| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-14页 |
| 英文摘要 | 第14-20页 |
| 前言 | 第21-23页 |
| 文献回顾 | 第23-41页 |
| 第一部分 构建衣霉素诱导内质网应激致心肌细胞凋亡模型及心脏功能衰竭模型 | 第41-55页 |
| 1 材料 | 第41-43页 |
| 1.1 实验动物 | 第41页 |
| 1.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 1.3 实验仪器 | 第42-43页 |
| 2 方法 | 第43-48页 |
| 2.1 原代乳鼠心肌细胞培养 | 第43-44页 |
| 2.2 实验分组 | 第44页 |
| 2.3 MTT法检测心肌细胞存活率 | 第44页 |
| 2.4 流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率 | 第44页 |
| 2.5 乳酸脱氢酶释放检测 | 第44-45页 |
| 2.6 实时定量PCR检测心肌细胞GRP78、CHOP m RNA水平 | 第45-46页 |
| 2.7 构建小鼠心衰模型 | 第46页 |
| 2.8 2D M-mode超声心动图诊断 | 第46-47页 |
| 2.9 小鼠心脏标本取材处理冰冻切片制备 | 第47页 |
| 2.10 小鼠心脏心肌细胞凋亡检测 | 第47-48页 |
| 2.11 统计学处理 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-53页 |
| 3.1 衣霉素诱导内质网应激对心肌细胞存活率的影响 | 第48-49页 |
| 3.2 衣霉素对心肌细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
| 3.3 PCR检测衣霉素诱导内质网应激分子伴侣GRP78和CHOP表达 | 第50-51页 |
| 3.4 动物模型建立后的一般特征 | 第51页 |
| 3.5 衣霉素对在体小鼠心脏功能的影响 | 第51页 |
| 3.6 衣霉素对在体小鼠心脏组织损伤及凋亡水平的影响 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 第二部分DIDS和DCPIB对衣霉素诱导心肌内质网应激损伤的影响 | 第55-67页 |
| 1 材料 | 第55-56页 |
| 1.1 实验动物 | 第55页 |
| 1.2 实验试剂 | 第55页 |
| 1.3 实验仪器 | 第55-56页 |
| 2 | 第56-60页 |
| 2.1 原代乳鼠心肌细胞的培养 | 第56页 |
| 2.2 实验分组 | 第56-57页 |
| 2.3 MTT法检测氯离子通道阻断剂对心肌细胞存活率的影响 | 第57页 |
| 2.4 TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡率 | 第57页 |
| 2.5 Caspase-3 活性检测 | 第57-58页 |
| 2.6 氯离子荧光探针（MQAE）检测细胞内氯离子浓度 | 第58页 |
| 2.7 心肌细胞表面GRP78荧光水平检测 | 第58-59页 |
| 2.8 免疫印迹法检测cleaved caspase-3 表达 | 第59-60页 |
| 2.9 统计学处理 | 第60页 |
| 3 结果 | 第60-65页 |
| 3.1 MTT法检测氯离子通道阻断剂对衣霉素诱导的细胞存活率的影响 | 第60-62页 |
| 3.2 TUNEL法检测DIDS、DCPIB对衣霉素诱导的心肌细胞凋亡率的影响 | 第62-63页 |
| 3.3 DIDS对衣霉素损伤心肌细胞cleaved caspase-3 表达的影响 | 第63页 |
| 3.4 DIDS、DCPIB对衣霉素损伤心肌细胞caspase-3 活性的影响 | 第63-64页 |
| 3.5 衣霉素对心肌细胞内氯离子浓度的影响 | 第64页 |
| 3.6 氯离子通道阻断剂对衣霉素诱导内质网应激分子伴侣表达的影响 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 第三部分DIDS、DCPIB对衣霉素诱导心肌内质网应激相关信号通路的调控 | 第67-78页 |
| 1 材料 | 第67-69页 |
| 1.1 实验动物 | 第67页 |
| 1.2 实验试剂 | 第67-68页 |
| 1.3 实验仪器 | 第68-69页 |
| 2 方法 | 第69-71页 |
| 2.1 原代乳鼠心肌细胞的培养 | 第69页 |
| 2.2 实验分组 | 第69页 |
| 2.3 免疫印迹法检测cleaved caspase-12、CHOP、ATF4、pe IF2α、e IF2α、JNK表达 · 642.4 心肌细胞表面CHOP荧光水平检测 | 第69-70页 |
| 2.4 心肌细胞表面 CHOP 荧光水平检测 | 第70页 |
| 2.5 实时定量PCR监测XBP 1S m RNA水平。 | 第70页 |
| 2.6 统计学处理 | 第70-71页 |
| 3 结果 | 第71-76页 |
| 3.1 氯通道阻断剂对内质网应激标志性蛋白CHOP的影响 | 第71页 |
| 3.2 氯通道阻断剂对Tm诱导的ERS信号通路相关蛋白表达的影响 | 第71-75页 |
| 3.3 氯离子通道阻断剂DIDS对Tm诱导内质网应激性凋亡分子的影响 | 第75-76页 |
| 3.4 DIDS 对内质网应激 CHOP 信号通路下游信号分子的影响 | 第76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 第四部分DIDS、DCPIB对衣霉素诱导心肌内质网应激与Wnt通路的调控机制 | 第78-90页 |
| 1 材料 | 第78-79页 |
| 1.1 实验动物 | 第78页 |
| 1.2 实验试剂 | 第78-79页 |
| 1.3 实验仪器 | 第79页 |
| 1.4 试剂配制 | 第79页 |
| 2 方法 | 第79-81页 |
| 2.1 细胞培养 | 第79页 |
| 2.2 实验方案 | 第79-80页 |
| 2.3 Western blotting法检测H9C2细胞胞浆、胞核 β-catenin蛋白表达水平 | 第80页 |
| 2.4 H9C2细胞转染以及荧光报告系统检测 | 第80-81页 |
| 2.5 CHOP基因沉默 | 第81页 |
| 2.6 统计学分析 | 第81页 |
| 3 结果 | 第81-87页 |
| 3.1 衣霉素对H9C2心肌细胞系Wnt通路相关蛋白 β-catenin活性的影响 | 第81-82页 |
| 3.2 DIDS、DCPIB对衣霉素诱导内质网应激过程中Wnt通路的影响 | 第82-84页 |
| 3.3 DIDS、DCPIB对衣霉素诱导内质网应激过程中CHOP与Wnt通路调控的机制 | 第84-85页 |
| 3.4 si CHOP干涉后对细胞存活率的影响 | 第85-87页 |
| 4 讨论 | 第87-90页 |
| 小结 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-100页 |
| 个人简历和研究成果 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
