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生物钟核心蛋白BMAL1相互作用泛素连接酶的鉴定及其对BMAL1代谢的调控研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第10-14页
第二章 实验材料与方法第14-31页
    2.1 实验材料第14-17页
        2.1.1 细胞系第14页
        2.1.2 主要试剂第14-16页
        2.1.3 主要抗体第16页
        2.1.4 主要仪器第16-17页
    2.2 实验方法第17-31页
        2.2.1 主要试剂的配制第17-21页
        2.2.2 细胞培养第21页
        2.2.3 PEI转染第21-22页
        2.2.4 蛋白免疫印迹第22页
        2.2.5 蛋白免疫共沉淀第22-23页
        2.2.6 RNA提取第23页
        2.2.7 逆转录合成cDNA第一链第23-24页
        2.2.8 实时定量PCR第24-25页
        2.2.9 质粒的构建第25-27页
        2.2.10 银染第27页
        2.2.11 蛋白胶内酶解第27-28页
        2.2.12 LC-MS/MS检测第28页
        2.2.13 数据分析第28页
        2.2.14 生物信息学分析第28-29页
        2.2.15 siRNA干扰实验第29-31页
第三章 实验结果与讨论第31-54页
    3.1 泛素连接酶TRAF2调控生物节律的机制研究第31-40页
        3.1.1 BMAL1相互作用蛋白的生物信息学筛选第31-33页
        3.1.2 TRAF2和BMAL1相互作用验证第33-34页
        3.1.3 TRAF2调控BMAL1的稳定性和泛素化第34-36页
        3.1.4 TRAF2调控N2a细胞的生物节律第36-39页
        3.1.5 结论与讨论第39-40页
    3.2 BMAL1相互作用蛋白的鉴定及其对BMAL1代谢的调控第40-54页
        3.2.1 纯化目标蛋白FLAG-BMAL1第40-41页
        3.2.2 BMAL1及其相互作用蛋白胶内酶解及质谱鉴定第41-43页
        3.2.3 BMAL1相互作用蛋白的生物信息学分析第43-45页
        3.2.4 BMAL1相互作用蛋白生物化学验证第45-47页
        3.2.5 STUB1调控BMAL1稳定性和泛素化第47-49页
        3.2.6 UBR5调控BMAL1稳定性第49-51页
        3.2.7 USP9X调控BMAL1稳定性第51-52页
        3.2.8 结论与讨论第52-54页
参考文献第54-59页
综述第59-68页
    参考文献第63-68页
中英文缩略词对照表第68-69页
攻读硕士学位期间已发表和待发表的论文第69-70页
附录第70-71页
致谢第71-72页

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