中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
前言 | 第10-11页 |
附:技术路线 | 第11-12页 |
第一章 综述 | 第12-20页 |
1 Nrf2与keap1的研究现状 | 第12-15页 |
1.1 Nrf2和keap1的简介 | 第12页 |
1.2 Nrf2和keap1的结构分析 | 第12-13页 |
1.3 昆虫Nrf2/keap1信号通路研究 | 第13-15页 |
1.4 CncC/keap1在鳞翅目昆虫中研究的重要性 | 第15页 |
2 Nrf2与keap1的功能研究 | 第15-18页 |
2.1 Nrf/keap1信号通路的调控蛋白 | 第15-18页 |
2.2 Nrf2的激动剂和抑制剂的研究 | 第18页 |
3 总结与展望 | 第18-20页 |
第二章 家蚕CncC与keap1的克隆及序列分析 | 第20-36页 |
1 前言 | 第20-21页 |
2 实验材料与方法 | 第21-27页 |
2.1 家蚕品种和饲养方法 | 第21页 |
2.2 RNA抽提 | 第21页 |
2.3 RNA的纯化实验 | 第21-22页 |
2.4 Race实验技术 | 第22-23页 |
2.5 RNA的反转录 | 第23-24页 |
2.6 3’ RACE的实验方法 | 第24页 |
2.7 巢式PCR | 第24页 |
2.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
2.9 割胶回收 | 第24-25页 |
2.10 感受态细胞制备 | 第25页 |
2.11 连接转化 | 第25-26页 |
2.12 挑斑菌检和质粒抽提 | 第26页 |
2.13 质粒酶切鉴定 | 第26-27页 |
2.14 实时荧光定量PCR | 第27页 |
2.15 序列分析和进化分析 | 第27页 |
2.16 统计分析 | 第27页 |
3 实验结果 | 第27-33页 |
3.1 序列克隆及分析 | 第27-31页 |
3.2 序列的物种对比分析 | 第31-32页 |
3.3 CncC和keap1在各个龄期和组织中的转录水平 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-36页 |
第三章 外源物对CncC/keap1信号通路的影响 | 第36-44页 |
1 前言 | 第36-37页 |
2 实验材料和方法 | 第37-38页 |
2.1 家蚕饲养和取材 | 第37页 |
2.2 RNA测序分析 | 第37-38页 |
2.3 RNA的抽提纯化和cDNA的第一链合成 | 第38页 |
2.4 实时荧光定量PCR | 第38页 |
2.5 氧化应激检测 | 第38页 |
2.6 统计分析 | 第38页 |
3 实验结果 | 第38-41页 |
3.1 辛硫磷添食对五龄家蚕脂肪体CncC与keap1的转录水平的影响 | 第38-39页 |
3.2 TiO_2NPs和辛硫磷处理 24hr后下游抗氧化基因和解毒基因的转录水平 | 第39-40页 |
3.3 氧化应激水平 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-44页 |
总结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-55页 |
攻读学位期间公开发表的论文及项目 | 第55-57页 |
附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |