| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-37页 |
| 1.1 我国海产蟹类养殖现状 | 第15页 |
| 1.2 海产蟹类养殖病害及病原 | 第15页 |
| 1.3 我国近海新兴寄生性病原-血卵涡鞭虫 | 第15-19页 |
| 1.4 甲壳动物免疫防御系统 | 第19-20页 |
| 1.5 细胞免疫 | 第20-21页 |
| 1.5.1 吞噬作用 | 第21页 |
| 1.5.2 包裹和结节反应 | 第21页 |
| 1.6 体液免疫 | 第21-29页 |
| 1.6.1 酚氧化酶原激活途径 | 第22-23页 |
| 1.6.2 抗菌肽 | 第23-25页 |
| 1.6.3 Toll/Dif信号传导途径 | 第25-26页 |
| 1.6.4 IMD/Relish信号传导途径 | 第26-27页 |
| 1.6.5 JAK/STAT途径 | 第27-28页 |
| 1.6.6 丝氨酸蛋白酶级联反应 | 第28-29页 |
| 1.7 NO/O_2~(·?)合成系统及其免疫作用 | 第29-33页 |
| 1.8 抗氧化酶系统与免疫系统的关系 | 第33-34页 |
| 1.9 本论文的研究目标、内容及意义 | 第34-37页 |
| 第二章 三疣梭子蟹Toll受体基因的全长cDNA克隆和表达分析 | 第37-71页 |
| 2.1 前言 | 第37-38页 |
| 2.2 实验材料与试剂 | 第38-39页 |
| 2.2.1 主要实验仪器 | 第38-39页 |
| 2.2.2 主要实验试剂 | 第39页 |
| 2.2.3 其它所需实验试剂及配置方法 | 第39页 |
| 2.2.4 实验动物 | 第39页 |
| 2.3 实验方法 | 第39-54页 |
| 2.3.1 分离获得血卵涡鞭虫 | 第39-40页 |
| 2.3.2 实验设计与组织取样 | 第40-41页 |
| 2.3.3 血卵涡鞭虫侵染后宿主感染状态分析 | 第41页 |
| 2.3.4 提取Total RNA | 第41-42页 |
| 2.3.5 Toll基因全长cDNA序列的克隆 | 第42-51页 |
| 2.3.6 序列及生物信息学分析 | 第51-53页 |
| 2.3.7 实时定量PCR引物的设计与合成 | 第53页 |
| 2.3.8 实时定量PCR | 第53页 |
| 2.3.9 Toll基因的组织表达分析 | 第53页 |
| 2.3.10 血卵涡鞭虫侵染后Toll基因的时序表达分析 | 第53-54页 |
| 2.3.11 数据分析 | 第54页 |
| 2.4 结果与分析 | 第54-67页 |
| 2.4.1 Total RNA的质量检测 | 第54页 |
| 2.4.2 Toll序列的生物信息学分析 | 第54-58页 |
| 2.4.3 序列比对和系统发育分析 | 第58-62页 |
| 2.4.4 Toll基因的组织表达分析 | 第62页 |
| 2.4.5 血卵涡鞭虫侵染后宿主感染状态 | 第62-65页 |
| 2.4.6 血卵涡鞭虫侵染后Toll基因的转录表达变化 | 第65-67页 |
| 2.5 讨论 | 第67-69页 |
| 2.6 小结 | 第69-71页 |
| 第三章 酚氧化酶原系统对血卵涡鞭虫的响应过程 | 第71-83页 |
| 3.1 前言 | 第71页 |
| 3.2 实验材料和试剂 | 第71-72页 |
| 3.2.1 主要实验仪器 | 第71-72页 |
| 3.2.2 主要实验试剂 | 第72页 |
| 3.2.3 实验动物 | 第72页 |
| 3.3 实验方法 | 第72-74页 |
| 3.3.1 实验设计及组织取样 | 第72页 |
| 3.3.2 提取Total RNA | 第72页 |
| 3.3.3 反转录cDNA模板 | 第72-73页 |
| 3.3.4 实时定量PCR引物 | 第73页 |
| 3.3.5 目的基因LGBP、PPAF和pro PO转录表达分析 | 第73页 |
| 3.3.6 酚氧化酶活力测定 | 第73-74页 |
| 3.3.7 血细胞数目DHCs和THCs计数 | 第74页 |
| 3.3.8 肝胰腺组织病理分析 | 第74页 |
| 3.3.9 数据分析 | 第74页 |
| 3.4 结果与分析 | 第74-80页 |
| 3.4.1 血卵涡鞭虫侵染后LGBP、PPAF和pro PO的转录表达分析 | 第74-76页 |
| 3.4.2 血卵涡鞭虫侵染后酚氧化酶活力分析 | 第76-78页 |
| 3.4.3 血细胞DHCs和THCs数目变化 | 第78-79页 |
| 3.4.4 肝胰腺组织病理学变化 | 第79-80页 |
| 3.5 讨论 | 第80-82页 |
| 3.6 小结 | 第82-83页 |
| 第四章 丝氨酸蛋白酶PTc SPs及蛋白酶抑制剂基因 α2m、serpin对血卵涡鞭虫的响应 | 第83-93页 |
| 4.1 前言 | 第83-84页 |
| 4.2 实验材料和试剂 | 第84页 |
| 4.2.1 主要实验仪器 | 第84页 |
| 4.2.2 主要实验试剂 | 第84页 |
| 4.2.3 实验动物及组织取样 | 第84页 |
| 4.3 实验方法 | 第84-86页 |
| 4.3.1 实验设计和组织取样 | 第84-85页 |
| 4.3.2 提取Total RNA | 第85页 |
| 4.3.3 反转录合成第一链cDNA | 第85页 |
| 4.3.4 实时定量PCR引物 | 第85-86页 |
| 4.3.5 实时定量PCR | 第86页 |
| 4.3.6 血卵涡鞭虫侵染后PTc SP1-3、α2m和serpin的转录表达分析 | 第86页 |
| 4.3.7 数据分析 | 第86页 |
| 4.4 结果与分析 | 第86-90页 |
| 4.4.1 血卵涡鞭虫侵染后PTc SP1-3、α2m和serpin在血细胞组织中的表达分析 | 第86-88页 |
| 4.4.2 血卵涡鞭虫侵染后PTc SP1-3、α2m和serpin在肝胰腺组织中的表达分析 | 第88-90页 |
| 4.5 讨论 | 第90-92页 |
| 4.6 小结 | 第92-93页 |
| 第五章 自由基NO/O_2~(·?)合成系统和抗氧化系统对血卵涡鞭虫的响应 | 第93-124页 |
| 5.1 前言 | 第93-94页 |
| 5.2 实验材料和试剂 | 第94-95页 |
| 5.2.1 主要实验仪器 | 第94页 |
| 5.2.2 主要实验试剂 | 第94页 |
| 5.2.3 实验动物 | 第94-95页 |
| 5.3 实验方法 | 第95-105页 |
| 5.3.1 实验设计和组织取样 | 第95页 |
| 5.3.2 提取Total RNA | 第95页 |
| 5.3.3 NOS基因全长cDNA序列克隆 | 第95-102页 |
| 5.3.4 序列比对及生物信息学分析 | 第102-104页 |
| 5.3.5 实时定量PCR引物 | 第104页 |
| 5.3.6 实时定量PCR | 第104页 |
| 5.3.7 目的基因NOS、NOX和GPx的组织表达分析 | 第104页 |
| 5.3.8 血卵涡鞭虫侵染后NOS、NOX、Cu Zn SOD、CAT和GPx的转录表达分析 | 第104页 |
| 5.3.9 血卵涡鞭虫侵染后NOS、NOX、SOD、CAT和GPx的酶活力分析 | 第104-105页 |
| 5.3.10 数据分析 | 第105页 |
| 5.4 结果与分析 | 第105-120页 |
| 5.4.1 Total RNA的质量检测 | 第105页 |
| 5.4.2 目的基因NOS、NOX和GPx的序列克隆分析 | 第105-109页 |
| 5.4.3 序列比对及系统发育分析 | 第109-111页 |
| 5.4.4 目的基因NOS、NOX和GPx的组织表达结果 | 第111-112页 |
| 5.4.5 血卵涡鞭虫侵染后NOS、NOX、Cu Zn SOD、CAT和GPx转录表达变化 | 第112-116页 |
| 5.4.6 血卵涡鞭虫侵染后NOS、NOX、SOD、CAT和GPx的酶活力变化 | 第116-120页 |
| 5.5 讨论 | 第120-123页 |
| 5.6 小结 | 第123-124页 |
| 第六章 结论 | 第124-125页 |
| 参考文献 | 第125-142页 |
| 附录 | 第142-146页 |
| 作者简介 | 第146-147页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第147-148页 |
| 缩略词 | 第148页 |
