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玉米籽粒发育基因UBL1的克隆与功能分析

摘要第4-5页
Abstract第5页
缩略词第9-10页
第一章 文献综述第10-27页
    1.1 玉米籽粒发育的研究进展第10-16页
        1.1.1 玉米籽粒发育进程的研究第10-13页
        1.1.2 玉米籽粒发育基因的克隆第13-16页
    1.2 真核生物内含子的相关研究第16-21页
        1.2.1 真核生物pre-mRNA内含子的特点第16-19页
        1.2.2 真核生物内含子滞留的研究第19-21页
    1.3 玉米Mutator转座子在玉米研究中的应用第21-26页
        1.3.1 Mutator转座子的分类第22-23页
        1.3.2 玉米Mutator转座子的应用第23-26页
    1.4 本研究的目的和意义第26-27页
第二章 材料与方法第27-43页
    2.1 实验材料第27-28页
        2.1.1 植物材料第27页
        2.1.2 常用菌株及载体第27页
        2.1.3 主要仪器设备第27-28页
        2.1.4 各种酶及试剂第28页
    2.2 常用试剂及培养基的配制第28-29页
        2.2.1 常用试剂的配制第28-29页
        2.2.2 常用培养基配制第29页
    2.3 实验方法第29-38页
        2.3.1 基因组DNA提取(CTAB法)第29-30页
        2.3.2 植物总RNA提取第30页
        2.3.3 普通PCR扩增第30-31页
        2.3.4 cDNA合成第31页
        2.3.5 Quantitative Polymerase Chain Reaction(qPCR)第31-32页
        2.3.6 玉米籽粒石蜡切片制作第32页
        2.3.7 玉米籽粒超薄切片制作第32-33页
        2.3.8 玉米转化载体的构建第33页
        2.3.9 拟南芥转化载体的构建第33页
        2.3.10 农杆菌转化拟南芥方法第33页
        2.3.11 基因枪介导的洋葱表皮细胞瞬时表达第33-34页
        2.3.12 农杆菌注射烟草叶片第34页
        2.3.13 玉米UBL1蛋白的原核表达与纯化第34-35页
        2.3.14 玉米UBL1酶活性检测方法第35-36页
        2.3.15 CR-RT-PCR(Circularized RNA RT-PCR)检测U6末端的方法第36-38页
        2.3.16 内含子滞留分析方法第38页
    2.4 实验相关引物第38-43页
第三章 结果与分析第43-66页
    3.1 ubl1突变体的获得及表型分析第43-48页
        3.1.1 ubl1突变体的获得第43页
        3.1.2 ubl1突变体的表型分析第43-44页
        3.1.3 ubl1突变在不同背景下的遗传效应第44-46页
        3.1.4 ubl1突变体的组织和细胞学研究第46-48页
    3.2 UBL1基因的克隆第48-55页
        3.2.1 候选基因UBL1的命名第48-49页
        3.2.2 等位突变体的筛选第49-50页
        3.2.3 转基因互补分析第50-53页
        3.2.4 UBL1基因在玉米和拟南芥中的功能是保守的第53-55页
    3.3 UBL1基因的表达模式及亚细胞定位第55-57页
        3.3.1 UBL1基因的表达模式第55-56页
        3.3.2 UBL1蛋白的亚细胞定位第56-57页
    3.4 UBL1编码一个RNA外切酶第57-62页
        3.4.1 UBL1蛋白的结构特点第57-59页
        3.4.2 UBL1基因编码一个RNA外切酶第59-60页
        3.4.3 UBL1对不同底物的作用第60-61页
        3.4.4 H-X-T/S-X结构域的破坏导致UBL1功能的丧失第61-62页
    3.5 ubl1突变体中U6含量以及3’端的序列组成的分析第62-64页
    3.6 ubl1突变体中内含子滞留相关分析第64-66页
        3.6.1 ubl1突变体中内含子滞留水平分析第64-65页
        3.6.2 滞留基因的GO分析第65-66页
第四章 讨论与结论第66-70页
    4.1 讨论第66-69页
        4.1.1 基部胚乳转移层对玉米籽粒发育的重要性第66页
        4.1.2 UBL1的结构和功能在植物、人类、酵母中的功能是保守的第66-67页
        4.1.3 UBL1的结构和功能的特殊性第67页
        4.1.4 内含子滞留与发育第67-68页
        4.1.5 UBL1的调控机制的探究第68-69页
    4.2 结论第69-70页
参考文献第70-79页
致谢第79-80页
作者简历第80页

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