| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-15页 |
| 1.1 紫球藻的生物学研究概述 | 第10页 |
| 1.2 重金属胁迫对藻类光合特性的影响 | 第10-11页 |
| 1.3 植物螯合肽合成酶的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.3.1 植物螯合肽和植物螯合肽合成酶概述 | 第11-12页 |
| 1.3.2 植物螯合肽合成酶的催化机制 | 第12-14页 |
| 1.4 本实验的内容及意义 | 第14-15页 |
| 2 Cd~(2+)胁迫对紫球藻生长及叶绿素荧光特性的影响 | 第15-23页 |
| 2.1 材料培养 | 第15页 |
| 2.2 仪器设备及试剂配制 | 第15页 |
| 2.2.1 仪器设备 | 第15页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第15页 |
| 2.3 实验方法 | 第15-17页 |
| 2.3.1 紫球藻生长曲线的测定 | 第15-16页 |
| 2.3.2 Cd~(2+)胁迫对紫球藻叶绿素荧光特性的影响 | 第16页 |
| 2.3.3 Cd~(2+)胁迫对紫球藻藻红蛋白含量的影响 | 第16页 |
| 2.3.4 Cd~(2+)胁迫对紫球藻ATP含量的影响 | 第16-17页 |
| 2.4 实验结果 | 第17-20页 |
| 2.4.1 紫球藻生长曲线 | 第17页 |
| 2.4.2 Cd~(2+)胁迫处理后紫球藻叶绿素荧光特性实验结果 | 第17-19页 |
| 2.4.3 Cd~(2+)胁迫处理后紫球藻藻红蛋白含量的测定结果 | 第19页 |
| 2.4.4 Cd~(2+)胁迫处理后紫球藻ATP含量测定结果 | 第19-20页 |
| 2.5 讨论 | 第20-23页 |
| 3 紫球藻PCS基因的克隆 | 第23-33页 |
| 3.1 材料培养 | 第23页 |
| 3.2 仪器设备及药品 | 第23-24页 |
| 3.2.1 仪器设备 | 第23页 |
| 3.2.2 实验药品及耗材 | 第23-24页 |
| 3.3 实验方法 | 第24-29页 |
| 3.3.1 紫球藻PCS基因的获得 | 第24页 |
| 3.3.2 紫球藻总RNA的提取与纯化 | 第24-25页 |
| 3.3.3 反转录 | 第25-26页 |
| 3.3.4 紫球藻PCS基因的PCR扩增 | 第26-27页 |
| 3.3.5 PCR扩增产物的纯化及回收 | 第27页 |
| 3.3.6 目的片段连接、转化与测序 | 第27-29页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第29-32页 |
| 3.4.1 紫球藻RNA电泳检测 | 第29页 |
| 3.4.2 紫球藻PCS基因的克隆 | 第29-30页 |
| 3.4.3 菌液PCR检测及测序结果 | 第30-32页 |
| 3.5 讨论 | 第32-33页 |
| 4 紫球藻PCS基因的生物信息学分析 | 第33-40页 |
| 4.1 材料与方法 | 第33页 |
| 4.1.1 材料 | 第33页 |
| 4.1.2 生物信息学分析方法 | 第33页 |
| 4.2 实验结果与分析 | 第33-39页 |
| 4.2.1 紫球藻PCS基因编码区序列分析 | 第33-35页 |
| 4.2.2 紫球藻PCS基因编码的氨基酸的序列特征 | 第35-39页 |
| 4.3 讨论 | 第39-40页 |
| 5 Cd~(2+)诱导下紫球藻PCS基因实时定量表达研究 | 第40-43页 |
| 5.1 材料处理 | 第40页 |
| 5.2 仪器设备及药品 | 第40页 |
| 5.3 实验方法 | 第40-41页 |
| 5.4 实验结果与分析 | 第41-42页 |
| 5.5 讨论 | 第42-43页 |
| 6 紫球藻PCS基因的原核表达 | 第43-52页 |
| 6.1 试剂配制 | 第43页 |
| 6.2 实验方法 | 第43-48页 |
| 6.2.1 获取目的基因 | 第43-44页 |
| 6.2.2 构建原核重组表达载体 | 第44-45页 |
| 6.2.3 检测原核重组表达载体 | 第45页 |
| 6.2.4 目的蛋白诱导表达 | 第45-48页 |
| 6.3 实验结果 | 第48-50页 |
| 6.3.1 紫球藻PCS基因开放阅读框的克隆及原核重组表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 6.3.2 蛋白诱导表达的SDS-PAGE电泳检测 | 第49-50页 |
| 6.4 讨论 | 第50-52页 |
| 7 紫球藻PCS基因的真核表达 | 第52-62页 |
| 7.1 试剂配制 | 第52-53页 |
| 7.2 实验方法 | 第53-56页 |
| 7.2.1 获取目的基因 | 第53-54页 |
| 7.2.2 构建真核重组表达载体 | 第54页 |
| 7.2.3 检测真核重组表达载体 | 第54页 |
| 7.2.4 INVSc1酵母感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
| 7.2.5 真核重组表达载体转化至INVSc1酵母表达宿主菌 | 第55页 |
| 7.2.6 PpPCS基因真核表达的功能分析 | 第55-56页 |
| 7.3 实验结果 | 第56-60页 |
| 7.3.1 紫球藻PCS基因开放阅读框的克隆及真核表达载体的构建 | 第56-58页 |
| 7.3.2 PpPCS基因真核表达的功能分析 | 第58-60页 |
| 7.4 讨论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 附录 质粒图谱 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
