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黏附家族G蛋白偶联受体GPR126在血管新生及结肠癌发生发展中的功能和机理研究

摘要第9-12页
Abstract第12-15页
第一章 研究背景和文献综述第16-68页
    1. G蛋白偶联受体和G蛋白偶联受体信号第16-38页
        1.1 G蛋白偶联受体(GPCR)概述第16页
        1.2 GPCRs的分类第16-17页
        1.3 GPCR的结构特征第17-27页
        1.4 GPCR的晶体结构解析研究第27-29页
        1.5 G蛋白偶联受体信号(GPCR signaling)第29-38页
    2. GPCR与血管发生/血管新生第38-57页
        2.1 VEGF-VEGFR信号与血管发生(Vasculogenesis)/血管新生(Angiogenesis)第38-39页
        2.2 调节Vasculogenesis和Angiogenesis过程的“冠军”:VEGF-VEGFR2第39-53页
        2.3 GPCR与血管新生第53-55页
        2.4 GPCR与VEGFR2之间的信号交互作用第55-57页
    3. GPCR与肿瘤发生发展研究第57-62页
        3.1 GPCRs高表达调节肿瘤细胞增殖第57-59页
        3.2 自分泌和旁分泌活化神经肽受体是癌细胞内频发事件第59-60页
        3.3 GPCRs与激素难治性肿瘤第60页
        3.4 GPCRs将炎症和肿瘤关联第60-62页
    4. GPCR126研究概述第62-68页
        4.1 GPCR126基因座位、SNP和保守性第62-63页
        4.2 GPR126的功能研究现状第63-68页
第二章 GPR126在血管新生中的作用研究第68-121页
    1. 前言第68-69页
    2. 材料与方法第69-92页
        2.1 主要实验材料、试剂及仪器第69-71页
        2.2 主要溶液配制第71-74页
        2.3 引物等寡核苷酸合成、测序信息第74页
        2.4 DNA载体构建第74-76页
        2.5 磷酸钙转染和siRNA转染第76-77页
        2.6 慢病毒介导的RNAi和高表达第77页
        2.7 病毒滴度的测定第77-78页
        2.8 蛋白印迹和抗体信息第78-80页
        2.9 细胞系和细胞培养基及实验动物第80-81页
        2.10 拟胚体分化实验第81页
        2.11 免疫组织化学第81-82页
        2.12 RT-PCR和qRT-PCR实验第82-84页
        2.13 细胞增殖和BrdU掺入DNA实验第84页
        2.14 斑马鱼血管新生实验第84-85页
        2.15 缺氧诱导视网膜新生血管模型第85-86页
        2.16 Matrigel plug实验第86页
        2.17 细胞愈合迁移实验第86页
        2.18 小室迁移实验第86-87页
        2.19 活细胞成像第87页
        2.20 内皮成管实验第87页
        2.21 三纬基质胶中球状体出芽实验第87-88页
        2.22 凝胶阻滞实验第88-89页
        2.23 染色质免疫沉淀分析第89-91页
        2.24 主要软件与数据库第91-92页
    3. 实验结果第92-118页
        3.1 GPR126在组织血管内皮及HMEC-1细胞中的表达第92-95页
        3.2 干扰GPR126的表达削弱了内皮细胞出芽能力第95-96页
        3.3 GPR126调节内皮细胞的血管新生活性第96-101页
        3.4 抑制GPR126表达抑制体内生理和病理血管新生第101-104页
        3.5 GPR126沉默表达引起胚胎发育中血管新生缺陷第104-107页
        3.6 GPR126通过GATA2和STAT5调节VEGFR2的表达第107-113页
        3.7 GPR126干扰而致的斑马鱼血管新生缺陷可被STAT5和GATA2回复第113-116页
        3.8 GPR126在内皮细胞内可能的作用机制简图第116-118页
    4. 结果讨论第118-121页
第三章 GPR126调节结肠癌增殖研究第121-133页
    1. 前言第121-122页
    2. 材料与仪器第122页
        2.1 细胞系和细胞培养第122页
        2.2 主要实验试剂及仪器第122页
    3. 实验方法第122-124页
        3.1 PCR与RT-PCR第122页
        3.2 磷酸钙转染和病毒包装第122页
        3.3 MTS细胞存活力分析第122页
        3.4 平板克隆形成第122-123页
        3.5 小鼠异种荷瘤实验第123页
        3.6 高通量RNA测序第123-124页
    4. 实验结果第124-131页
        4.1 GPR126在结肠癌细胞中表达情况第124-127页
        4.2 GPR126调节结肠癌细胞的增殖第127-128页
        4.3 GPR126在体内调节结肠癌细胞的生长第128-129页
        4.4 GPR126调节结肠癌细胞生长的机制研究第129-131页
    5. 结果讨论第131-133页
参考文献第133-156页
缩略词表第156-158页
科研成果第158-159页
致谢第159页

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