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家蚕脑的蛋白质组学分析及杆状病毒诱导家蚕行为变化的分子机制研究

中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
英文缩略表第13-14页
第一章 昆虫杆状病毒诱导宿主行为变化以及昆虫脑相关研究的文献综述第14-28页
    1.1 昆虫杆状病毒诱导宿主行为变化及分子机制第16-21页
        1.1.1 舞毒蛾核型多角体病毒诱导吉普赛舞毒蛾幼虫向上攀爬的分子机制第16-17页
        1.1.2 家蚕核型多角体病毒诱导家蚕运动活性增强的分子机制第17-19页
        1.1.3 苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒诱导甜菜夜蛾幼虫出现行为变化的分子机制第19-21页
    1.2 昆虫中央复合体与蕈形体的结构与功能第21-24页
    1.3 昆虫脑中的信号传递第24-26页
        1.3.1 神经递质第24-25页
        1.3.2 神经肽第25-26页
        1.3.3 离子通道第26页
    1.4 本研究目的和科学意义第26-28页
第二章 家蚕脑的蛋白质组学分析第28-44页
    2.1 材料与方法第28-31页
        2.1.1 实验材料第28页
        2.1.2 实验试剂第28-29页
        2.1.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第29-30页
        2.1.4 蛋白质胶内酶解第30页
        2.1.5 毛细管高效液相色谱第30页
        2.1.6 ESI质谱鉴定第30-31页
        2.1.7 ESI质谱数据分析第31页
        2.1.8 生物信息学分析第31页
    2.2 结果第31-34页
        2.2.1 家蚕脑蛋白质鉴定第31-33页
        2.2.2 家蚕脑蛋白的GO分析第33页
        2.2.3 家蚕脑蛋白的KEGG分析第33-34页
    2.3 讨论第34-37页
        2.3.1 与家蚕行为相关的蛋白第35-36页
        2.3.2 与神经系统发育和功能相关的蛋白第36-37页
    2.4 本章小结第37-44页
第三章 BmNPV感染家蚕神经系统的进程及组织和神经病理学分析第44-51页
    3.1 材料和试剂第44-47页
        3.1.1 实验材料第44页
        3.1.2 实验试剂第44-45页
        3.1.3 病毒感染家蚕神经系统的进程分析第45页
        3.1.4 组织石蜡包埋切片第45-46页
        3.1.5 HE染色第46页
        3.1.6 硝酸银浸镀法镀银染色第46-47页
    3.2 结果第47-49页
        3.2.1 BmNPV感染家蚕脑和神经节的进程分析第47页
        3.2.2 病毒感染后家蚕脑的组织病理学和神经病理学分析第47-49页
    3.3 讨论第49-50页
    3.4 本章小结第50-51页
第四章 BmNPV感染家蚕脑的转录组分析第51-70页
    4.1 材料与方法第51-57页
        4.1.1 杆状病毒和家蚕品系第51页
        4.1.2 实验试剂第51-52页
        4.1.3 BmNPV经口感染家蚕第52页
        4.1.4 mRNA提取第52-53页
        4.1.5 cDNA文库的构建以及RNA测序(RNA-Seq)第53页
        4.1.6 原始测序数据分析第53-54页
        4.1.7 差异表达基因的生物信息学分析第54页
        4.1.8 qPCR验证RNA-Seq数据第54-57页
    4.2 结果第57-65页
        4.2.1 RNA-Seq数据整体质量评估第57页
        4.2.2 cDNA片段随机性检验第57-59页
        4.2.3 测序饱和度检验第59页
        4.2.4 不同样品表达量比对第59页
        4.2.5 差异表达基因筛选第59-60页
        4.2.6 差异表达基因聚类分析第60-62页
        4.2.7 差异表达基因的Gene ontology(GO)分析第62页
        4.2.8 差异基因的KEGG pathway分析第62-63页
        4.2.9 差异基因的COG分析第63-64页
        4.2.10 qPCR验证RNA-seq结果的准确性第64-65页
    4.3 讨论第65-69页
        4.3.1 与生物节律相关的差异基因第67页
        4.3.2 与突触传递相关的差异基因第67-68页
        4.3.3 与血清素受体信号途径相关的差异基因第68-69页
    4.4 本章小结第69-70页
第五章 家蚕血清素受体(Bm5-HT_4R)与家蚕运动行为活性的相关性研究第70-85页
    5.1 材料与方法第71-76页
        5.1.1 材料和试剂第71-72页
        5.1.2 蛋白质序列比对以及系统进化分析第72页
        5.1.3 mRNA的提取和反转录第72页
        5.1.4 qPCR第72-73页
        5.1.5 抗Bm5-HT_4R抗体的制备第73页
        5.1.6 Western blotting第73-74页
        5.1.7 RNA干扰(RNAi)第74-76页
        5.1.8 幼虫行为实验第76页
        5.1.9 数据分析第76页
    5.2 结果第76-82页
        5.2.1 Bm5-HT_4R的系统进化分析以及序列比对第76-79页
        5.2.2 Bm5-HT_4R的组织分布第79页
        5.2.3 Bm5-HT_4R蛋白的组织定位第79-80页
        5.2.4 RNAi效果测定第80-81页
        5.2.5 Bm5-HT_4R的RNA干扰对家蚕运动行为活性的影响第81-82页
    5.3 讨论第82-84页
    5.4 本章小结第84-85页
论文结论、创新点及展望第85-86页
参考文献第86-96页
致谢第96-97页
博士期间发表论文第97页

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