中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9页 |
1 前言 | 第10-11页 |
2 文献综述 | 第11-29页 |
2.1 红麻转基因国内外研究概况和研究水平 | 第11-12页 |
2.2 植物基因转化方法研究进展 | 第12-16页 |
2.2.1 根癌农杆菌Ti质粒介导基因转化 | 第12-13页 |
2.2.2 发根农杆菌Ri质粒载体基因转化 | 第13-14页 |
2.2.3 植物病毒载体介导基因转化 | 第14页 |
2.2.4 DNA直接导入基因转化 | 第14-16页 |
2.2.5 种质系统介导基因转化 | 第16页 |
2.3 花粉管通道法分子育种技术的提出 | 第16-18页 |
2.3.1 转基因受体分类 | 第17页 |
2.3.2 转化方法 | 第17-18页 |
2.3.3 转基因后代材料的检测鉴定 | 第18页 |
2.3.4 后代的遗传特性 | 第18页 |
2.4 花粉管通道法转基因的应用 | 第18-19页 |
2.5 利用花粉管通道法进行红麻抗虫转基因 | 第19页 |
2.6 花粉管通道法转基因技术评价与发展望 | 第19-21页 |
2.7 转基因植物的检测与检验 | 第21-29页 |
2.7.1 蛋白质检测 | 第23-25页 |
2.7.2 DNA检测 | 第25-29页 |
3 材料和方法 | 第29-38页 |
3.1 供试材料及来源 | 第29页 |
3.2 方法 | 第29-33页 |
3.2.1 质粒大量和小量提取所需药品 | 第29-30页 |
3.2.2 质粒DNA的小量制备操作步骤 | 第30-31页 |
3.2.3 质粒DNA的大量制备操作步骤 | 第31-32页 |
3.2.4 田间实验设计 | 第32-33页 |
3.3 红麻总DNA提取及PCR检测 | 第33-36页 |
3.3.1 提取缓冲液 | 第33-34页 |
3.3.2 用CTAB法提取红麻总DNA步骤 | 第34页 |
3.3.3 转基因红麻的PCR检测 | 第34-35页 |
3.3.4 转基因红麻的ISSR检测 | 第35-36页 |
3.4 转基因红麻的Southern杂交检测 | 第36-38页 |
4 结果与分析 | 第38-51页 |
4.1 质粒提取结果与分析 | 第38-39页 |
4.2 DNA提取结果与鉴定 | 第39-41页 |
4.3 田间实验结果与分析 | 第41-48页 |
4.3.1 不同浓度抗虫基因质粒导入六个红麻受体品种的效果统计 | 第41-43页 |
4.3.2 抗虫转基因室内鉴定 | 第43-45页 |
4.3.3 室内鉴定实验重复验证实验 | 第45-46页 |
4.3.4 抗虫红麻的田间观察 | 第46-47页 |
4.3.5 红麻对照与抗虫转基因的考种数据比较 | 第47-48页 |
4.4 转基因后代的PCR检测 | 第48-49页 |
4.5 转基因后代的ISSR检测结果 | 第49-50页 |
4.6 Southern杂交结果 | 第50-51页 |
5 讨论 | 第51-54页 |
5.1 红麻的花粉管通道转基因方法 | 第51页 |
5.2 提高花粉管通道法转基因成活率、成株率、转化率的对策 | 第51-52页 |
5.3 利用分子标记ISSR或RAPD分析外源基因整合的原理 | 第52页 |
5.4 导入的外源基因稳定性问题 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58页 |