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基于免疫PCR生物条形码技术检测多氯联苯的研究

摘要第7-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略词语第19-20页
第一章 绪论第20-40页
    1.1 多氯联苯的概述第20-23页
        1.1.1 多氯联苯的结构及性质第20页
        1.1.2 多氯联苯的来源第20-22页
        1.1.3 多氯联苯的危害第22-23页
    1.2 多氯联苯的检测方法第23-26页
        1.2.1 气相色谱法第23-24页
        1.2.2 光谱分析方法第24页
        1.2.3 生物分析方法第24页
        1.2.4 免疫分析方法第24-26页
    1.3 生物条形码技术概述第26-36页
        1.3.1 生物条形码技术的原理第27-28页
        1.3.2 条形码DNA第28页
        1.3.3 纳米粒子在生物条形码技术中的应用第28-29页
        1.3.4 生物条形码技术的发展第29-35页
        1.3.5 生物条形码技术的应用第35-36页
    1.4 研究对象第36-37页
    1.5 研究目的及意义第37-38页
    1.6 主要研究内容及技术路线第38-40页
        1.6.1 主要研究内容第38-39页
        1.6.2 技术路线第39-40页
第二章 三种PCBs单体人工抗原及抗体的制备第40-65页
    2.1 引言第40页
    2.2 实验仪器及材料第40-43页
        2.2.1 实验仪器第40页
        2.2.2 实验试剂及材料第40-42页
        2.2.3 试剂配制及材料预处理第42-43页
    2.3 试验方法与步骤第43-52页
        2.3.1 免疫原的制备第43-44页
        2.3.2 包被原的制备第44-45页
        2.3.3 人工抗原的鉴定第45-46页
        2.3.4 人工抗原蛋白含量的测定第46-47页
        2.3.5 偶联物结合比的计算第47页
        2.3.6 多克隆抗体的制备第47-49页
        2.3.7 单克隆抗体的制备第49-51页
        2.3.8 抗体效价测试第51页
        2.3.9 抗体特异性分析第51-52页
    2.4 结果与讨论第52-63页
        2.4.1 人工抗原的合成与表征第52-55页
        2.4.2 人工抗原的蛋白含量及偶联比第55-56页
        2.4.3 多克隆抗体的制备及表征第56-58页
        2.4.4 单克隆抗体的制备及表征第58-60页
        2.4.5 抗体的特异性分析第60-63页
    2.5 本章小结第63-65页
第三章 ic-ELISA检测PCBs方法的建立及应用第65-90页
    3.1 引言第65页
    3.2 实验仪器及材料第65-66页
        3.2.1 实验仪器第65页
        3.2.2 实验试剂及材料第65页
        3.2.3 试剂配制第65-66页
    3.3 实验方法第66-69页
        3.3.1 实验条件的优化第66-67页
        3.3.2 间接竞争ELISA方法的建立第67-68页
        3.3.3 标准曲线的建立第68页
        3.3.4 交叉反应率分析第68页
        3.3.5 样品预处理及分析检测第68-69页
        3.3.6 回收率第69页
    3.4 结果与讨论第69-88页
        3.4.1 实验条件的优化第69-78页
        3.4.2 方法的建立第78-82页
        3.4.3 交叉反应率第82-83页
        3.4.4 样品分析检测第83-86页
        3.4.5 回收率第86-88页
    3.5 本章小结第88-90页
第四章 BA-ELISA检测PCBs方法的建立及应用第90-112页
    4.1 引言第90页
    4.2 实验仪器及材料第90-91页
        4.2.1 实验仪器第90页
        4.2.2 实验试剂及材料第90页
        4.2.3 试剂配制第90-91页
    4.3 实验方法第91-94页
        4.3.1 生物素化抗体的制备第91页
        4.3.2 BA-ELISA方法的建立第91页
        4.3.3 实验条件的优化第91-93页
        4.3.4 标准曲线的建立第93页
        4.3.5 样品预处理及分析检测第93页
        4.3.6 回收率第93-94页
    4.4 结果与讨论第94-111页
        4.4.1 实验条件的优化第94-100页
        4.4.2 BA-ELISA方法的建立第100-105页
        4.4.3 样品的分析检测第105-109页
        4.4.4 回收率第109-111页
    4.5 本章小结第111-112页
第五章 基于rt-IPCR的间接竞争BCA方法检测PCBs第112-148页
    5.1 引言第112-113页
    5.2 实验仪器及材料第113-114页
        5.2.1 实验仪器第113页
        5.2.2 实验试剂及材料第113页
        5.2.3 寡核苷酸第113页
        5.2.4 试剂配制第113-114页
    5.3 实验方法第114-119页
        5.3.1 寡核苷酸链及引物的设计第114页
        5.3.2 实时荧光定量PCR扩增体系第114-115页
        5.3.3 金纳米颗粒的制备及表征第115页
        5.3.4 二抗的预处理第115页
        5.3.5 金纳米颗粒的修饰及表征第115-116页
        5.3.6 间接竞争生物条形码方法的基本步骤第116-117页
        5.3.7 实验条件的优化第117-118页
        5.3.8 标准曲线的建立第118页
        5.3.9 样品预处理及分析检测第118-119页
        5.3.10 回收率第119页
    5.4 结果与讨论第119-146页
        5.4.1 PCR扩增条件的优化第119-121页
        5.4.2 金纳米颗粒的制备、修饰及表征第121-123页
        5.4.3 实验条件的优化第123-128页
        5.4.4 间接竞争生物条形码方法的建立第128-139页
        5.4.5 样品的分析检测第139-144页
        5.4.6 回收率第144-146页
    5.5 本章小结第146-148页
第六章 基于rt-IPCR的直接竞争BCA方法检测PCBs第148-179页
    6.1 引言第148-149页
    6.2 实验仪器及材料第149页
        6.2.1 实验仪器第149页
        6.2.2 实验材料第149页
        6.2.3 寡核苷酸第149页
        6.2.4 试剂配制第149页
    6.3 实验方法第149-152页
        6.3.1 金纳米颗粒的制备及表征第149-150页
        6.3.2 抗体的预处理第150页
        6.3.3 金纳米颗粒的修饰第150页
        6.3.4 GNPs探针的表征第150页
        6.3.5 直接竞争生物条形码方法的基本步骤第150-151页
        6.3.6 实验条件的优化第151-152页
        6.3.7 标准曲线的建立第152页
        6.3.8 样品的预处理及分析检测第152页
        6.3.9 回收率第152页
    6.4 结果与讨论第152-177页
        6.4.1 GNPs的修饰及表征第152-156页
        6.4.2 实验条件的优化第156-159页
        6.4.3 实验方法的建立第159-170页
        6.4.4 样品的分析检测第170-175页
        6.4.5 回收率第175-177页
    6.5 本章小结第177-179页
第七章 结论与展望第179-184页
    7.1 结论第179-181页
    7.2 创新点第181-182页
    7.3 展望第182-184页
参考文献第184-195页
附录 1第195-196页
致谢第196-197页
攻读博士学位期间已发表或录用的文章第197-198页

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