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金属蛋白制备及性质研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第12-33页
    1.1 金属蛋白第12页
    1.2 转铁蛋白的应用前景及其制备方法第12-15页
        1.2.1 转铁蛋白的结构、功能第13-14页
        1.2.2 转铁蛋白的应用第14页
        1.2.3 转铁蛋白的制备第14-15页
    1.3 超氧化物歧化酶的应用前景及其制备方法第15-25页
        1.3.1 自由基第16-17页
        1.3.2 超氧化物歧化酶的功能第17页
        1.3.3 超氧化物歧化酶的分类及分布第17-19页
        1.3.4 超氧化物歧化酶的应用第19-21页
        1.3.5 超氧化物歧化酶的制备第21-23页
        1.3.6 超氧化物歧化酶活性检测方法第23-24页
        1.3.7 超氧化物歧化酶比活测试方法第24-25页
        1.3.8 超氧化物歧化酶的性质第25页
    1.4 超氧化物歧化酶模拟化合物第25-31页
        1.4.1 槲皮素第26页
        1.4.2 槲皮素金属配合物第26-31页
    1.5 研究意义和主要内容第31-33页
        1.5.1 课题背景和意义第31-32页
        1.5.2 主要研究内容第32-33页
第二章 鸭血清转铁蛋白的提取第33-45页
    2.1 材料与方法第34-37页
        2.1.1 化学试剂及仪器第34-35页
        2.1.2 鸭血清样品制备第35页
        2.1.3 热激与硫酸铵沉淀耦合法提取鸭血清转铁蛋白粗品第35-36页
        2.1.4 硫酸铵分级沉淀法提取鸭血清转铁蛋白粗品第36页
        2.1.5 固定化铜离子亲和膜层析柱的制备第36-37页
        2.1.6 固定化铜离子亲和膜层析柱纯化鸭血清转铁蛋白粗品第37页
        2.1.7 鸭血清转铁蛋白活性测定第37页
    2.2 结果与讨论第37-44页
        2.2.1 热激与硫酸铵沉淀耦合法提取鸭血清转铁蛋白粗品的影响因素第37-40页
        2.2.2 硫酸铵分级沉淀提取鸭血清转铁蛋白粗品第40-41页
        2.2.3 亲和膜色谱柱吸附鸭血清转铁蛋白的影响因素第41-43页
        2.2.4 鸭血清转铁蛋白的活性及纯度鉴定第43-44页
    2.3 本章小结第44-45页
第三章 超氧化物歧化酶活性检测方法第45-54页
    3.1 材料与方法第46-48页
        3.1.1 化学试剂及仪器第46页
        3.1.2 主要试剂配制第46页
        3.1.3 联大茴香胺检测SOD活性的正交实验设计第46-47页
        3.1.4 光照时间单因素实验第47页
        3.1.5 核黄素浓度单因素实验第47页
        3.1.6 联大茴香胺盐酸盐浓度单因素实验第47页
        3.1.7 联大茴香胺法测定SOD酶活第47-48页
    3.2 结果及讨论第48-53页
        3.2.1 检测SOD酶活的正交实验结果第48-50页
        3.2.2 光照时间对SOD酶活检测的影响第50页
        3.2.3 核黄素浓度对SOD酶活检测的影响第50-51页
        3.2.4 联大茴香胺盐酸盐浓度对SOD酶活检测的影响第51-52页
        3.2.5 联大茴香胺法检测SOD酶活的工作曲线第52页
        3.2.6 南瓜瓤、南瓜果肉、南瓜籽和大蒜样品的SOD含量第52-53页
    3.3 本章小结第53-54页
第四章 凝胶过滤层析和离子交换层析纯化南瓜瓤超氧化物歧化酶第54-67页
    4.1 方法第54-60页
        4.1.1 化学试剂及仪器第54-55页
        4.1.2 南瓜瓤样品制备第55页
        4.1.3 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量第55-56页
        4.1.4 浸提第56页
        4.1.5 热激第56页
        4.1.6 硫酸铵沉淀第56页
        4.1.7 凝胶过滤层析第56-57页
        4.1.8 阴离子交换层析第57-58页
        4.1.9 变性电泳第58-59页
        4.1.10 非变性电泳第59-60页
    4.2 结果与讨论第60-66页
        4.2.1 考马斯亮蓝法测试蛋白质含量的工作曲线第60-61页
        4.2.2 粗酶液浸提条件优化第61-62页
        4.2.3 热激时间对南瓜瓤SOD纯化的影响第62-63页
        4.2.4 浓缩南瓜瓤SOD的硫酸铵饱和度第63-64页
        4.2.5 凝胶过滤层析纯化南瓜瓤SOD第64页
        4.2.6 阴离子交换层析纯化南瓜瓤SOD第64-66页
    4.3 本章小结第66-67页
第五章 亲和层析纯化南瓜瓤超氧化物歧化酶第67-75页
    5.1 材料与方法第68-70页
        5.1.1 化学试剂及仪器第68页
        5.1.2 硫酸铵沉淀法第68页
        5.1.3 热激与硫酸铵沉淀耦合法第68-69页
        5.1.4 固定化铜离子亲和微晶纤维素的制备第69页
        5.1.5 亲和层析第69-70页
    5.2 结果与讨论第70-74页
        5.2.1 硫酸铵沉淀法去除粗酶液的杂蛋白第70-71页
        5.2.2 热激与硫酸铵沉淀耦合法去除粗酶液的杂蛋白第71-72页
        5.2.3 亲和层析纯化南瓜瓤SOD第72-74页
    5.3 本章小结第74-75页
第六章 南瓜瓤超氧化物歧化酶的性质第75-87页
    6.1 材料与方法第75-78页
        6.1.1 化学试剂及仪器第75页
        6.1.2 南瓜瓤SOD中金属含量测试第75页
        6.1.3 温度对南瓜瓤SOD酶活的影响第75-76页
        6.1.4 pH酸碱性对南瓜瓤SOD酶活的影响第76页
        6.1.5 化学试剂对南瓜瓤SOD酶活的影响第76-77页
        6.1.6 凝胶电泳测试南瓜瓤SOD分子量第77页
        6.1.7 透析第77页
        6.1.8 质谱测试南瓜瓤SOD分子量第77页
        6.1.9 凝胶过滤层析测试南瓜瓤SOD分子量第77-78页
        6.1.10 苔黑酚-硫酸显色实验第78页
    6.2 结果与讨论第78-85页
        6.2.1 南瓜瓤SOD的类别第78-79页
        6.2.2 南瓜瓤SOD的热稳定性第79-80页
        6.2.3 南瓜瓤SOD 的pH稳定性第80页
        6.2.4 南瓜瓤SOD对化学试剂的敏感性第80-81页
        6.2.5 南瓜瓤SOD的分子量第81-85页
        6.2.6 南瓜瓤SOD是糖蛋白第85页
    6.3 本章小结第85-87页
第七章 超氧化物歧化酶模拟酶的合成第87-98页
    7.1 材料与方法第87-90页
        7.1.1 化学试剂及仪器第87页
        7.1.2 槲皮素金属配合物的合成方法第87-88页
        7.1.3 槲皮素铜配合物中铜离子含量的测定第88-89页
        7.1.4 槲皮素锌配合物中锌离子含量的测定第89页
        7.1.5 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的红外检测第89页
        7.1.6 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的紫外检测第89页
        7.1.7 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的SOD活性测试第89-90页
    7.2 结果与讨论第90-96页
        7.2.1 槲皮素铜配合物合成条件优化第90-91页
        7.2.2 槲皮素锌配合物合成条件优化第91-92页
        7.2.3 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的红外分析第92-94页
        7.2.4 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的的紫外分析第94-96页
    7.3 本章小结第96-98页
第八章 全文总结与展望第98-101页
    8.1 全文总结第98-99页
    8.2 研究展望第99-101页
参考文献第101-110页
攻读博士期间发表的论文第110-111页
致谢第111-112页
附件第112页

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