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三碘甲状腺原氨酸及真菌毒素的化学发光免疫分析方法研究

中文摘要第2-3页
Abstract第3-4页
目录第5-9页
第一章 化学发光免疫分析与甲状腺激素及真菌毒素的检测第9-26页
    摘要第9页
    1.1 引言第9页
    1.2 甲状腺概述第9-11页
    1.3 三碘甲状腺原氨酸的概述第11-12页
    1.4 三碘甲状腺原氨酸的检测历程第12-14页
        1.4.1 色谱法第12页
        1.4.2 免疫分析法第12-14页
            1.4.2.1 放射免疫分析(RIA)第12-13页
            1.4.2.2 酶联免疫吸附分析法(ELISA)第13页
            1.4.2.3 荧光免疫分析(FIA)第13页
            1.4.2.4 化学发光分析(CLIA)第13-14页
            1.4.2.5 免疫分析与其它技术联用第14页
    1.5 真菌毒素(Mycotoxin)的危害及其检测技术第14-18页
        1.5.1 真菌毒素概述第14-17页
            1.5.1.1 黄曲霉毒素(Aflatoxin,AF)第15-16页
            1.5.1.2 赭曲霉毒素(Ochratoxin,OA)第16页
            1.5.1.3 玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)第16页
            1.5.1.4 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol, DON)第16页
            1.5.1.5 伏马菌素 (Fumonisins, FB)第16-17页
        1.5.2 真菌毒素的检测技术第17-18页
            1.5.2.1 生物学方法第17页
            1.5.2.2 化学方法第17-18页
            1.5.2.3 免疫学方法第18页
    1.6 化学发光免疫分析第18-25页
        1.6.1 化学发光免疫分析基本原理第19-22页
            1.6.1.1 免疫分析的基本原理第19-20页
            1.6.1.2 化学发光基本原理第20-21页
            1.6.1.3 固相化学发光免疫分析原理第21-22页
            1.6.1.4 均相化学发光免疫分析第22页
        1.6.2 化学发光免疫分析方法的主要类型第22-24页
            1.6.2.1 化学发光标记免疫分析法第22-23页
            1.6.2.2 化学发光酶免疫分析法第23-24页
            1.6.2.3 电化学发光免疫分析第24页
        1.6.3 化学发光免疫分析新进展第24-25页
            1.6.3.1 新型固相材料的应用第24-25页
            1.6.3.2 化学发光免疫分析联用检测技术第25页
    1.7 总结和展望第25-26页
第二章 微孔板化学发光免疫分析法检测人血清中三碘甲状腺原氨酸第26-33页
    摘要第26页
    2.1 引言第26-27页
    2.2 实验部分第27-28页
        2.2.1 主要仪器和试剂第27页
        2.2.2 实验设计第27页
        2.2.3 实验方法第27-28页
            2.2.3.1 固相抗体的制备第27-28页
            2.2.3.2 酶标抗原(HRP-T3)的制备第28页
            2.2.3.3 T3标准品的配制第28页
            2.2.3.4 血清样品中 T3的化学发光免疫分析第28页
            2.2.3.5 数据处理第28页
    2.3 结果讨论第28-32页
        2.3.1 包被缓冲液及抗体稀释度选择第28-29页
        2.3.2 酶标抗原稀释度的选择第29页
        2.3.3 温育时间的优化第29-30页
        2.3.4 化学发光动力学曲线第30页
        2.3.5 校准品稳定性考察第30-31页
        2.3.6 方法学评价第31-32页
            2.3.6.1 标准曲线第31页
            2.3.6.2 灵敏度和精密度第31页
            2.3.6.3 回收率第31页
            2.3.6.4 健全性第31-32页
            2.3.6.5 特异性第32页
            2.3.6.6 实际样品的检测及与 Monobind 试剂盒测值的比较第32页
    2.4 结论第32-33页
第三章 基于磁微粒的化学发光免疫分析法检测人血清中三碘甲状腺原氨酸第33-42页
    摘要第33页
    3.1 引言第33页
    3.2 实验部分第33-35页
        3.2.1 主要仪器和试剂第33-34页
        3.2.2 实验方法第34-35页
            3.2.2.1 校准品配制第34页
            3.2.2.2 磁微粒化学发光免疫分析测定 T3的实验步骤第34-35页
    3.3 实验结果与讨论第35-41页
        3.3.1 磁微粒化学发光免疫分析法检测 T3的基本原理第35页
        3.3.2 免疫试剂用量的优化第35-36页
        3.3.3 免疫反应时间的优化第36页
        3.3.4 磁颗粒体积的优化第36-37页
        3.3.5 底物体积的优化第37页
        3.3.6 化学发光反应时间的优化第37-38页
        3.3.7 方法学评价第38-41页
            3.3.7.1 标准曲线与灵敏度第38-39页
            3.3.7.2 精密度第39页
            3.3.7.3 回收率第39页
            3.3.7.4 特异性第39页
            3.3.7.5 健全性第39-40页
            3.3.7.6 实际样品检测第40-41页
    3.4 结论第41-42页
第四章 基于磁微粒化学发光免疫分析法测定谷物中玉米赤霉烯酮的含量第42-52页
    摘要第42页
    4.1 引言第42-43页
    4.2 实验部分第43-46页
        4.2.1 仪器和试剂第43-44页
        4.2.2 实验方法第44-46页
            4.2.2.1 校准品的配制第44页
            4.2.2.2 FITC 标记抗 ZEN 单克隆抗体第44页
            4.2.2.3 HRP 标记 ZEN第44页
            4.2.2.4 磁颗粒化学发光免疫分析法(MPs-CLEIA)测定谷物中 ZEN 含量第44-45页
            4.2.2.5 酶联免疫分析法(ELISA)测定谷物中 ZEN 含量第45页
            4.2.2.6 样品处理第45页
            4.2.2.7 数据处理第45-46页
    4.3 结果和讨论第46-51页
        4.3.1 磁微粒化学发光免疫分析法检测 ZEN 的基本原理第46页
        4.3.2 缓冲溶液 pH 值的影响第46-47页
        4.3.3 酶结合物及抗体滴度优化第47-48页
        4.3.4 磁微粒及底物体积优化第48页
        4.3.5 免疫反应时间优化第48页
        4.3.6 化学发光时间优化第48-49页
        4.3.7 方法学评价第49-51页
            4.3.7.1 标准曲线及灵敏度第49页
            4.3.7.2 精密度第49页
            4.3.7.3 回收率第49-50页
            4.3.7.4 特异性第50页
            4.3.7.5 实际样品检测第50-51页
    4.4 结论第51-52页
第五章 微孔板化学发光免疫分析法测定谷物中赭曲霉毒素 A第52-60页
    摘要第52页
    5.1 引言第52-53页
    5.2 实验部分第53-55页
        5.2.1 仪器和试剂第53页
        5.2.2 实验步骤第53-55页
            5.2.2.1 校准品的配制第53-54页
            5.2.2.2 固相抗体的制备第54页
            5.2.2.3 辣根过氧化物酶(HRP)标记 OTA第54页
            5.2.2.4 样品的提取第54页
            5.2.2.5 化学发光免疫分析法测定 OTA第54-55页
            5.2.2.6 数据处理第55页
    5.3 结果与讨论第55-59页
        5.3.1 包被抗体浓度及酶标记物滴度优化第55页
        5.3.2 免疫反应时间优化第55-56页
        5.3.3 发光底物体积及发光反应时间优化第56-57页
        5.3.4 方法学评价第57-59页
            5.3.4.1 标准曲线及灵敏度第57页
            5.3.4.2 精密度第57页
            5.3.4.3 回收率第57页
            5.3.4.4 健全性第57-58页
            5.3.4.5 实际样品检测第58-59页
    5.4 结论第59-60页
总结第60-62页
参考文献第62-71页
致谢第71-72页
个人简历第72-73页
硕士期间主要研究成果第73页

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