符号及缩略词 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9页 |
1 前言 | 第10-28页 |
1.1 大肠杆菌的基本特性 | 第11页 |
1.2 大肠杆菌的抗原特性 | 第11-12页 |
1.3 大肠杆菌的致病性 | 第12-15页 |
1.3.1 致病物质 | 第12-13页 |
1.3.2 临床表现 | 第13-15页 |
1.4 喹诺酮类药物的作用历史 | 第15-16页 |
1.5 喹诺酮类药物的种类及其抗菌作用 | 第16-19页 |
1.5.1 诺氟沙星 | 第16页 |
1.5.2 环丙沙星 | 第16-17页 |
1.5.3 氧氟沙星 | 第17页 |
1.5.4 恩诺沙星 | 第17页 |
1.5.5 培氟沙星 | 第17-18页 |
1.5.6 西他沙星 | 第18页 |
1.5.7 加雷沙星 | 第18页 |
1.5.8 贝西沙星 | 第18页 |
1.5.9 安妥沙星 | 第18页 |
1.5.10 Delafloxacin | 第18-19页 |
1.5.11 非那沙星 | 第19页 |
1.5.12 奈诺沙星 | 第19页 |
1.5.13 奥泽沙星 | 第19页 |
1.6 喹诺酮类药物的作用机制 | 第19-20页 |
1.7 喹诺酮类药物的耐药机制 | 第20-26页 |
1.7.1 细菌细胞膜通透性改变 | 第20-21页 |
1.7.2 编码 DNA 和拓扑异构酶Ⅳ的基因发生点突变 | 第21页 |
1.7.3 主动外排 | 第21-22页 |
1.7.4 质粒介导的细菌对喹诺酮类药物的耐药 | 第22-26页 |
1.7.4.1 Qnr 蛋白的发现及耐药活性 | 第22-25页 |
1.7.4.2 aac(6’)-Ib-cr 基因的发现及耐药机制 | 第25页 |
1.7.4.3 质粒介导的外排泵基因及其耐药机制 | 第25-26页 |
1.8 本研究的目的意义 | 第26-28页 |
2 材料及方法 | 第28-37页 |
2.1 大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验 | 第28-30页 |
2.1.1 病料来源 | 第28页 |
2.1.2 供试药物及培养基 | 第28页 |
2.1.3 仪器及设备 | 第28页 |
2.1.4 细菌的显微镜检查 | 第28页 |
2.1.5 病原分离培养及纯化 | 第28-29页 |
2.1.6 菌落形态学观察 | 第29页 |
2.1.7 生化鉴定按常规方法 | 第29页 |
2.1.8 血清型鉴定 | 第29页 |
2.1.9 药敏试验 | 第29-30页 |
2.2 质粒介导喹诺酮类药物耐药基因的流行性检测与克隆测序 | 第30-37页 |
2.2.1 试验菌株 | 第30页 |
2.2.2 细菌生长培养基 | 第30页 |
2.2.3 分子生物学试剂 | 第30页 |
2.2.4 电泳缓冲液 | 第30-31页 |
2.2.5 琼脂糖凝胶的配制 | 第31页 |
2.2.6 实验仪器设备 | 第31页 |
2.2.7 引物的设计及合成 | 第31-32页 |
2.2.8 PCR 反应 | 第32页 |
2.2.9 PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
2.2.10 PCR 产物的回收与定量 | 第32-33页 |
2.2.11 回收目的片段的连接及转化 | 第33-34页 |
2.2.12 重组质粒 DNA 的提取 | 第34-35页 |
2.2.13 重组质粒的酶切鉴定 | 第35页 |
2.2.14 阳性克隆序列测定 | 第35-37页 |
3 结果与分析 | 第37-45页 |
3.1 病菌的培养生长特性 | 第37-38页 |
3.2 染色镜检结果 | 第38页 |
3.3 病原生化特征 | 第38-39页 |
3.4 血清型鉴定结果 | 第39页 |
3.5 药敏试验结果 | 第39-40页 |
3.6 PMQR 耐药基因的 PCR 扩增结果及产物分析 | 第40-43页 |
3.6.1 喹诺酮类耐药基因重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第41页 |
3.6.2 93 株禽源致病性大肠杆菌中携带 PMQR 基因的情况 | 第41-43页 |
3.7 耐药表型与耐药基因符合率结果 | 第43-44页 |
3.8 PMQR 基因分别在对喹诺酮类药物耐药和敏感的大肠杆菌菌株中阳性检出率 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
4.1 禽源大肠杆菌分离鉴定及血清学检测 | 第45-46页 |
4.2 大肠杆菌喹诺酮类药物耐药表型及基因型分析 | 第46-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
6 参考文献 | 第49-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第61页 |