中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第10-14页 |
第二章 实验材料与方法 | 第14-31页 |
2.1 实验材料 | 第14-17页 |
2.1.1 细胞系 | 第14页 |
2.1.2 主要试剂 | 第14-16页 |
2.1.3 主要抗体 | 第16页 |
2.1.4 主要仪器 | 第16-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-31页 |
2.2.1 主要试剂的配制 | 第17-21页 |
2.2.2 细胞培养 | 第21页 |
2.2.3 PEI转染 | 第21-22页 |
2.2.4 蛋白免疫印迹 | 第22页 |
2.2.5 蛋白免疫共沉淀 | 第22-23页 |
2.2.6 RNA提取 | 第23页 |
2.2.7 逆转录合成cDNA第一链 | 第23-24页 |
2.2.8 实时定量PCR | 第24-25页 |
2.2.9 质粒的构建 | 第25-27页 |
2.2.10 银染 | 第27页 |
2.2.11 蛋白胶内酶解 | 第27-28页 |
2.2.12 LC-MS/MS检测 | 第28页 |
2.2.13 数据分析 | 第28页 |
2.2.14 生物信息学分析 | 第28-29页 |
2.2.15 siRNA干扰实验 | 第29-31页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第31-54页 |
3.1 泛素连接酶TRAF2调控生物节律的机制研究 | 第31-40页 |
3.1.1 BMAL1相互作用蛋白的生物信息学筛选 | 第31-33页 |
3.1.2 TRAF2和BMAL1相互作用验证 | 第33-34页 |
3.1.3 TRAF2调控BMAL1的稳定性和泛素化 | 第34-36页 |
3.1.4 TRAF2调控N2a细胞的生物节律 | 第36-39页 |
3.1.5 结论与讨论 | 第39-40页 |
3.2 BMAL1相互作用蛋白的鉴定及其对BMAL1代谢的调控 | 第40-54页 |
3.2.1 纯化目标蛋白FLAG-BMAL1 | 第40-41页 |
3.2.2 BMAL1及其相互作用蛋白胶内酶解及质谱鉴定 | 第41-43页 |
3.2.3 BMAL1相互作用蛋白的生物信息学分析 | 第43-45页 |
3.2.4 BMAL1相互作用蛋白生物化学验证 | 第45-47页 |
3.2.5 STUB1调控BMAL1稳定性和泛素化 | 第47-49页 |
3.2.6 UBR5调控BMAL1稳定性 | 第49-51页 |
3.2.7 USP9X调控BMAL1稳定性 | 第51-52页 |
3.2.8 结论与讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
综述 | 第59-68页 |
参考文献 | 第63-68页 |
中英文缩略词对照表 | 第68-69页 |
攻读硕士学位期间已发表和待发表的论文 | 第69-70页 |
附录 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |