摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
缩略词 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-27页 |
1.1 玉米籽粒发育的研究进展 | 第10-16页 |
1.1.1 玉米籽粒发育进程的研究 | 第10-13页 |
1.1.2 玉米籽粒发育基因的克隆 | 第13-16页 |
1.2 真核生物内含子的相关研究 | 第16-21页 |
1.2.1 真核生物pre-mRNA内含子的特点 | 第16-19页 |
1.2.2 真核生物内含子滞留的研究 | 第19-21页 |
1.3 玉米Mutator转座子在玉米研究中的应用 | 第21-26页 |
1.3.1 Mutator转座子的分类 | 第22-23页 |
1.3.2 玉米Mutator转座子的应用 | 第23-26页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-43页 |
2.1 实验材料 | 第27-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 常用菌株及载体 | 第27页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第27-28页 |
2.1.4 各种酶及试剂 | 第28页 |
2.2 常用试剂及培养基的配制 | 第28-29页 |
2.2.1 常用试剂的配制 | 第28-29页 |
2.2.2 常用培养基配制 | 第29页 |
2.3 实验方法 | 第29-38页 |
2.3.1 基因组DNA提取(CTAB法) | 第29-30页 |
2.3.2 植物总RNA提取 | 第30页 |
2.3.3 普通PCR扩增 | 第30-31页 |
2.3.4 cDNA合成 | 第31页 |
2.3.5 Quantitative Polymerase Chain Reaction(qPCR) | 第31-32页 |
2.3.6 玉米籽粒石蜡切片制作 | 第32页 |
2.3.7 玉米籽粒超薄切片制作 | 第32-33页 |
2.3.8 玉米转化载体的构建 | 第33页 |
2.3.9 拟南芥转化载体的构建 | 第33页 |
2.3.10 农杆菌转化拟南芥方法 | 第33页 |
2.3.11 基因枪介导的洋葱表皮细胞瞬时表达 | 第33-34页 |
2.3.12 农杆菌注射烟草叶片 | 第34页 |
2.3.13 玉米UBL1蛋白的原核表达与纯化 | 第34-35页 |
2.3.14 玉米UBL1酶活性检测方法 | 第35-36页 |
2.3.15 CR-RT-PCR(Circularized RNA RT-PCR)检测U6末端的方法 | 第36-38页 |
2.3.16 内含子滞留分析方法 | 第38页 |
2.4 实验相关引物 | 第38-43页 |
第三章 结果与分析 | 第43-66页 |
3.1 ubl1突变体的获得及表型分析 | 第43-48页 |
3.1.1 ubl1突变体的获得 | 第43页 |
3.1.2 ubl1突变体的表型分析 | 第43-44页 |
3.1.3 ubl1突变在不同背景下的遗传效应 | 第44-46页 |
3.1.4 ubl1突变体的组织和细胞学研究 | 第46-48页 |
3.2 UBL1基因的克隆 | 第48-55页 |
3.2.1 候选基因UBL1的命名 | 第48-49页 |
3.2.2 等位突变体的筛选 | 第49-50页 |
3.2.3 转基因互补分析 | 第50-53页 |
3.2.4 UBL1基因在玉米和拟南芥中的功能是保守的 | 第53-55页 |
3.3 UBL1基因的表达模式及亚细胞定位 | 第55-57页 |
3.3.1 UBL1基因的表达模式 | 第55-56页 |
3.3.2 UBL1蛋白的亚细胞定位 | 第56-57页 |
3.4 UBL1编码一个RNA外切酶 | 第57-62页 |
3.4.1 UBL1蛋白的结构特点 | 第57-59页 |
3.4.2 UBL1基因编码一个RNA外切酶 | 第59-60页 |
3.4.3 UBL1对不同底物的作用 | 第60-61页 |
3.4.4 H-X-T/S-X结构域的破坏导致UBL1功能的丧失 | 第61-62页 |
3.5 ubl1突变体中U6含量以及3’端的序列组成的分析 | 第62-64页 |
3.6 ubl1突变体中内含子滞留相关分析 | 第64-66页 |
3.6.1 ubl1突变体中内含子滞留水平分析 | 第64-65页 |
3.6.2 滞留基因的GO分析 | 第65-66页 |
第四章 讨论与结论 | 第66-70页 |
4.1 讨论 | 第66-69页 |
4.1.1 基部胚乳转移层对玉米籽粒发育的重要性 | 第66页 |
4.1.2 UBL1的结构和功能在植物、人类、酵母中的功能是保守的 | 第66-67页 |
4.1.3 UBL1的结构和功能的特殊性 | 第67页 |
4.1.4 内含子滞留与发育 | 第67-68页 |
4.1.5 UBL1的调控机制的探究 | 第68-69页 |
4.2 结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
作者简历 | 第80页 |