摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
第一章 研究背景和文献综述 | 第16-68页 |
1. G蛋白偶联受体和G蛋白偶联受体信号 | 第16-38页 |
1.1 G蛋白偶联受体(GPCR)概述 | 第16页 |
1.2 GPCRs的分类 | 第16-17页 |
1.3 GPCR的结构特征 | 第17-27页 |
1.4 GPCR的晶体结构解析研究 | 第27-29页 |
1.5 G蛋白偶联受体信号(GPCR signaling) | 第29-38页 |
2. GPCR与血管发生/血管新生 | 第38-57页 |
2.1 VEGF-VEGFR信号与血管发生(Vasculogenesis)/血管新生(Angiogenesis) | 第38-39页 |
2.2 调节Vasculogenesis和Angiogenesis过程的“冠军”:VEGF-VEGFR2 | 第39-53页 |
2.3 GPCR与血管新生 | 第53-55页 |
2.4 GPCR与VEGFR2之间的信号交互作用 | 第55-57页 |
3. GPCR与肿瘤发生发展研究 | 第57-62页 |
3.1 GPCRs高表达调节肿瘤细胞增殖 | 第57-59页 |
3.2 自分泌和旁分泌活化神经肽受体是癌细胞内频发事件 | 第59-60页 |
3.3 GPCRs与激素难治性肿瘤 | 第60页 |
3.4 GPCRs将炎症和肿瘤关联 | 第60-62页 |
4. GPCR126研究概述 | 第62-68页 |
4.1 GPCR126基因座位、SNP和保守性 | 第62-63页 |
4.2 GPR126的功能研究现状 | 第63-68页 |
第二章 GPR126在血管新生中的作用研究 | 第68-121页 |
1. 前言 | 第68-69页 |
2. 材料与方法 | 第69-92页 |
2.1 主要实验材料、试剂及仪器 | 第69-71页 |
2.2 主要溶液配制 | 第71-74页 |
2.3 引物等寡核苷酸合成、测序信息 | 第74页 |
2.4 DNA载体构建 | 第74-76页 |
2.5 磷酸钙转染和siRNA转染 | 第76-77页 |
2.6 慢病毒介导的RNAi和高表达 | 第77页 |
2.7 病毒滴度的测定 | 第77-78页 |
2.8 蛋白印迹和抗体信息 | 第78-80页 |
2.9 细胞系和细胞培养基及实验动物 | 第80-81页 |
2.10 拟胚体分化实验 | 第81页 |
2.11 免疫组织化学 | 第81-82页 |
2.12 RT-PCR和qRT-PCR实验 | 第82-84页 |
2.13 细胞增殖和BrdU掺入DNA实验 | 第84页 |
2.14 斑马鱼血管新生实验 | 第84-85页 |
2.15 缺氧诱导视网膜新生血管模型 | 第85-86页 |
2.16 Matrigel plug实验 | 第86页 |
2.17 细胞愈合迁移实验 | 第86页 |
2.18 小室迁移实验 | 第86-87页 |
2.19 活细胞成像 | 第87页 |
2.20 内皮成管实验 | 第87页 |
2.21 三纬基质胶中球状体出芽实验 | 第87-88页 |
2.22 凝胶阻滞实验 | 第88-89页 |
2.23 染色质免疫沉淀分析 | 第89-91页 |
2.24 主要软件与数据库 | 第91-92页 |
3. 实验结果 | 第92-118页 |
3.1 GPR126在组织血管内皮及HMEC-1细胞中的表达 | 第92-95页 |
3.2 干扰GPR126的表达削弱了内皮细胞出芽能力 | 第95-96页 |
3.3 GPR126调节内皮细胞的血管新生活性 | 第96-101页 |
3.4 抑制GPR126表达抑制体内生理和病理血管新生 | 第101-104页 |
3.5 GPR126沉默表达引起胚胎发育中血管新生缺陷 | 第104-107页 |
3.6 GPR126通过GATA2和STAT5调节VEGFR2的表达 | 第107-113页 |
3.7 GPR126干扰而致的斑马鱼血管新生缺陷可被STAT5和GATA2回复 | 第113-116页 |
3.8 GPR126在内皮细胞内可能的作用机制简图 | 第116-118页 |
4. 结果讨论 | 第118-121页 |
第三章 GPR126调节结肠癌增殖研究 | 第121-133页 |
1. 前言 | 第121-122页 |
2. 材料与仪器 | 第122页 |
2.1 细胞系和细胞培养 | 第122页 |
2.2 主要实验试剂及仪器 | 第122页 |
3. 实验方法 | 第122-124页 |
3.1 PCR与RT-PCR | 第122页 |
3.2 磷酸钙转染和病毒包装 | 第122页 |
3.3 MTS细胞存活力分析 | 第122页 |
3.4 平板克隆形成 | 第122-123页 |
3.5 小鼠异种荷瘤实验 | 第123页 |
3.6 高通量RNA测序 | 第123-124页 |
4. 实验结果 | 第124-131页 |
4.1 GPR126在结肠癌细胞中表达情况 | 第124-127页 |
4.2 GPR126调节结肠癌细胞的增殖 | 第127-128页 |
4.3 GPR126在体内调节结肠癌细胞的生长 | 第128-129页 |
4.4 GPR126调节结肠癌细胞生长的机制研究 | 第129-131页 |
5. 结果讨论 | 第131-133页 |
参考文献 | 第133-156页 |
缩略词表 | 第156-158页 |
科研成果 | 第158-159页 |
致谢 | 第159页 |