目录 | 第4-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
缩略语 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
1.1 重金属对植物的毒害作用 | 第9页 |
1.2 植物耐重金属的可能机理 | 第9-14页 |
1.2.1 排斥作用 | 第10-12页 |
1.2.2 积累作用 | 第12-14页 |
1.2.3 抗氧化作用 | 第14页 |
1.3 cDNA-AFLP技术及其在植物基因表达差异中的应用 | 第14-16页 |
1.3.1 cDNA-AFLP的原理 | 第15页 |
1.3.2 cDNA-AFLP的技术特点 | 第15-16页 |
1.3.3 cDNA-AFLP技术在植物基因差异表达研究中的应用 | 第16页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第16-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-27页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 细菌菌株 | 第19页 |
2.1.3 质粒载体 | 第19页 |
2.1.4 所用引物 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-27页 |
2.2.1 植物材料的培养 | 第20页 |
2.2.2 水稻根系总RNA提取 | 第20-21页 |
2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第21页 |
2.2.4 cDNA第二链的合成 | 第21-22页 |
2.2.5 双链cDNA的纯化 | 第22页 |
2.2.6 模板制备 | 第22-23页 |
2.2.7 预扩增 | 第23页 |
2.2.8 选择性扩增 | 第23-24页 |
2.2.9 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第24-25页 |
2.2.10 聚丙烯酰胺凝胶染色 | 第25-26页 |
2.2.11 特异片段回收与二次扩增 | 第26页 |
2.2.12 二次PCR产物的纯化与质粒转化 | 第26页 |
2.2.13 特异性片段测序 | 第26-27页 |
第三章 结果与分析 | 第27-41页 |
3.1 总RNA的提取 | 第27页 |
3.2 双链cDNA的合成 | 第27-28页 |
3.3 限制性内切酶酶切及连接 | 第28页 |
3.4 预扩增结果 | 第28页 |
3.5 选择性扩增结果 | 第28-29页 |
3.6 银染法与荧光染法对比分析 | 第29-31页 |
3.7 AFLP图谱 | 第31-35页 |
3.8 差异条带的回收 | 第35页 |
3.9 二次PCR产物的纯化及克隆 | 第35-36页 |
3.10 测序结果及同源性分析 | 第36-41页 |
第四章 讨论 | 第41-49页 |
4.1 cDNA-AFLP技术的应用及优化 | 第41-44页 |
4.1.1 cDNA-AFLP技术的特点及实用性 | 第41-42页 |
4.1.2 cDNA-AFLP技术的优化及注意事项 | 第42-44页 |
4.2 铜胁迫下差异表达基因的可能功能 | 第44-48页 |
4.2.1 转录因子 | 第44页 |
4.2.2 胁迫响应 | 第44-46页 |
4.2.3 抗氧化相关基因 | 第46-47页 |
4.2.4 细胞信号转导 | 第47页 |
4.2.5 细胞壁合成 | 第47页 |
4.2.6 其他 | 第47-48页 |
4.3 全文总结 | 第48页 |
4.4 存在问题及工作展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
致谢 | 第57页 |