| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 急性髓系白血病 | 第13-14页 |
| 1.2 微小RNA | 第14-15页 |
| 1.3 微小RNA与肿瘤 | 第15-17页 |
| 1.4 微小RNA与表观遗传学调控 | 第17-19页 |
| 第一部分 MiR-125b在急性髓系白血病中的表达、甲基化水平及临床意义 | 第19-44页 |
| 第一章 研究的目的、方法及实验方案的设计、意义 | 第19-23页 |
| 1.1 研究背景及目的 | 第19-20页 |
| 1.2 研究方法及技术 | 第20-21页 |
| 1.2.1 实时定量PCR（RQ-PCR） | 第20页 |
| 1.2.2 甲基化特异性PCR （Methylation-specific PCR， MSP) | 第20-21页 |
| 1.2.3 亚硫酸氢盐测序（Bisulfite sequencing PCR， BSP） | 第21页 |
| 1.3 实验方案设计 | 第21-22页 |
| 1.4 研究的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-33页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2.1.4 引物 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 骨髓单个核细胞（BMMNCs）的分离过程和RNA、DNA的提取过程 | 第25-26页 |
| 2.2.2 DNA硫化修饰（Epitect Bisulfite Kit修饰DNA） | 第26-27页 |
| 2.2.3 逆转录合成cDNA | 第27-28页 |
| 2.2.4 MiR-125b表达的RQ-PCR检测 | 第28页 |
| 2.2.5 MiR-125b基因MSP检测 | 第28-29页 |
| 2.2.6 MiR-125b基因BSP分析 | 第29页 |
| 2.2.7 PCR产物纯化与回收 | 第29-30页 |
| 2.2.8 重组载体构建 | 第30页 |
| 2.2.9 重组质粒转化 | 第30-31页 |
| 2.2.10 重组质拉提取及鉴定测序 | 第31页 |
| 2.2.11 阳性模板建立 | 第31页 |
| 2.2.12 细胞遗传学检查 | 第31-32页 |
| 2.2.13 基因突变检测 | 第32页 |
| 2.2.14 统计学处理 | 第32-33页 |
| 第三章 结果 | 第33-40页 |
| 3.1 RQ-PCR方法的灵敏度﹑重复性﹑特异性 | 第33页 |
| 3.2 对照组与AML患者中miR-125b的表达情况 | 第33-34页 |
| 3.3 AML患者miR-125b表达的ROC曲线 | 第34-35页 |
| 3.4 MiR-125b表达与AML患者临床及实验室参数相关性 | 第35-37页 |
| 3.5 MiR-125b表达与AML患者预后的关系 | 第37-38页 |
| 3.6 对照组和AML患者中miR-125b基因的甲基化 | 第38-40页 |
| 第四章 讨论 | 第40-43页 |
| 第五章 结论 | 第43-44页 |
| 第二部分 MiR-125b在髓系白血病细胞中的功能研究 | 第44-63页 |
| 第一章 研究的目的、方法及实验方案的设计、意义 | 第44-47页 |
| 1.1 研究背景及目的 | 第44页 |
| 1.2 研究方法及技术 | 第44-45页 |
| 1.2.1 细胞培养技术 | 第44页 |
| 1.2.2 细胞转染技术 | 第44-45页 |
| 1.3 实验方案设计 | 第45-46页 |
| 1.4 研究的意义 | 第46-47页 |
| 第二章 材料和方法 | 第47-55页 |
| 2.1 材料 | 第47-49页 |
| 2.1.1 细胞 | 第47页 |
| 2.1.2 质粒和菌株 | 第47-48页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第48页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第48-49页 |
| 2.2 方法 | 第49-55页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第49-51页 |
| 2.2.2 细胞株的稳定转染 | 第51页 |
| 2.2.3 RQ-PCR检测细胞转染株中miR-125b表达量 | 第51-52页 |
| 2.2.4 细胞体外生物学功能实验 | 第52-54页 |
| 2.2.5 统计学分析 | 第54-55页 |
| 第三章 结果 | 第55-60页 |
| 3.1 过表达miR-125b细胞株稳定转染效率的验证 | 第55页 |
| 3.2 RQ-PCR检测转染后细胞中miR-125b过表达情况 | 第55-56页 |
| 3.3 MiR-125b促进K562细胞增殖 | 第56-57页 |
| 3.4 MiR-125b促进K562细胞生存 | 第57页 |
| 3.5 MiR-125b抑制K562细胞凋亡 | 第57-58页 |
| 3.6 MiR-125b参与地西他滨耐药影响的研究 | 第58-60页 |
| 第四章 讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 结论 | 第62-63页 |
| 总结与展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第75-76页 |
| 一、发表论文 | 第75-76页 |
| 二、获奖情况 | 第76页 |
| 三、参与科研项目 | 第76页 |
