| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 军团菌简介 | 第12-13页 |
| 1.2 军团菌病的危害及流行概况 | 第13-15页 |
| 1.3 军团菌病的预防措施 | 第15页 |
| 1.4 国内外军团菌检测方法研究 | 第15-24页 |
| 1.4.1 细菌培养法 | 第15-16页 |
| 1.4.2 分子生物学方法 | 第16-21页 |
| 1.4.2.1 核酸探针技术 | 第17页 |
| 1.4.2.2 常规PCR（Rational PCR） | 第17-18页 |
| 1.4.2.3 套式PCR（Nested PCR） | 第18页 |
| 1.4.2.4 多重PCR（Multiplex PCR） | 第18-19页 |
| 1.4.2.5 实时荧光定量PCR（RT-PCR） | 第19页 |
| 1.4.2.6 PCR-ELISA法 | 第19页 |
| 1.4.2.7 PCR-探针法 | 第19-20页 |
| 1.4.2.8 环介导等温扩增（LAMP）技术 | 第20页 |
| 1.4.2.9 基因芯片技术 | 第20-21页 |
| 1.4.3 免疫学方法 | 第21-24页 |
| 1.4.3.1 尿抗原检测法 | 第21-22页 |
| 1.4.3.2 直接免疫荧光染色法（DFA） | 第22页 |
| 1.4.3.3 血清抗体检测法 | 第22页 |
| 1.4.3.4 水中军团菌抗原的检测 | 第22-23页 |
| 1.4.3.5 细胞计量术 | 第23页 |
| 1.4.3.6 免疫传感器技术 | 第23-24页 |
| 1.5 研究目的与内容 | 第24-26页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第24页 |
| 1.5.2 研究内容及方法 | 第24-25页 |
| 1.5.3 研究路线 | 第25-26页 |
| 第二章 环境水样军团菌分离培养与生化鉴定 | 第26-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 菌株 | 第26页 |
| 2.1.2 实验试剂及培养基的配制 | 第26-28页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 水样采集 | 第28-29页 |
| 2.2.2 水样处理 | 第29-30页 |
| 2.2.3 水样接种培养 | 第30页 |
| 2.2.4 菌落观察和验证 | 第30页 |
| 2.2.5 革兰氏染色镜检 | 第30-31页 |
| 2.2.6 生化试验 | 第31-32页 |
| 2.2.7 模拟水样灵敏度试验 | 第32页 |
| 2.2.7.1 菌悬液的制备及菌量测定 | 第32页 |
| 2.2.7.2 模拟水样的制备 | 第32页 |
| 2.2.7.3 模拟水样处理 | 第32页 |
| 2.2.7.4 模拟水样接种培养 | 第32页 |
| 2.2.7.5 模拟水样菌落观察和验证 | 第32页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第32-41页 |
| 2.3.1 菌落观察和验证结果 | 第32-33页 |
| 2.3.2 革兰氏染色镜检结果 | 第33页 |
| 2.3.3 生化试验结果 | 第33-37页 |
| 2.3.4 环境水样分离培养与生化鉴定结果 | 第37-39页 |
| 2.3.5 模拟水样灵敏度试验结果 | 第39-40页 |
| 2.3.6 小结 | 第40-41页 |
| 第三章 嗜肺军团菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法）检测环境水样 | 第41-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第41页 |
| 3.1.1 菌株 | 第41页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第41页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-43页 |
| 3.2.1 检测原理 | 第41-42页 |
| 3.2.2 水样采集 | 第42页 |
| 3.2.3 过滤浓缩 | 第42页 |
| 3.2.4 DNA提取 | 第42页 |
| 3.2.5 恒温核酸扩增反应 | 第42-43页 |
| 3.2.6 模拟水样灵敏度试验 | 第43页 |
| 3.2.6.1 菌悬液的制备及菌量测定 | 第43页 |
| 3.2.6.2 模拟水样的制备 | 第43页 |
| 3.2.6.3 模拟水样过滤浓缩 | 第43页 |
| 3.2.6.4 模拟水样DNA提取 | 第43页 |
| 3.2.6.5 模拟水样恒温核酸扩增反应 | 第43页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第43-47页 |
| 3.3.1 环境水样恒温核酸检测结果 | 第43-44页 |
| 3.3.2 模拟水样灵敏度试验结果 | 第44-46页 |
| 3.3.3 小结 | 第46-47页 |
| 第四章 环境水样军团菌PCR扩增与测序鉴定 | 第47-55页 |
| 4.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 4.1.1 菌株 | 第47页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第47页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第47页 |
| 4.1.4 PCR引物设计与合成 | 第47-48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 4.2.1 水样采集 | 第48页 |
| 4.2.2 过滤浓缩 | 第48页 |
| 4.2.3 DNA提取 | 第48页 |
| 4.2.4 PCR扩增反应 | 第48页 |
| 4.2.5 琼脂糖凝胶电泳及结果观察 | 第48-49页 |
| 4.2.6 凝胶回收及纯化 | 第49页 |
| 4.2.7 基因测序鉴定 | 第49-50页 |
| 4.2.8 模拟水样灵敏度试验 | 第50页 |
| 4.2.8.1 菌悬液的制备及菌量测定 | 第50页 |
| 4.2.8.2 模拟水样的制备 | 第50页 |
| 4.2.8.3 模拟水样过滤浓缩 | 第50页 |
| 4.2.8.4 模拟水样DNA提取 | 第50页 |
| 4.2.8.5 模拟水样PCR扩增反应 | 第50页 |
| 4.2.8.6 模拟水样琼脂糖凝胶电泳及结果观察 | 第50页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第50-55页 |
| 4.3.1 环境水样PCR检测结果 | 第50-51页 |
| 4.3.2 环境水样测序鉴定结果 | 第51-53页 |
| 4.3.3 模拟水样灵敏度试验结果 | 第53-54页 |
| 4.3.4 小结 | 第54-55页 |
| 结论与展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-87页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 附件 | 第89页 |
