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猪抗PRRSV相关基因的鉴定及功能分析

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
1 前言第15-34页
   ·猪繁殖与呼吸综合症第15-26页
     ·PRRSV 的分类及理化性质第15-16页
     ·PRRS 的临床症状和病理变化第16-17页
     ·PRRSV 的致病机理第17-18页
     ·PRRSV 的受体第18-19页
     ·猪繁殖与呼吸综合症生物学特征第19-20页
     ·PRRSV 的血清学诊断和分子诊断第20-22页
     ·PRRS 免疫学研究第22-25页
     ·PRRS 的流行病学研究第25-26页
   ·干扰素受体的研究概况第26-29页
     ·I 型干扰素受体第27-28页
     ·II 型干扰素受体第28-29页
   ·基因芯片技术及其应用第29-31页
     ·基因芯片的定义第29页
     ·基因芯片工作原理第29-30页
     ·基因芯片数据的基因注释和功能分析第30-31页
   ·猪对PRRSV 抗性差异的研究进展第31-32页
   ·本研究的目的意义第32-34页
2 材料与方法第34-58页
   ·试验材料第34-37页
     ·仔猪及攻毒场所第34页
     ·试验动物及样品采集第34页
     ·毒株第34页
     ·菌株和载体第34页
     ·主要仪器第34-35页
     ·主要试剂及来第35-36页
     ·Affymetrix 基因芯片第36页
     ·主要数据库及生物软件第36-37页
   ·试验方法第37-57页
     ·常用试剂的配制第37-38页
     ·猪组织中DNA 的提取第38-39页
     ·猪组织总RNA 的提取第39-40页
     ·反转录获得cDNA第40页
     ·克隆和测序第40-42页
     ·实时荧光定量PCR(real –time PCR)第42页
     ·猪对PRRSV 感染的生物学反应第42-48页
     ·感染PRRSV 后猪肺组织基因表达谱的对比分析第48-51页
     ·猪IFNGR1 基因cDNA 序列的克隆及mRNA 表达特征第51-56页
     ·猪IFNAR2 基因的克隆及mRNA 表达特征第56-57页
   ·统计分析第57-58页
3 结果与分析第58-95页
   ·猪对PRRSV 感染的生物学反应的比较第58-70页
     ·杜-大-长商品猪感染PRRSV 后的临床症状、体温、体重及解剖病理变化第58-60页
     ·大蒲莲猪感染PRRSV 后的临床症状、体温、体重及解剖病理变化第60-62页
     ·PRRSV 对细胞因子和免疫球蛋白IGG 蛋白质水平的影响第62-65页
     ·PRRSV 对CD4+ 、CD8+ T 淋巴细胞及CD4+/CD8+比值的影响第65-68页
     ·血细胞计数分析结果第68页
     ·血清中PRRSV 的RT-PCR 检测结果第68-69页
     ·血清中PRRSV 的绝对REAL - TIME PCR 检测第69-70页
   ·大蒲莲猪与杜-大-长商品猪肺脏差异表达基因的筛选第70-80页
     ·RNA 的质量鉴定第70-71页
     ·芯片数据分析第71-80页
   ·猪IFNGR1 基因的克隆及MRNA 表达特征第80-88页
     ·IFNGR1 基因cDNA 的克隆第80-81页
     ·序列同源性与系统发育分析第81-83页
     ·可变剪接和猪IFNGR1 基因的mRNA 组织表达谱第83-85页
     ·莱芜猪、杜洛克猪不同组织IFNGR1 基因mRNA 表达水平的分析第85-86页
     ·PRRSV 感染对猪IFNGR1 基因mRNA 表达的影响第86-88页
   ·猪IFNAR2 基因的克隆及MRNA 表达特征第88-95页
     ·猪IFNAR2 基因CDNA 的克隆第88-89页
     ·序列同源性与系统发育分析第89-91页
     ·猪IFNAR2 基因的mRNA 组织表达谱分析第91-92页
     ·莱芜猪、杜洛克猪不同组织IFNAR2 基因mRNA 表达水平的分析第92-93页
     ·PRRSV 感染对猪IFNAR2 基因mRNA 表达的影响第93-95页
4 讨论第95-99页
   ·不同品种的猪对PRRSV 的反应存在差异第95-96页
   ·猪对PRRSV 抗性差异的可能机制第96页
   ·差异基因的筛选及GO 分析第96页
   ·差异表达基因的验证及分析第96-97页
   ·猪IFNGR1 基因表达特征及PRRSV 对其表达的影响第97-98页
   ·IFNAR2 基因MRNA 表达规律及PRRSV 对其表达的影响第98-99页
5 结论第99-100页
6 参考文献第100-114页
7 附录第114-121页
8 致谢第121-122页
9 攻读学位期间发表的学术论文第122-123页
博士学位论文内容简介及自评第123页

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