| 中英文缩略词表 | 第5-11页 |
| 中文摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 1 前言 | 第17-40页 |
| 1.1 苹果轮纹病研究进展 | 第17-22页 |
| 1.1.1 苹果轮纹病的发生与危害 | 第17-18页 |
| 1.1.2 苹果轮纹病菌的侵染过程及发病诱因 | 第18-19页 |
| 1.1.3 病原菌致病机制 | 第19-20页 |
| 1.1.4 植物抗病机制 | 第20-22页 |
| 1.1.4.1 免疫反应 | 第20-21页 |
| 1.1.4.2 WRKY转录因子在植物抗病反应中的作用 | 第21-22页 |
| 1.2 乙烯在不同植病互作体系中的作用 | 第22-26页 |
| 1.2.1 乙烯的调控在不同植病互作体系中具有不同的意义 | 第23-24页 |
| 1.2.2 不同激素信号途径的交叉作用 | 第24-25页 |
| 1.2.3 乙烯在分子水平上的调控 | 第25-26页 |
| 1.3 乙烯生物合成 | 第26-29页 |
| 1.3.1 乙烯生物合成途径及系统 | 第26页 |
| 1.3.2 乙烯生物合成相关酶 | 第26-28页 |
| 1.3.2.1 SAM合成酶和SAM水解酶 | 第26-27页 |
| 1.3.2.2 ACC合成酶和ACC氧化酶 | 第27-28页 |
| 1.3.3 苹果乙烯生物合成研究进展 | 第28-29页 |
| 1.4 乙烯信号转导 | 第29-34页 |
| 1.4.1 乙烯信号转导线性模型建立 | 第29页 |
| 1.4.2 乙烯受体及其对乙烯信号的感知 | 第29-30页 |
| 1.4.3 乙烯在胞质内的信号转导 | 第30-31页 |
| 1.4.3.1 CTR1的功能 | 第30页 |
| 1.4.3.2 EIN2的功能 | 第30-31页 |
| 1.4.4 乙烯在核内的信号转导 | 第31-33页 |
| 1.4.4.1 初级转录因子(EIN3/EIL) | 第31页 |
| 1.4.4.2 次级转录因子(ERF/AP2)的结构功能及对病原菌的响应 | 第31-33页 |
| 1.4.5 苹果乙烯信号转导研究进展 | 第33-34页 |
| 1.5 病程相关蛋白基因 | 第34-39页 |
| 1.5.1 病程相关蛋白的分类与功能 | 第35-36页 |
| 1.5.2 苹果中病程相关蛋白的研究进展 | 第36-39页 |
| 1.5.2.1 MdPR-4 | 第36-37页 |
| 1.5.2.2 MdPR-1a,MdPR-5和MdPR-8 | 第37-39页 |
| 1.6 研究的目的和意义 | 第39页 |
| 1.7 研究的主要内容 | 第39-40页 |
| 2 材料和方法 | 第40-54页 |
| 2.1 试验材料 | 第40-43页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 2.1.2 苹果轮纹病病原菌Botryospheria dothidea | 第40页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第40页 |
| 2.1.4 酶及生化试剂 | 第40页 |
| 2.1.5 PCR引物 | 第40-41页 |
| 2.1.6 培养基 | 第41-42页 |
| 2.1.7 抗生素 | 第42页 |
| 2.1.8 溶液配制 | 第42-43页 |
| 2.1.8.1 MS培养基配制所用溶液 | 第42页 |
| 2.1.8.2 质粒DNA提取所用溶液 | 第42页 |
| 2.1.8.3 原生质体分离与转化所用溶液 | 第42-43页 |
| 2.1.8.4 Western Blot所用溶液 | 第43页 |
| 2.2 试验方法 | 第43-54页 |
| 2.2.1 苹果轮纹病病原菌Botryospheria dothidea的培养与保存 | 第43-44页 |
| 2.2.2 乙烯释放量的测定 | 第44页 |
| 2.2.3 半薄切片制片与扫描电镜观察 | 第44页 |
| 2.2.4 总RNA提取 | 第44-46页 |
| 2.2.5 反转录cDNA第一链的合成 | 第46页 |
| 2.2.6 基因组DNA的提取及纯化 | 第46-47页 |
| 2.2.7 普通PCR反应 | 第47页 |
| 2.2.8 Real-time PCR | 第47-48页 |
| 2.2.9 基因克隆PCR | 第48页 |
| 2.2.10 PCR产物的回收 | 第48-49页 |
| 2.2.11 连接反应 | 第49页 |
| 2.2.12 大肠杆菌感受态细胞的制备、转化 | 第49-50页 |
| 2.2.12.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第49-50页 |
| 2.2.12.2 大肠杆菌感受态细胞转化 | 第50页 |
| 2.2.13 DNA序列测定 | 第50页 |
| 2.2.14 序列分析 | 第50页 |
| 2.2.15 质粒DNA提取 | 第50-51页 |
| 2.2.16 质粒DNA酶切 | 第51页 |
| 2.2.17 原生质体的分离与转化 | 第51-52页 |
| 2.2.18 Western Blot | 第52-54页 |
| 2.2.18.1 蛋白样品的制备 | 第52页 |
| 2.2.18.2 SDS-PAGE电泳 | 第52页 |
| 2.2.18.3 转膜 | 第52-53页 |
| 2.2.18.4 免疫反应 | 第53页 |
| 2.2.18.5 显影与定影(暗室操作) | 第53页 |
| 2.2.18.6 凝胶图像分析 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-80页 |
| 3.1 轮纹病菌侵染后苹果细胞学研究 | 第54-59页 |
| 3.1.1 轮纹病菌对苹果果实细胞壁的影响 | 第54-56页 |
| 3.1.2 轮纹病菌对苹果果实细胞器的影响 | 第56-58页 |
| 3.1.3 轮纹病菌对苹果果实细胞核的影响 | 第58-59页 |
| 3.2 轮纹病菌对苹果果实MAPK活性的影响 | 第59-60页 |
| 3.3 乙烯与苹果轮纹病的关系 | 第60-68页 |
| 3.3.1 1-MCP对接种轮纹病菌果实乙烯生物合成和病斑大小的影响 | 第60-62页 |
| 3.3.2 1-MCP对乙烯生物合成和乙烯信号感知相关基因的影响 | 第62-66页 |
| 3.3.3 1-MCP对病程相关基因MdPRs的影响 | 第66-68页 |
| 3.4 MdWRKY33的表达受乙烯负调控 | 第68-75页 |
| 3.4.1 1-MCP对转录因子的影响 | 第68-73页 |
| 3.4.2 外源乙烯对MdWRKY33的影响 | 第73-75页 |
| 3.5 MdWRKY33与MdPRs的关系 | 第75-80页 |
| 3.5.1 MdWRKY33与MdPRs的表达高度协同 | 第75-76页 |
| 3.5.2 MdPRs启动子分析 | 第76-78页 |
| 3.5.3 原生质体转化验证 | 第78-80页 |
| 4 讨论 | 第80-90页 |
| 4.1 轮纹病菌在苹果果实中的侵染方式及致病机制 | 第80-82页 |
| 4.1.1 轮纹病菌在苹果果实中的扩展方式及对果实细胞壁的破坏 | 第80-81页 |
| 4.1.2 线粒体对病菌侵染较为敏感 | 第81-82页 |
| 4.1.3 轮纹病菌诱导细胞凋亡 | 第82页 |
| 4.2 乙烯与苹果轮纹病的关系 | 第82-86页 |
| 4.2.1 乙烯促进苹果轮纹病菌发病 | 第82-84页 |
| 4.2.2 苹果轮纹病菌诱导的乙烯信号途径与果实成熟进程有交叉作用 | 第84-86页 |
| 4.3 MdWRKY33介导乙烯对MdPRs的负调控 | 第86-88页 |
| 4.3.1 MdWRKY33与MdPRs表达高度协同 | 第86-87页 |
| 4.3.2 MdWRKY33调控MdPRs的表达 | 第87-88页 |
| 4.4 MdWRKY33调控MdPRs的猜测模型 | 第88-90页 |
| 5 结论 | 第90-91页 |
| 6 创新点 | 第91-92页 |
| 7 参考文献 | 第92-117页 |
| 8 附录 | 第117-124页 |
| 8.1 取样示意图 | 第117页 |
| 8.2 荧光定量所用引物 | 第117-121页 |
| 8.3 构建载体所用引物 | 第121-122页 |
| 8.4 补充图表 | 第122-124页 |
| 9 致谢 | 第124-125页 |
| 10 攻读学位期间发表论文情况 | 第125页 |
