| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第14-35页 |
| 1.1 生物传感器 | 第14-15页 |
| 1.2 纳米材料在生物传感器中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 病毒纳米结构在生物传感器中的应用 | 第16-22页 |
| 1.3.1 病毒纳米结构 | 第16-17页 |
| 1.3.2 病毒纳米样结构在生物传感器中的应用 | 第17-22页 |
| 1.3.3 小结 | 第22页 |
| 1.4 朊蛋白及朊蛋白病 | 第22-25页 |
| 1.5 酵母朊蛋白 | 第25-28页 |
| 1.5.1 酵母朊蛋白的发现 | 第25页 |
| 1.5.2 Sup35和Ure2蛋白结构特点和生物功能 | 第25-26页 |
| 1.5.3 酵母朊蛋白自组装特性 | 第26-28页 |
| 1.6 朊蛋白的应用研究 | 第28-34页 |
| 1.6.1 朊蛋白淀粉样纤维作为纳米骨架固定酶分子 | 第29页 |
| 1.6.2 朊蛋白淀粉样纤维作为纳米骨架在生物传感中的应用 | 第29-31页 |
| 1.6.3 淀粉样纤维为模板制备新型纳米材料 | 第31页 |
| 1.6.4 以淀粉样纤维制备微凝胶 | 第31-33页 |
| 1.6.5 淀粉样纤维介导逆转录病毒的转染 | 第33-34页 |
| 1.7 展望 | 第34页 |
| 1.8 本研究的主要目标及研究内容 | 第34-35页 |
| 第2章 基于多功能蛋白纳米线的3D免疫检测的研究 | 第35-65页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-41页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第37-38页 |
| 2.1.2 PCR引物 | 第38页 |
| 2.1.3 试剂 | 第38页 |
| 2.1.4 培养基和溶液配方 | 第38-41页 |
| 2.2 实验主要仪器 | 第41页 |
| 2.3 实验方法 | 第41-52页 |
| 2.3.1 大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第41-42页 |
| 2.3.2 融合蛋白Sup35-GFP-p24表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 2.3.3 大肠杆菌转化 | 第43页 |
| 2.3.4 重组质粒的筛选和鉴定 | 第43页 |
| 2.3.5 菌种保藏 | 第43-44页 |
| 2.3.6 Sup35-GFP-p24-BAP表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 2.3.7 共表达菌株的构建 | 第45页 |
| 2.3.8 融合蛋白的诱导和表达 | 第45-46页 |
| 2.3.9 融合蛋白的纯化 | 第46页 |
| 2.3.10 p24蛋白的纯化 | 第46-47页 |
| 2.3.11 融合蛋白的SDS-PAGE分析、更换缓冲液和浓度测定 | 第47-48页 |
| 2.3.12 p24抗原的家兔多克隆抗体的制备 | 第48页 |
| 2.3.13 融合蛋白的免疫分析和生物素分析 | 第48-49页 |
| 2.3.14 融合蛋白体外自组装及表征 | 第49页 |
| 2.3.15 蛋白纳米线"种子"的制备 | 第49-50页 |
| 2.3.16 磁颗粒诱导蛋白自组装及分析纳米线生长 | 第50页 |
| 2.3.17 磁珠-蛋白纳米线复合物介导的免疫分析检测p24抗体 | 第50-51页 |
| 2.3.18 磁珠-蛋白纳米线复合物介导的免疫分析检测p24抗原 | 第51-52页 |
| 2.4 结果与分析 | 第52-63页 |
| 2.4.1 Sup35-GFP-p24表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 2.4.2 Sup35-GFP-p24-BAP的表达载体构建 | 第53-56页 |
| 2.4.3 融合蛋白的表达纯化 | 第56-57页 |
| 2.4.4 融合蛋白的免疫分析和生物素分析 | 第57-58页 |
| 2.4.5 融合蛋白体外自组装的透射电镜分析 | 第58-59页 |
| 2.4.6 生物素化的种子的制备 | 第59页 |
| 2.4.7 蛋白纳米线在磁珠上原位生长 | 第59-60页 |
| 2.4.8 磁珠-蛋白纳米线复合物介导的免疫分析 | 第60-63页 |
| 2.5 讨论 | 第63-65页 |
| 第3章 荧光蛋白纳米线条形码的制备 | 第65-78页 |
| 3.1 实验材料 | 第66-67页 |
| 3.1.1 质粒及菌体 | 第66-67页 |
| 3.1.2 引物 | 第67页 |
| 3.1.3 试剂与材料 | 第67页 |
| 3.1.4 培养基与溶液 | 第67页 |
| 3.2 仪器 | 第67页 |
| 3.3 实验方法 | 第67-70页 |
| 3.3.1 Sup35-mKate的构建 | 第67-68页 |
| 3.3.2 Sup35-mKate的表达纯化 | 第68-69页 |
| 3.3.3 Sup35-mKate的体外自组装和电镜表征 | 第69页 |
| 3.3.4 融合蛋白的荧光性质表征 | 第69页 |
| 3.3.5 荧光蛋白纳米线的荧光性质表征 | 第69页 |
| 3.3.6 荧光蛋白纳米线在磁珠上的生长曲线 | 第69页 |
| 3.3.7 磁珠制备荧光蛋白barcode纳米线 | 第69-70页 |
| 3.4 结果与分析 | 第70-76页 |
| 3.4.1 融合蛋白Sup35-mKate表达载体的构建 | 第70-72页 |
| 3.4.2 融合蛋白Sup35-mKate的表达和纯化 | 第72页 |
| 3.4.3 融合蛋白的体外自组装及表征 | 第72-73页 |
| 3.4.4 融合蛋白荧光光谱学的特性 | 第73-74页 |
| 3.4.5 荧光蛋白纳米线在磁珠上的长度控制 | 第74-75页 |
| 3.4.6 绿-红-绿条形码纳米线的制备 | 第75-76页 |
| 3.5 讨论 | 第76-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
