摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-19页 |
1.1 紫花苜蓿产量的研究进展 | 第11-12页 |
1.2 赤霉素相关研究进展 | 第12-18页 |
1.2.1 赤霉素对植物产量的影响 | 第12-13页 |
1.2.2 赤霉素的生物合成途径 | 第13-14页 |
1.2.3 赤霉素的失活途径 | 第14-15页 |
1.2.4 赤霉素的信号转导途径 | 第15-17页 |
1.2.5 植物中赤霉素的稳态机制及其对植物株高的影响 | 第17-18页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 MsGID1b基因的克隆及生物信息学分析 | 第19-29页 |
2.1 材料与试剂 | 第19页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
2.1.3 实验仪器 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-24页 |
2.2.1 植物总RNA的提取 | 第19-20页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第20-21页 |
2.2.3 MsGID1b基因的克隆 | 第21页 |
2.2.4 PCR产物的回收 | 第21-22页 |
2.2.5 目的片段与克隆载体的连接 | 第22页 |
2.2.6 转化大肠杆菌及检测阳性克隆 | 第22-23页 |
2.2.7 序列的生物信息学分析 | 第23-24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-28页 |
2.3.1 目的基因的克隆 | 第24页 |
2.3.2 生物信息学分析 | 第24-28页 |
2.4 讨论 | 第28-29页 |
第三章 MsGID1b基因的表达分析 | 第29-33页 |
3.1 材料与试剂 | 第29页 |
3.1.1 植物材料 | 第29页 |
3.1.2 实验试剂 | 第29页 |
3.1.3 实验仪器 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-30页 |
3.2.1 中苜1号的水培和处理 | 第29页 |
3.2.2 RT-PCR分析MsGID1b的组织表达特异性 | 第29-30页 |
3.2.3 RT-PCR分析MsGID1b在不同处理下的表达 | 第30页 |
3.3 结果与分析 | 第30-31页 |
3.3.1 MsGID1b的组织表达特异性分析 | 第30页 |
3.3.2 MsGID1b在不同处理下的表达分析 | 第30-31页 |
3.4 讨论 | 第31-33页 |
第四章 MsGID1b的原核表达分析 | 第33-38页 |
4.1 材料与试剂 | 第33页 |
4.1.1 实验试剂 | 第33页 |
4.1.2 实验仪器 | 第33页 |
4.2 实验方法 | 第33-37页 |
4.2.1 原核表达载体的构建 | 第33-34页 |
4.2.2 转化BL21(DE3)表达感受态细胞 | 第34-36页 |
4.2.3 目的蛋白的诱导表达及获得 | 第36页 |
4.2.4 SDS-PAGE蛋白电泳分析 | 第36-37页 |
4.3 结果与分析 | 第37页 |
4.4 讨论 | 第37-38页 |
第五章 酵母双杂交对MsGID1b基因功能的验证 | 第38-44页 |
5.1 材料与试剂 | 第38页 |
5.1.1 实验试剂 | 第38页 |
5.1.2 实验仪器 | 第38页 |
5.2 实验方法 | 第38-41页 |
5.2.1 酵母表达载体的构建 | 第38-39页 |
5.2.2 酵母感受态细胞的制作 | 第39-40页 |
5.2.3 转化酵母感受态细胞 | 第40页 |
5.2.4 自激活检测 | 第40-41页 |
5.2.5 互作验证 | 第41页 |
5.3 结果与分析 | 第41-43页 |
5.3.1 酵母表达载体的构建及其验证 | 第41-42页 |
5.3.2 自激活检测 | 第42页 |
5.3.3 互作验证 | 第42-43页 |
5.4 讨论 | 第43-44页 |
第六章 MsGID1b对拟南芥的转化 | 第44-53页 |
6.1 材料与试剂 | 第44页 |
6.1.1 植物材料 | 第44页 |
6.1.2 实验试剂 | 第44页 |
6.2 实验方法 | 第44-47页 |
6.2.1 过表达载体的构建 | 第44-45页 |
6.2.2 农杆菌的转化及拟南芥的转化 | 第45页 |
6.2.3 转基因拟南芥的鉴定及表型观测 | 第45-47页 |
6.3 结果与分析 | 第47-51页 |
6.3.1 过表达载体的构建 | 第47-48页 |
6.3.2 转基因拟南芥的鉴定及表型观测 | 第48-51页 |
6.4 讨论 | 第51-53页 |
第七章 全文结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61页 |