| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 miRNAs的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 miRNA的发现及命名 | 第11页 |
| 1.1.2 miRNA的生物合成过程 | 第11-12页 |
| 1.1.3 miRNA的生物学特征及功能 | 第12页 |
| 1.1.4 miRNA的检测技术 | 第12-13页 |
| 1.2 miRNA的靶基因的寻找及验证 | 第13-15页 |
| 1.2.1 miRNA的靶基因的生物信息学预测 | 第13-14页 |
| 1.2.2 靶基因的验证 | 第14-15页 |
| 1.3 miR142 3p研究进展 | 第15页 |
| 1.4 基因PTPN11的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.5 miRNA对肿瘤的调控 | 第17-18页 |
| 1.6 研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.2 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.3 实验试剂 | 第20页 |
| 2.4 试剂配制 | 第20-21页 |
| 2.5 实验方法与步骤 | 第21-30页 |
| 2.5.1 miR1423p靶基因的筛选 | 第21-22页 |
| 2.5.2 乳腺上皮细胞的培养 | 第22页 |
| 2.5.3 过表达miR1423p对乳腺上皮细胞MCF-10A的影响 | 第22-27页 |
| 2.5.4 抑制miR1423p对乳腺上皮细胞的作用 | 第27-28页 |
| 2.5.5 过表达miR1423p在PTP N11沉寂后对乳腺上皮细胞MCF-10A的影响 | 第28-29页 |
| 2.5.6 数据处理 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-43页 |
| 3.1 靶基因的筛选 | 第30-32页 |
| 3.1.1 RNA- 蛋白免疫共沉淀结果分析 | 第30-32页 |
| 3.1.2 miR1423p与PTP N11的作用位点 | 第32页 |
| 3.2 miR142 3p基因过表达对乳腺上皮细胞MCF-10A的影响 | 第32-36页 |
| 3.2.1 活细胞RNA纳米检测技术检测miR1423p表达 | 第32-33页 |
| 3.2.2 miR1423p mimics对乳腺上皮细胞PTP N11基因表达的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.3 miR1423p mimics对乳腺上皮细胞PTP N11基因及增殖的相关通路蛋白的影响 | 第34-35页 |
| 3.2.4 免疫组化 | 第35页 |
| 3.2.5 miR1423p mim ics对乳腺上皮细胞增殖能力的影响 | 第35-36页 |
| 3.3 miR142 3p基因沉寂对乳腺上皮细胞MCF-10A的影响 | 第36-40页 |
| 3.3.1 活细胞RNA纳米检测技术检测miR1423p沉寂后miR1423p表达 | 第36-37页 |
| 3.3.2 miR1423p inhibitor对乳腺上皮细胞PTP N11基因表达的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.3 miR-142-3pinhibitor对乳腺上皮细胞PTPN11基因及增殖的相关通路蛋白的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.4 免疫组化 | 第39页 |
| 3.3.5 miR-142-3pinhibitor对乳腺上皮细胞增殖能力的影响 | 第39-40页 |
| 3.4 PTPN11沉寂后对乳腺上皮细胞的影响 | 第40-43页 |
| 3.4.1 PTPN11干扰片段的选择 | 第40-41页 |
| 3.4.2 荧光定量P CR检测PTP N11 mRNA表达 | 第41-42页 |
| 3.4.3 检验PTPN11基因抑制后蛋白的表达变化 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 miR142 3p检测及靶基因筛选及验证 | 第43-44页 |
| 4.1.1 miR1423p靶基因的筛选 | 第43页 |
| 4.1.2 miR1423p基因的检测 | 第43-44页 |
| 4.2 miR142 3p对乳腺上皮细胞增殖及相关信号通路蛋白的影响 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
