| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 我国酸性土壤的分布及其铝的毒害 | 第11-13页 |
| 1.1 我国酸性土壤的分布 | 第11-12页 |
| 1.2 土壤里铝的存在形式 | 第12页 |
| 1.3 铝对植物的毒害 | 第12-13页 |
| 2 植物耐铝的机制 | 第13-15页 |
| 2.1 外部耐铝机制 | 第13-14页 |
| 2.2 内部耐铝机制 | 第14-15页 |
| 3 紫花苜蓿概述 | 第15-16页 |
| 4 紫花苜蓿转基因研究 | 第16-19页 |
| 4.1 紫花苜蓿再生体系和遗传转化方法 | 第16-17页 |
| 4.2 紫花苜蓿转基因取得的成果 | 第17-19页 |
| 4.2.1 抗生物胁迫方面 | 第17页 |
| 4.2.2 抗非生物胁迫方面 | 第17-18页 |
| 4.2.3 品质改良方面 | 第18页 |
| 4.2.4 转基因紫花苜蓿作为生物发生器 | 第18-19页 |
| 5 柠檬酸合成酶基因工程研究 | 第19-21页 |
| 1 引言 | 第21-23页 |
| 1.1 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 1.2 研究主要内容 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 生物材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 质粒及载体 | 第23-24页 |
| 2.2 遗传转化所用的培养基 | 第24页 |
| 2.2.1 培养农杆菌的LB培养基 | 第24页 |
| 2.2.2 遗传转化培养基 | 第24页 |
| 2.3 仪器和试剂 | 第24-25页 |
| 2.3.1 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.3.2 主要生化试剂 | 第24-25页 |
| 2.4 试验方法 | 第25-33页 |
| 2.4.1 紫花苜蓿遗传转化 | 第25-26页 |
| 2.4.2 转基因植株的分子检测 | 第26-30页 |
| 2.4.2.1 转基因植株的PCR检测 | 第26-27页 |
| 2.4.2.2 转基因植株的RT-PCR检测 | 第27-28页 |
| 2.4.2.3 转基因植株的实时荧光定量PCR检测 | 第28-30页 |
| 2.4.3 转基因植株的生理检测 | 第30-32页 |
| 2.4.3.1 转基因植株的酶活测定 | 第30-31页 |
| 2.4.3.2 转基因植株叶片和根尖有机酸含量测定 | 第31-32页 |
| 2.4.4 转基因植株耐铝测定 | 第32页 |
| 2.4.5 转基因植株根系的有机酸分泌量测定 | 第32-33页 |
| 2.5 数据处理 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-51页 |
| 3.1 遗传转化 | 第35页 |
| 3.2 转基因抗性植株的鉴定 | 第35-42页 |
| 3.2.1 转基因抗性植株在DNA水平上的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2.2 转基因抗性植株在RNA水平上的鉴定 | 第36-38页 |
| 3.2.3 转基因抗性植株在RNA水平上的实时荧光定量PCR鉴定 | 第38-42页 |
| 3.2.3.1 RNA浓度及电泳图 | 第39页 |
| 3.2.3.2 实时荧光定量PCR结果 | 第39-42页 |
| 3.3 转基因植株生理水平上的鉴定 | 第42-51页 |
| 3.3.1 转基因植株CS酶活性测定 | 第42-43页 |
| 3.3.2 转基因植株柠檬酸含量测定 | 第43-45页 |
| 3.3.2.1 转基因植株叶片柠檬酸含量 | 第43-44页 |
| 3.3.2.2 转基因植株根尖柠檬酸含量 | 第44-45页 |
| 3.3.3 转基因植株铝处理下柠檬酸分泌量测定 | 第45-46页 |
| 3.3.4 转基因植株在铝处理下根伸长及根尖染色 | 第46-51页 |
| 3.3.4.1 转基因植株在铝处理下根伸长结果 | 第46-47页 |
| 3.3.4.2 转基因植株在铝处理下根尖染色结果 | 第47-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| 4.1 遗传转化率低 | 第51页 |
| 4.2 转基因植株在转录水平上的差异 | 第51-52页 |
| 4.3 转基因植株与野生株在生理水平上的差异 | 第52-55页 |
| 5 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 缩略词 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 论文发表及参加课题情况 | 第68页 |
