mito-diNO_2的合成第178-179页
        7.2.4 探针Mito-diNO_2的光谱测试第179页
        7.2.5 细胞培养和线粒体相关的细胞急性炎症构建第179页
        7.2.6 细胞成像第179-180页
        7.2.7 流式细胞仪分析第180页
        7.2.8 小鼠的饲养和成像第180页
        7.2.9 小鼠急/慢性肝炎模型及其治疗模型的构建第180-181页
        7.2.10 统计分析第181页
    7.3 结果与讨论第181-191页
        7.3.1 探针Mito-diNO_2的设计和合成第181-182页
        7.3.2 探针Mito-diNO_2对硒代半胱氨酸响应的光谱变化第182页
        7.3.3 探针Mito-diNO_2对硒代半胱氨酸响应的选择性和反应动力学第182-184页
        7.3.4 探针Mito-diNO_2的pH稳定性第184页
        7.3.5 探针Mito-diNO_2的细胞毒性考察第184-185页
        7.3.6 探针Mito-diNO_2在线粒体中的定位第185-186页
        7.3.7 探针Mito-diNO_2定量不同细胞中硒醇的浓度第186页
        7.3.8 探针Mito-diNO_2评估细胞中硒醇浓度和急性炎症之间的关系第186-188页
        7.3.9 探针Mito-diNO_2评估小鼠急/慢性肝炎模型中Sec的浓度第188-191页
    7.4 小结第191-193页
第8章 全文总结与展望第193-197页
    8.1 全文总结第193-194页
    8.2 展望第194-197页
参考文献第197-211页
致谢第211-213页
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第213-214页

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