| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 海南粗榧研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.1 海南粗榧简介 | 第10页 |
| 1.1.2 海南粗榧的药用价值 | 第10页 |
| 1.1.3 海南粗榧资源概况 | 第10-11页 |
| 1.2 植物次生代谢细胞工程调控 | 第11-14页 |
| 1.2.1 外植体和基本培养基调控 | 第11-12页 |
| 1.2.2 培养条件的优化 | 第12页 |
| 1.2.3 添加前体物的影响 | 第12-13页 |
| 1.2.4 添加代谢抑制的影响 | 第13页 |
| 1.2.5 添加诱导子的影响 | 第13页 |
| 1.2.6 植物细胞培养方法 | 第13-14页 |
| 1.3 海南粗榧代谢途径研究 | 第14-18页 |
| 1.3.1 植物细胞工程调控模式 | 第14-15页 |
| 1.3.2 三尖杉酯类碱骨架的生物合成 | 第15-18页 |
| 1.4 本课题研究的目的与意义 | 第18页 |
| 1.5 本课题研究的主要内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-28页 |
| 2.1 试验材料与仪器试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试验试剂 | 第19-20页 |
| 2.2 海南粗榧悬浮细胞培养方法 | 第20页 |
| 2.3 试验设计 | 第20-21页 |
| 2.3.1 NaF对海南粗榧悬浮细胞生长和三尖杉酯类碱合成的影响 | 第20-21页 |
| 2.3.2 L-丙氨酸及其衍生物对海南粗榧悬浮细胞生长和三尖杉酯类碱合成的影响 | 第21页 |
| 2.3.3 L-色氨酸及其衍生物对海南粗榧悬浮细胞生长和三尖杉酯类碱合成的影响 | 第21页 |
| 2.3.4 代谢调节剂协同作用对海南粗榧悬浮细胞生长和三尖杉酯类碱合成的影响 | 第21页 |
| 2.4 试验分析方法 | 第21-28页 |
| 2.4.1 细胞生物量测定 | 第21-22页 |
| 2.4.2 培养液糖浓度测定 | 第22-23页 |
| 2.4.5 细胞活力的测定 | 第23页 |
| 2.4.6 G6PDH活力测定 | 第23页 |
| 2.4.7 丙酮酸激酶活力测定 | 第23页 |
| 2.4.8 丙酮酸含量测定 | 第23-24页 |
| 2.4.9 磷酸果糖激酶(PFK)活性测定 | 第24-25页 |
| 2.4.10 3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶(DS)酶活测定 | 第25页 |
| 2.4.11 莽草酸含量测定 | 第25页 |
| 2.4.12 苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)的测定 | 第25页 |
| 2.4.13 总酚测定 | 第25页 |
| 2.4.14 三尖杉酯类碱的提取与测定 | 第25-27页 |
| 2.4.15 统计分析 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-52页 |
| 3.1 添加氟化钠(NaF)对海南粗榧悬浮细胞产三尖杉酯类碱的影响 | 第28-33页 |
| 3.1.1 NaF对海南粗榧悬浮细胞生长的影响 | 第28页 |
| 3.1.2 NaF对海南粗榧悬浮细胞活性的影响 | 第28-29页 |
| 3.1.3 NaF对海南粗榧悬浮细胞培养基糖耗的影响 | 第29页 |
| 3.1.4 NaF对三尖杉酯类碱合成的影响 | 第29-30页 |
| 3.1.5 代谢途径中关键酶及中间产物含量的影响 | 第30-33页 |
| 3.2 添加丙氨酸及其衍生物对海南粗榧悬浮细胞产三尖杉酯类碱的影响 | 第33-41页 |
| 3.2.1 L-丙氨酸对海南粗榧悬浮细胞生长和产三尖杉酯类碱的影响 | 第33-35页 |
| 3.2.2 L-环己基丙氨酸对海南粗榧悬浮细胞生长和产三尖杉酯类碱的影响 | 第35-37页 |
| 3.2.3 D-丙氨酸对海南粗榧悬浮细胞生长和产三尖杉酯类碱的影响 | 第37-39页 |
| 3.2.4 添加L-丙氨酸及其衍生物对海南粗榧植物细胞代谢途径中关键酶及中间产物含量的影响 | 第39-41页 |
| 3.3 添加色氨酸及其衍生物对海南粗榧悬浮细胞产三尖杉酯类碱的影响 | 第41-47页 |
| 3.3.1 L-色氨酸对海南粗榧悬浮细胞生长和产三尖杉酯类碱的影响 | 第41-43页 |
| 3.3.2 5-甲基-DL-色氨酸对海南粗榧悬浮细胞生长和产三尖杉酯类碱的影响 | 第43-45页 |
| 3.3.3 添加色氨酸及其衍生物对海南粗榧植物细胞代谢途径中关键酶及中间产物含量的影响 | 第45-47页 |
| 3.4 代谢调节剂的联合使用对海南粗榧悬浮细胞生长及三尖杉酯类碱合成的影响 | 第47-52页 |
| 3.4.1 代谢抑制剂联合使用对海南粗榧悬浮细胞生长的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.2 代谢抑制剂联合使用对海南粗榧悬浮细胞活力的影响 | 第48页 |
| 3.4.3 代谢抑制剂联合使用对三尖杉酯类碱合成的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.4 代谢途径中关键酶及中间产物含量的影响 | 第49-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 4.1 添加代谢抑制剂对海南粗榧悬浮细胞初生代谢的影响 | 第52页 |
| 4.2 添加代谢抑制剂对三尖杉酯类碱合成途径中不同代谢通路的影响 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 5.1 代谢抑制剂对细胞初生代谢的影响 | 第54页 |
| 5.2 代谢抑制剂对产物三尖杉酯类碱合成途径中不同代谢通路的影响 | 第54页 |
| 5.3 代谢抑制剂对产物三尖杉酯类碱含量的影响 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
