| 缩略词表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第13-30页 |
| 1.1 抗生素耐药问题是全球性挑战 | 第13-15页 |
| 1.2 耐药菌使新型抗生素研发受阻 | 第15-20页 |
| 1.3 α-防御素具有广阔的应用前景 | 第20-26页 |
| 1.4 α-防御素的基因工程表达研究现状 | 第26-28页 |
| 1.5 拟解决的科学问题 | 第28-30页 |
| 第二章 HNP-1表达和抑菌活性检测 | 第30-50页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第30-32页 |
| 2.1.1 菌株 | 第30页 |
| 2.1.2 试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第30-31页 |
| 2.1.4 仪器 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 HNP-1重组表达质粒的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.2 大肠杆菌生长曲线检测 | 第33页 |
| 2.2.3 Tricine gel检测目的蛋白条带 | 第33-34页 |
| 2.2.4 质谱检测目的条带 | 第34-35页 |
| 2.2.5 N端蛋白鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.6 Top-down MS检测mature HNP-1 | 第36-37页 |
| 2.2.7 活细菌计数 | 第37页 |
| 2.2.8 超滤法纯化蛋白 | 第37-39页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第39-50页 |
| 2.3.1 IPTG诱导的生长曲线检测 | 第39页 |
| 2.3.2 IPTG诱导的HNP-1表达检测 | 第39-43页 |
| 2.3.3 HNP-1 N端检测 | 第43-45页 |
| 2.3.4 Top-down MS检测maure HNP-1 | 第45-46页 |
| 2.3.5 mature HNP-1含量比较 | 第46-47页 |
| 2.3.6 活细菌计数 | 第47-48页 |
| 2.3.7 超滤法纯化蛋白 | 第48页 |
| 2.3.8 抑菌活性比较 | 第48-50页 |
| 2.4 小结 | 第50页 |
| 第三章 HNP-1抑菌机制研究 | 第50-62页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 3.2.1 非标定量蛋白质组学 | 第51-53页 |
| 3.2.2 差异蛋白功能聚类 | 第53页 |
| 3.2.3 TUNEL染色检测细菌调亡 | 第53-54页 |
| 3.2.4 Annexin V染色检测细菌凋亡 | 第54页 |
| 3.2.5 电镜检测细菌形态 | 第54-55页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第55-61页 |
| 3.3.1 差异蛋白筛选 | 第55-56页 |
| 3.3.2 差异蛋白聚类分析 | 第56-58页 |
| 3.3.3 差异蛋白参与细菌凋亡 | 第58页 |
| 3.3.5 TUNEL染色检测细胞凋亡 | 第58-59页 |
| 3.3.6 Annexin V染色检测细胞凋亡 | 第59-60页 |
| 3.3.7 电镜检测细菌形态 | 第60-61页 |
| 3.4 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 HNP-1相互作用蛋白筛选 | 第62-79页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第62-63页 |
| 4.1.1 试剂 | 第62页 |
| 4.1.2 主要试剂配制 | 第62-63页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第63页 |
| 4.2 实验方法 | 第63-67页 |
| 4.2.1 相互作用蛋白富集 | 第63-64页 |
| 4.2.2 质谱鉴定相互作用蛋白 | 第64页 |
| 4.2.3 相互作用蛋白验证 | 第64-65页 |
| 4.2.4 相互作用位点预测 | 第65页 |
| 4.2.5 RecA ATP酶活性测试 | 第65-67页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第67-77页 |
| 4.3.1 相互作用蛋白富集 | 第67-68页 |
| 4.3.2 相互作用蛋白筛选 | 第68-70页 |
| 4.3.3 相互作用蛋白验证 | 第70-72页 |
| 4.3.4 相互作用结合位点预测 | 第72-73页 |
| 4.3.5 RecA ATP活性测试 | 第73-75页 |
| 4.3.7 RecA与细菌耐药机制 | 第75-77页 |
| 4.4 小结 | 第77-79页 |
| 第五章 总结与展望 | 第79-90页 |
| 5.1 主要结论 | 第79-80页 |
| 5.2 创新点 | 第80页 |
| 5.3 研究展望 | 第80-90页 |
| 5.3.1 HNP-1加工酶筛选 | 第80-81页 |
| 5.3.2 HNP-1可能通过TA模块促进细菌程序性死亡 | 第81-87页 |
| 5.3.3 HNP-1可能参与细菌耐药途径调控 | 第87-88页 |
| 5.3.4 HNP-1是有前景的抗细菌耐药药物 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-98页 |
| 攻读博士学位期间的主要科研成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-101页 |
| 附录 | 第101-112页 |
