摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第15-24页 |
1.1 控制植物生长发育的相关基因 | 第15-16页 |
1.2 独脚金内酯激素调控分枝发育 | 第16-22页 |
1.2.1 独脚金内酯介绍 | 第16-17页 |
1.2.2 独脚金内酯的合成 | 第17-18页 |
1.2.3 独脚金内酯作用 | 第18-20页 |
1.2.4 独脚金内酯与其他植物激素对腋芽的影响 | 第20-22页 |
1.3 本实验的目的意义、主要内容及技术路线 | 第22-24页 |
1.3.1 目的意义 | 第22-23页 |
1.3.2 技术路线 | 第23-24页 |
第二章 烟草中NtMAX3和NtMAX4基因的RACE克隆 | 第24-46页 |
2.1 材料 | 第24页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 试剂及仪器 | 第24页 |
2.1.3 培养基 | 第24页 |
2.2 RNA提取与处理 | 第24-26页 |
2.2.1 提取烟草组织RNA | 第24-25页 |
2.2.2 反转录 | 第25-26页 |
2.3 RACE克隆NtMAX3和NtMAX4基因的准备 | 第26-28页 |
2.3.1 RACE-Ready cDNA的准备 | 第26-27页 |
2.3.2 NtMAX3、NtMAX4基因中间片段扩增 | 第27-28页 |
2.4 NtMAX3基因 3’-RACE和 5’-RACE的扩增 | 第28-30页 |
2.4.1 NtMAX3基因 3’-RACE扩增 | 第28-29页 |
2.4.2 NtMAX3基因 5’-RACE扩增 | 第29-30页 |
2.5 NtMAX4基因 3’-RACE和 5’-RACE的扩增 | 第30-31页 |
2.6 结果分析 | 第31-40页 |
2.6.1 NtMAX3基因的结果分析 | 第31-35页 |
2.6.2 NtMAX4基因的结果分析 | 第35-40页 |
2.7 TCP家族内BRC基因的分析 | 第40-45页 |
2.7.1 BRC基因的鉴定 | 第41页 |
2.7.2 不同物种内BRC基因的分析 | 第41-45页 |
2.8 讨论 | 第45-46页 |
第三章 NtMAX3和NtMAX4基因的RNA干扰 | 第46-63页 |
3.1 主要药品和试剂 | 第46-47页 |
3.1.1 试剂 | 第46页 |
3.1.2 培养基 | 第46-47页 |
3.2 NtMAX3和NtMAX4 基因RNAi载体的构建 | 第47-50页 |
3.2.1 NtMAX3、NtMAX4基因RNA干扰片段的扩增 | 第47-48页 |
3.2.2 构建NtMAX3及NtMAX4 RNA干扰的入门载体 | 第48-49页 |
3.2.3 构建NtMAX3及NtMAX4 RNA干扰表达载体 | 第49-50页 |
3.2.4 NtMAX3及NtMAX4 RNA干扰表达载体的酶切验证 | 第50页 |
3.3 RNA干扰表达载体的转化烟草 | 第50-51页 |
3.3.1 电击法转化农杆菌 | 第50-51页 |
3.3.2 农杆菌介导烟草遗传转化 | 第51页 |
3.4 RNA干扰植株表达量的分析 | 第51-52页 |
3.4.1 引物设计 | 第52页 |
3.4.2 荧光定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第52页 |
3.5 结果与分析 | 第52-62页 |
3.5.1 验证NtMAX3 RNA干扰入门载体及表达载体 | 第52-55页 |
3.5.2 验证NtMAX4 RNA干扰入门载体及表达载体 | 第55页 |
3.5.3 转基因烟草阳性检测 | 第55-57页 |
3.5.4 荧光定量结果分析 | 第57-58页 |
3.5.5 RNA干扰植株表型调查 | 第58-62页 |
3.6 结论 | 第62-63页 |
第四章 全文结论与展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简历 | 第70页 |