| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略词 | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第9-21页 |
| 1 植物MIRNA研究背景 | 第9-15页 |
| 1.1 miRNA的发现 | 第9-10页 |
| 1.2 植物miRNA的保守性 | 第10-11页 |
| 1.3 植物miRNA的合成及作用机制 | 第11-12页 |
| 1.4 植物miRNA的功能的研究 | 第12-15页 |
| 2 植物镉毒害 | 第15-19页 |
| 2.1 植物对镉的吸收与积累 | 第15-16页 |
| 2.2 植物中镉的生物学效应 | 第16-17页 |
| 2.3 植物耐镉机制 | 第17-18页 |
| 2.4 miRNA在植物镉胁迫中的作用 | 第18-19页 |
| 3 问题与展望 | 第19-21页 |
| 前言 | 第21-23页 |
| 材料与方法 | 第23-39页 |
| 1 实验材料 | 第23页 |
| 1.1 植物材料 | 第23页 |
| 1.2 元件预测及启动子分析材料 | 第23页 |
| 1.3 菌株与质粒 | 第23页 |
| 2 主要试剂及配方 | 第23-29页 |
| 2.1 载体构建试剂 | 第23-25页 |
| 2.2 组培试剂 | 第25-28页 |
| 2.3 检测及鉴定试剂 | 第28-29页 |
| 3 实验方法 | 第29-39页 |
| 3.1 生物信息学方法预测水稻重金属相关顺式作用元件 | 第29-30页 |
| 3.2 载体构建 | 第30-34页 |
| 3.3 农杆菌介导的水稻转基因 | 第34-35页 |
| 3.4 转基因水稻的检测及鉴定 | 第35-39页 |
| 结果与讨论 | 第39-55页 |
| 1 过表达MIR604A水稻转基因苗获得、检测及初步鉴定 | 第39-48页 |
| 1.1 miR604a基因过表达载体的构建 | 第39-41页 |
| 1.2 miR604a过表达工程农杆菌介导的水稻遗传转化及植株再生 | 第41-43页 |
| 1.3 35s::pre-miR604a T_0代的检测 | 第43-45页 |
| 1.4 35s::pre-miR604aT_1代生理观察 | 第45-46页 |
| 1.5 重金属胁迫下35s::pre-miR604aT1代生理鉴定 | 第46-48页 |
| 2 MIR396c基因自身启动子载体的构建及检测 | 第48-53页 |
| 2.1 水稻microRNAs启动子区重金属相关顺式作用元件预测 | 第48页 |
| 2.2 含有MREs的水稻microRNAs启动子顺式作用元件分析 | 第48-49页 |
| 2.3 miR396c基因自身启动子载体的构建 | 第49-50页 |
| 2.4 miR396c自身启动子工程农杆菌介导的水稻遗传转化及植株再生 | 第50页 |
| 2.5 promiR96c::pre-miR396c的PCR检测 | 第50-51页 |
| 2.6 promiR396c::pre-miR396c T0代的Cd处理前后GFP鉴定 | 第51-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 全文总结 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
