| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第12-21页 |
| 第一章 猪瘟病毒和外被体蛋白Ⅱ研究进展 | 第12-21页 |
| 1.1 猪瘟病毒研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1.1 CSFV的分子特征及各蛋白与宿主细胞之间的相互作用 | 第12-16页 |
| 1.1.2 CSFV的生命周期 | 第16-17页 |
| 1.2 外被体蛋白Ⅱ研究进展 | 第17-21页 |
| 1.2.1 外被体蛋白Ⅱ系统概述 | 第17-18页 |
| 1.2.2 细胞内膜系统在病毒复制和出芽中的作用 | 第18-19页 |
| 1.2.3 外被体蛋白Ⅱ系统在病毒增殖中的作用研究进展 | 第19-21页 |
| 试验研究 | 第21-64页 |
| 第二章 外被体蛋白Ⅱ对猪瘟病毒复制的影响 | 第21-64页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 病毒、细胞和主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要仪器设备和耗材 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-34页 |
| 2.2.1 细胞培养与传代 | 第23页 |
| 2.2.2 IFA检测CSFV的TCID | 第23页 |
| 2.2.3 猪瘟病毒感染PK-15细胞 | 第23-24页 |
| 2.2.4 细胞总RNA提取、cDNA合成 | 第24页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
| 2.2.6 Westernblot检测 | 第25页 |
| 2.2.7 MTT检测H89对PK-15细胞增殖的影响 | 第25-26页 |
| 2.2.8 抑制剂H89对CSFV复制的影响 | 第26页 |
| 2.2.9 Sar1b、Sec13、Sec23基因的真核表达载体构建 | 第26-28页 |
| 2.2.10 pCDH-Sar1b、pCDH-Sec13、pCDH-Sec23的转染与稳转筛选 | 第28-29页 |
| 2.2.11 过表达Sar1b、Sec13、Sec23对猪瘟病毒复制的影响 | 第29页 |
| 2.2.12 Sar1b、Sec13、Sec23干扰载体的构建及稳转细胞系的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.13 干扰Sar1b、Sec13、Sec23对猪瘟病毒复制的影响 | 第32页 |
| 2.2.14 Real-tinePCR检测CSFVRNA相对复制量 | 第32页 |
| 2.2.15 重叠延伸PCR构建Sar1b[H79G]和Sar1b[T39N] | 第32-33页 |
| 2.2.16 Sar1b[H79G]和Sar1b[T39N]真核表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.2.17 Sar1b[H79G]和Sar1b[T39N]突变细胞系的构建 | 第34页 |
| 2.2.18 稳定表达Sar1b[H79G]和Sar1b[T39N]突变体对CSFV复制的影响 | 第34页 |
| 2.2.19 数据分析 | 第34页 |
| 2.3 结果 | 第34-61页 |
| 2.3.1 真核表达载体的构建与双酶切鉴定 | 第34-36页 |
| 2.3.2 Sar1b、Sec13、Sec23稳定表达细胞系的构建与鉴定 | 第36-38页 |
| 2.3.3 过表达Sar1b、Sec13、Sec23对CSFV复制的影响 | 第38-42页 |
| 2.3.4 H89作用PK-15细胞对CSFV复制的影响 | 第42-44页 |
| 2.3.5 重组慢病毒的包装与病毒滴度的测定 | 第44-49页 |
| 2.3.6 慢病毒干扰细胞系的构建与鉴定 | 第49-50页 |
| 2.3.7 Sar1b、Sec13、Sec23干扰细胞中CSFV增殖的变化 | 第50-53页 |
| 2.3.8 真核表达载体pCDH-Sar1b[H79G]和pCDH-Sar1b[T39N]的构建 | 第53-55页 |
| 2.3.9 Sar1b[H79G]和Sar1b[T39N]突变细胞系的构建 | 第55-56页 |
| 2.3.10 Sar1b[H79G]对CSFV复制的影响 | 第56页 |
| 2.3.11 Sar1b[T39N]对CSFV复制的影响 | 第56-57页 |
| 2.3.12 CSFV感染PK-15细胞后对Sar1b、Sec13和Sec23表达的影响 | 第57-61页 |
| 2.4 讨论 | 第61-64页 |
| 2.4.1 COPⅡ复合体蛋白促进CSFV的复制 | 第61-62页 |
| 2.4.2 Sar1b的活性状态在CSFV复制中的作用 | 第62页 |
| 2.4.3 CSFV感染PK-15细胞对细胞内COPⅡ复合体蛋白的影响 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 缩略词 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
