摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第12-33页 |
1.1 金属蛋白 | 第12页 |
1.2 转铁蛋白的应用前景及其制备方法 | 第12-15页 |
1.2.1 转铁蛋白的结构、功能 | 第13-14页 |
1.2.2 转铁蛋白的应用 | 第14页 |
1.2.3 转铁蛋白的制备 | 第14-15页 |
1.3 超氧化物歧化酶的应用前景及其制备方法 | 第15-25页 |
1.3.1 自由基 | 第16-17页 |
1.3.2 超氧化物歧化酶的功能 | 第17页 |
1.3.3 超氧化物歧化酶的分类及分布 | 第17-19页 |
1.3.4 超氧化物歧化酶的应用 | 第19-21页 |
1.3.5 超氧化物歧化酶的制备 | 第21-23页 |
1.3.6 超氧化物歧化酶活性检测方法 | 第23-24页 |
1.3.7 超氧化物歧化酶比活测试方法 | 第24-25页 |
1.3.8 超氧化物歧化酶的性质 | 第25页 |
1.4 超氧化物歧化酶模拟化合物 | 第25-31页 |
1.4.1 槲皮素 | 第26页 |
1.4.2 槲皮素金属配合物 | 第26-31页 |
1.5 研究意义和主要内容 | 第31-33页 |
1.5.1 课题背景和意义 | 第31-32页 |
1.5.2 主要研究内容 | 第32-33页 |
第二章 鸭血清转铁蛋白的提取 | 第33-45页 |
2.1 材料与方法 | 第34-37页 |
2.1.1 化学试剂及仪器 | 第34-35页 |
2.1.2 鸭血清样品制备 | 第35页 |
2.1.3 热激与硫酸铵沉淀耦合法提取鸭血清转铁蛋白粗品 | 第35-36页 |
2.1.4 硫酸铵分级沉淀法提取鸭血清转铁蛋白粗品 | 第36页 |
2.1.5 固定化铜离子亲和膜层析柱的制备 | 第36-37页 |
2.1.6 固定化铜离子亲和膜层析柱纯化鸭血清转铁蛋白粗品 | 第37页 |
2.1.7 鸭血清转铁蛋白活性测定 | 第37页 |
2.2 结果与讨论 | 第37-44页 |
2.2.1 热激与硫酸铵沉淀耦合法提取鸭血清转铁蛋白粗品的影响因素 | 第37-40页 |
2.2.2 硫酸铵分级沉淀提取鸭血清转铁蛋白粗品 | 第40-41页 |
2.2.3 亲和膜色谱柱吸附鸭血清转铁蛋白的影响因素 | 第41-43页 |
2.2.4 鸭血清转铁蛋白的活性及纯度鉴定 | 第43-44页 |
2.3 本章小结 | 第44-45页 |
第三章 超氧化物歧化酶活性检测方法 | 第45-54页 |
3.1 材料与方法 | 第46-48页 |
3.1.1 化学试剂及仪器 | 第46页 |
3.1.2 主要试剂配制 | 第46页 |
3.1.3 联大茴香胺检测SOD活性的正交实验设计 | 第46-47页 |
3.1.4 光照时间单因素实验 | 第47页 |
3.1.5 核黄素浓度单因素实验 | 第47页 |
3.1.6 联大茴香胺盐酸盐浓度单因素实验 | 第47页 |
3.1.7 联大茴香胺法测定SOD酶活 | 第47-48页 |
3.2 结果及讨论 | 第48-53页 |
3.2.1 检测SOD酶活的正交实验结果 | 第48-50页 |
3.2.2 光照时间对SOD酶活检测的影响 | 第50页 |
3.2.3 核黄素浓度对SOD酶活检测的影响 | 第50-51页 |
3.2.4 联大茴香胺盐酸盐浓度对SOD酶活检测的影响 | 第51-52页 |
3.2.5 联大茴香胺法检测SOD酶活的工作曲线 | 第52页 |
3.2.6 南瓜瓤、南瓜果肉、南瓜籽和大蒜样品的SOD含量 | 第52-53页 |
3.3 本章小结 | 第53-54页 |
第四章 凝胶过滤层析和离子交换层析纯化南瓜瓤超氧化物歧化酶 | 第54-67页 |
4.1 方法 | 第54-60页 |
4.1.1 化学试剂及仪器 | 第54-55页 |
4.1.2 南瓜瓤样品制备 | 第55页 |
4.1.3 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第55-56页 |
4.1.4 浸提 | 第56页 |
4.1.5 热激 | 第56页 |
4.1.6 硫酸铵沉淀 | 第56页 |
4.1.7 凝胶过滤层析 | 第56-57页 |
4.1.8 阴离子交换层析 | 第57-58页 |
4.1.9 变性电泳 | 第58-59页 |
4.1.10 非变性电泳 | 第59-60页 |
4.2 结果与讨论 | 第60-66页 |
4.2.1 考马斯亮蓝法测试蛋白质含量的工作曲线 | 第60-61页 |
4.2.2 粗酶液浸提条件优化 | 第61-62页 |
4.2.3 热激时间对南瓜瓤SOD纯化的影响 | 第62-63页 |
4.2.4 浓缩南瓜瓤SOD的硫酸铵饱和度 | 第63-64页 |
4.2.5 凝胶过滤层析纯化南瓜瓤SOD | 第64页 |
4.2.6 阴离子交换层析纯化南瓜瓤SOD | 第64-66页 |
4.3 本章小结 | 第66-67页 |
第五章 亲和层析纯化南瓜瓤超氧化物歧化酶 | 第67-75页 |
5.1 材料与方法 | 第68-70页 |
5.1.1 化学试剂及仪器 | 第68页 |
5.1.2 硫酸铵沉淀法 | 第68页 |
5.1.3 热激与硫酸铵沉淀耦合法 | 第68-69页 |
5.1.4 固定化铜离子亲和微晶纤维素的制备 | 第69页 |
5.1.5 亲和层析 | 第69-70页 |
5.2 结果与讨论 | 第70-74页 |
5.2.1 硫酸铵沉淀法去除粗酶液的杂蛋白 | 第70-71页 |
5.2.2 热激与硫酸铵沉淀耦合法去除粗酶液的杂蛋白 | 第71-72页 |
5.2.3 亲和层析纯化南瓜瓤SOD | 第72-74页 |
5.3 本章小结 | 第74-75页 |
第六章 南瓜瓤超氧化物歧化酶的性质 | 第75-87页 |
6.1 材料与方法 | 第75-78页 |
6.1.1 化学试剂及仪器 | 第75页 |
6.1.2 南瓜瓤SOD中金属含量测试 | 第75页 |
6.1.3 温度对南瓜瓤SOD酶活的影响 | 第75-76页 |
6.1.4 pH酸碱性对南瓜瓤SOD酶活的影响 | 第76页 |
6.1.5 化学试剂对南瓜瓤SOD酶活的影响 | 第76-77页 |
6.1.6 凝胶电泳测试南瓜瓤SOD分子量 | 第77页 |
6.1.7 透析 | 第77页 |
6.1.8 质谱测试南瓜瓤SOD分子量 | 第77页 |
6.1.9 凝胶过滤层析测试南瓜瓤SOD分子量 | 第77-78页 |
6.1.10 苔黑酚-硫酸显色实验 | 第78页 |
6.2 结果与讨论 | 第78-85页 |
6.2.1 南瓜瓤SOD的类别 | 第78-79页 |
6.2.2 南瓜瓤SOD的热稳定性 | 第79-80页 |
6.2.3 南瓜瓤SOD 的pH稳定性 | 第80页 |
6.2.4 南瓜瓤SOD对化学试剂的敏感性 | 第80-81页 |
6.2.5 南瓜瓤SOD的分子量 | 第81-85页 |
6.2.6 南瓜瓤SOD是糖蛋白 | 第85页 |
6.3 本章小结 | 第85-87页 |
第七章 超氧化物歧化酶模拟酶的合成 | 第87-98页 |
7.1 材料与方法 | 第87-90页 |
7.1.1 化学试剂及仪器 | 第87页 |
7.1.2 槲皮素金属配合物的合成方法 | 第87-88页 |
7.1.3 槲皮素铜配合物中铜离子含量的测定 | 第88-89页 |
7.1.4 槲皮素锌配合物中锌离子含量的测定 | 第89页 |
7.1.5 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的红外检测 | 第89页 |
7.1.6 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的紫外检测 | 第89页 |
7.1.7 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的SOD活性测试 | 第89-90页 |
7.2 结果与讨论 | 第90-96页 |
7.2.1 槲皮素铜配合物合成条件优化 | 第90-91页 |
7.2.2 槲皮素锌配合物合成条件优化 | 第91-92页 |
7.2.3 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的红外分析 | 第92-94页 |
7.2.4 槲皮素铜及槲皮素锌配合物的的紫外分析 | 第94-96页 |
7.3 本章小结 | 第96-98页 |
第八章 全文总结与展望 | 第98-101页 |
8.1 全文总结 | 第98-99页 |
8.2 研究展望 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-110页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第110-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
附件 | 第112页 |