基于DDRT-PCR法的籽粒苋在镉胁迫下基因差异表达分析
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1. 绪论 | 第10-19页 |
1.1 研究背景及意义 | 第10-11页 |
1.2 国内外研究现状和发展趋势 | 第11-19页 |
1.2.1 Cd污染的危害 | 第11-13页 |
1.2.2 Cd胁迫机制 | 第13-16页 |
1.2.3 籽粒苋富集重金属的研究 | 第16-18页 |
1.2.4 研究方法 | 第18-19页 |
2. 技术路线 | 第19-20页 |
3. 材料和方法 | 第20-30页 |
3.1 实验材料 | 第20-21页 |
3.1.1 材料的处理 | 第20页 |
3.1.2 实验器材 | 第20页 |
3.1.3 实验试剂盒 | 第20-21页 |
3.1.4 实验试剂 | 第21页 |
3.2 籽粒苋总RNA的提取及完整性检测 | 第21-24页 |
3.2.1 准备工作 | 第21页 |
3.2.2 RNA的提取 | 第21-23页 |
3.2.3 去除基因组污染 | 第23-24页 |
3.3 逆转录RNA合成cDNA的第一条链 | 第24页 |
3.4 cDNA的PCR扩增 | 第24-27页 |
3.4.1 PCR引物的筛选 | 第24-26页 |
3.4.2 PCR条件的优化 | 第26-27页 |
3.5 目的条带的回收 | 第27-28页 |
3.6 目的片段与载体的链接 | 第28-29页 |
3.7 载体的转化 | 第29页 |
3.8 转化子的筛选及检测 | 第29-30页 |
3.9 目的片段的测序与对比分析 | 第30页 |
4. 结果与分析 | 第30-45页 |
4.1 不同材料RNA提取效果 | 第30-31页 |
4.2 不同部位RNA提取效果 | 第31-32页 |
4.3 均匀设计优化PCR条件 | 第32-36页 |
4.3.1 Mix反应体系PCR条件优化 | 第33-35页 |
4.3.2 酶体系均匀设计PCR | 第35-36页 |
4.4 引物组合的筛选 | 第36-39页 |
4.5 测序结果分析 | 第39-45页 |
4.5.1 叶AP1-RP24测序结果分析 | 第39-41页 |
4.5.2 叶AP2-RP24测序结果分析 | 第41-42页 |
4.5.3 根AP1-RP24测序结果分析 | 第42-43页 |
4.5.4 果AP1-RP24测序结果分析 | 第43-45页 |
5. 讨论与结论 | 第45-49页 |
5.1 籽粒苋RNA的提取 | 第45页 |
5.2 PCR体系条件优化 | 第45-47页 |
5.3 相关基因功能分析 | 第47-49页 |
5.4 结论 | 第49页 |
6. 创新点 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56页 |