| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 第1章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 研究背景及意义 | 第9页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第9-17页 |
| 1.2.1 BTF的结构以及亚细胞定位 | 第9-10页 |
| 1.2.2 BTF参与mRNA的成熟以及mRNA运输 | 第10-12页 |
| 1.2.3 BTF参与到DNA损伤修复与细胞凋亡 | 第12-14页 |
| 1.2.4 BTF与肿瘤的关系 | 第14-15页 |
| 1.2.5 BTF缺失影响小鼠肺发育 | 第15-17页 |
| 第2章 鉴定BTF与BACH1相互作用关键区段 | 第17-30页 |
| 2.1 前言 | 第17页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第17-18页 |
| 2.2.1 主要实验材料与仪器 | 第17页 |
| 2.2.2 实验试剂配制 | 第17-18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-26页 |
| 2.3.1 SFB-BTF突变体质粒的构建 | 第18-20页 |
| 2.3.2 CoIP鉴定BTF与BACH1相互作用关键区段 | 第20-23页 |
| 2.3.3 GSTpull-down验证BTF-D7是与BACH1相互作用关键区段 | 第23-26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-29页 |
| 2.4.1 构建SFB-BTF突变体真核表达质粒 | 第26页 |
| 2.4.2 BTF缺失D7片段后将不能与内源性的BACH1相互作用 | 第26-27页 |
| 2.4.3 GSTpull-down验证BTF的D7片段是与BACH1相互作用关键区段 | 第27-29页 |
| 2.5 本章小结 | 第29-30页 |
| 第3章 BTF在细胞受到DNA损伤后被募集到损伤位点 | 第30-39页 |
| 3.1 前言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第30-31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-36页 |
| 3.3.1 构建pEGFP-C1-BTF质粒 | 第31-34页 |
| 3.3.2 免疫荧光染色 | 第34-35页 |
| 3.3.3 激光诱导活细胞损伤 | 第35-36页 |
| 3.4 实验结果 | 第36-38页 |
| 3.4.1 BTF会募集到药物处理细胞造成的交联损伤位点 | 第36-37页 |
| 3.4.2 BTF会迅速募集到激光诱导的损伤位点 | 第37-38页 |
| 3.5 本章小结 | 第38-39页 |
| 第4章 敲低BACH1影响BTF募集到DNA损伤位点 | 第39-45页 |
| 4.1 前言 | 第39页 |
| 4.2 实验材料和仪器 | 第39-40页 |
| 4.3 实验方法 | 第40-42页 |
| 4.3.1 细胞培养与铺板 | 第40页 |
| 4.3.2 siRNA设计 | 第40-41页 |
| 4.3.3 siRNA敲低目的基因 | 第41页 |
| 4.3.4 细胞转染 | 第41-42页 |
| 4.3.5 激光诱导活细胞DNA损伤 | 第42页 |
| 4.4 实验结果 | 第42-44页 |
| 4.4.1 siBTF和siBACH1可以显著敲低目的蛋白的表达量 | 第42-43页 |
| 4.4.2 U2OS细胞敲低BACH1后BTF在DNA受损后不会被募集到损伤位点 | 第43-44页 |
| 4.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第5章 BTF通过D7片段与BACH1相互作用被募集到损伤位点 | 第45-51页 |
| 5.1 前言 | 第45页 |
| 5.2 实验材料和仪器 | 第45页 |
| 5.3 实验方法 | 第45-48页 |
| 5.3.1 pEGFP-C1-BTF突变体质粒的构建 | 第45-47页 |
| 5.3.2 激光诱导活细胞损伤 | 第47-48页 |
| 5.4 实验结果 | 第48-50页 |
| 5.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 第6章 讨论和展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
